狼毒不同溶剂提取物杀烟蚜活性初步测定

熊纳纳++刘铁++代林枫++梁倩

摘要：研究了石油醚、氯仿、乙酸乙酯以及水这4种不同溶剂对狼毒（Euphorbia fischeriana Steud）提取物的杀烟蚜（Myzus persicae）活性。结果表明，石油醚提取物的杀蚜虫活性最好，在浓度为0.500 mg/mL，时间为12 h时，蚜虫全部死亡。其他3种溶剂提取物的杀蚜虫活性相对没有明显的规律性。试验期望进一步拓展植物源农药的发展潜力，筛选出杀虫活性高的分段提取物，为进一步研究狼毒大戟提供理论依据。

关键词：狼毒（Euphorbia fischeriana Steud）；烟蚜（Myzus persicae）；杀虫活性

中图分类号：S482.5+9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）05-0870-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.05.019

Insecticidal Activity of Different Solvent Extracts from

E. fischeriana against Myzus persicae

XIONG Na-naa，LIU Tieb，DAI Lin-fengb，LIANG Qianb

（Southwest Forestry University， a. College of Material Engineering； b. College of Forestry， Kunming 650224， China）

Abstract： The different solvent extracts from Euphorbia fischeriana including petroleum ether， chloroform， ethyl acetate and water were tested to study their insecticidal activities against Myzus persicae. The results showed that petroleum ether extract had the best insecticidal activity against Myzus persicae，and all aphids had been killed at the concentration of 0.500 mg/mL and at 12 hours. Comparatively，the other three solvent extracts showed no clear regularity. By the experiment，it can be expected to further expand the development potential of botanical pesticides， and screen out segmented extracts with high insecticidal activity，as well as provide theoretical basis for the further study of Euphorbia fischeriana.

Key words： E. fischeriana； Myzus persicae； insecticidal activity

狼毒（Euphorbia fischeriana Steud）系大戟科大戟属多年生草本植物，分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古（东部）和山东（烟台、崂山）等地。生长于海拔100～600 m的草原、干燥丘陵坡地、多石砾干山坡及阳坡稀疏的松林下。根入药，主治结核类、痔疮癣类等病症，有毒[1]。目前对狼毒大戟的研究主要集中在狼毒根部的化学成分、药理活性及植物源农药等方面。其主要化学成分有萜类、甾醇和酚酸性化合物等[2]，主要药理活性有抑菌[3-5]、抗病毒[6，7]、抗癌[8-14]等，毒杀的害虫主要有蛾蝶类、红蜘蛛、落叶松球蚜[15]、杨扇舟蛾、舞毒蛾、黄褐天幕毛虫[16]、朱砂叶螨[17]、家蚕[18]等。徐德昌等[19]报道了大戟狼毒（Radix euphorbiae Fischerianae）对蔬菜桃蚜的毒杀作用，但与本研究的狼毒（Euphorbia fischeriana Steud）不是同一个种。狼毒地上部分的化学成分及杀蚜虫的活性未见报道。

烟蚜（Myzus persicae）是一种为害烟草的害虫，传播多种植物病毒，例如黄瓜花叶病、烟草蚀纹病、马铃薯Y病毒病等[20]，它还能刺吸烟叶汁液，引起植物营养缺乏，导致植株畸形生长、落叶甚至枯死[21]，严重影响了烟叶的产量和质量。

化学农药存在毒性、残留和抗性问题，导致植物源农药成为当今研究的热点之一，因为植物源农药对人畜相对安全，较少环境污染，抗性发展较缓慢，受到农药和植物资源研究者的重视。

张建英等[22]对益母草、龙葵、苍耳、白癣、菖蒲、葫芦巴、蒺藜、黑柴胡、钩腺大戟、伏毛铁棒锤、瑞香狼毒等11种植物提取物，进行枸杞蚜虫的拒食和毒杀活性研究，发现瑞香狼毒毒杀活性最强，因此本试验就狼毒大戟地上部分杀烟蚜活性进行探讨，以期为狼毒大戟资源的应用提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料

狼毒（狼毒地上部分，2014年10月采自云南省迪庆藏族自治州香格里拉县），经西南林业大学林学院植物学教研室杜凡教授鉴定为大戟科大戟属植物狼毒；石油醚（分析纯，天津市风船化学试剂科技有限公司）；氯仿（分析纯，云南杨林工业开发区汕滇药业有限公司）；乙酸乙酯（分析纯，广东省化学试剂工程技术研究开发中心）；烟苗（西南林业大学温室大棚培养）；供试蚜虫采自西南林业大學林学院温室大棚养殖的烟苗上。

1.2 试验方法

将阴干的2.5 kg狼毒地上部分材料粉碎，用95%的乙醇冷浸3次，用旋转蒸发仪将提取液浓缩成浸膏。将浸膏用水悬浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取3次，将萃取液用旋转蒸发仪进行浓缩合并，最后得到总浸膏348 g。萃取后得到石油醚提取物浸膏6 g，得到氯仿提取物浸膏15 g，得到乙酸乙酯提取物浸膏54 g，水提取物浸膏273 g。查阅国家对于农药使用的相关标准要求，将4种提取物浸膏分别配制成6个不同浓度梯度，分别为0.125、0.250、0.500、1.000、1.500和2.000 mg/mL。

采用叶片浸渍法[23，24]：选取生长良好的新鲜烟叶片，在药液中浸渍5 s后取出，放在培养皿内，吸去多余的药液，并将湿润的棉条包裹在叶柄处，以保持叶片湿度；挑取30头大小一致、行动活泼的蚜虫，将蚜虫转移到叶片上，放在温度25 ℃、相对湿度85%左右的培养箱中培养，分别于12、24、36和48 h观察试虫的反应症状，记录死亡虫口数（死亡标准为试虫不能正常活动或者轻轻触动虫体无任何反应）。每个处理重复3次，计算死亡率，数据取3次重复的平均值。死亡率计算公式如下：死亡率=死亡数/供试总数×100%。

2 結果与分析

狼毒的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水提取物的杀蚜虫活性试验数据见下表1、表2、表3、表4。

由表1可知，随着时间的增加，蚜虫死亡率升高，浓度为0.500 mg/mL，12 h观察时，蚜虫已经全部死亡。

由表2可知，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，但是随着浓度的增加，死亡率的变化先降低后升高。

由表3可知，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，随着浓度的增加，规律不是很明显，但是基本呈现升高趋势。

由表4可知，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，但是随着浓度的变化，蚜虫死亡率变化没有规律。

从表1可以看出，随着时间以及浓度的增加，蚜虫死亡率升高，在浓度为0.500 mg/mL，时间为12 h时，蚜虫已经全部死亡，表明石油醚提取物杀烟蚜作用最强。从表2、表3、表4可以看出，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，但是随着浓度的增加，死亡率的变化没有规律性。

3 小结与讨论

本试验用乙醇提取狼毒浸膏，将浸膏用水悬浮，用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，将萃取后的液体部分蒸干，得到四部分粗提物。将四部分粗提物分别配成6组不同的浓度，做杀蚜虫试验，观察蚜虫死亡情况，进行记录。从试验结果可以看出，石油醚提取物杀虫活性最强，在浓度为0.500 mg/mL，时间为12 h时，蚜虫已经全部死亡。

烟蚜通过取食烟苗汁液生存，在取食的过程中会传播疾病，也会导致烟苗营养物质流失、畸形生长甚至死亡，影响产量和质量。狼毒植物化学成分、药理活性及杀虫活性复杂多样。刘素琪等[25]用狼毒大戟的提取物对朱砂叶螨进行杀虫活性试验，发现石油醚部分杀虫活性最强，赵奎君等[26]用狼毒大戟的提取物对结核杆菌抑菌试验发现石油醚部分抑菌作用最强，本试验也是石油醚部分杀烟蚜活性最强。因此，希望后续研究者通过对狼毒石油醚部分进行化合物的提取分离、结构鉴定、构效关系研究，期望从狼毒的石油醚部分分离得到高效低毒的植物源无公害杀虫剂，再将其应用到农业中，为广大的烟农造福。

参考文献：

[1] 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志[M].北京：科学出版社，2004.

[2] 么焕开，张文婷，郑雪晶.狼毒大戟化学成分及药理作用研究进展[J].中成药，2010，32（8）：1404-1406.

[3] 孙瑞艳，陈亚彤，范海延，等.狼毒大戟根提取物抑菌活性及其提取方法初探[J].中国蔬菜，2010（16）：67-73.

[4] 庞丽纹，丁立军，简 丽，等.狼毒大戟生药提取物抑菌活性的初步研究[J].内蒙古农业大学学报（自然科学版），2012，33（Z1）：253-256.

[5] 赵奎君，刘锁兰，李洪敏.狼毒大戟中不同组分和成分抗结核杆菌作用的研究[J].中国药师，2007，10（11）：1063-1065.

[6] 王学林，邓旭明，袁书智，等.狼毒大戟抗菌抗病毒作用初步研究[J].中兽医医药杂志，2001，20（6）：5-7.

[7] 俞媚华，侯爱君.狼毒大戟抗乙肝病毒活性成分的研究[J].中国中药杂志，2010，35（22）：3002-3006.

[8] 姚 苹，崔 晞，刘 萍，等.狼毒大戟对病毒性T细胞白血病的抑制作用[J].中华微生物学和免疫学杂志，2003，23（3）：183-187.

[9] 杨 柯，王义善，赵腾达.狼毒大戟对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡影响及其机制的初步探讨[J].中华肿瘤防治杂志，2012，19（9）：652-654.

[10] 刘文粢，何风雷，阮子镛，等.狼毒大戟二萜内酯对人癌细胞体外抑制作用的研究[J].中药材，2000，23（10）：623-625.

[11] 简白羽，郭丽娜，马立威，等.狼毒大戟中没食子酸乙酯的提取分离及抗肿瘤活性[J].中医药信息，2014，31（3）：7-9.

[12] LEE S H，TANAKA T，NONAKA G I.Allose gallates from Euphorbia fischeriana[J].Phytochemistry，1991，30（4）：1251-1253.

[13] 何华红，王华倩，严小红，等.月腺大戟与狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖的影响对比研究[J].中国药房，2012， 23（15）：1359-1361.

[14] 何华红，刘 肃，李 薇，等.月腺大戟及狼毒大戟体外抗肿瘤药理活性对比研究[J].中药材，2011，34（6）：950-952.

[15] 张 萍，梁延海，赵雪岭，等.狼毒大戟人工栽培及其生物农药开发[J].防护林科技，2005（5）：87.

[16] 孙继武，周 彪，郝德君.几种有毒植物提取物对食叶害虫的生物活性研究[J].中国林副特产，2005（1）：40-42.

[17] 顾雅静，高宝岩，周广录，等.大戟狼毒提取物对朱砂叶螨生物活性的研究[J].天津农林科技，2011（2）：1-3.

[18] 侯伟倬，甄占萱，李云祥.狼毒大戟水浸液对家蚕的药杀效果[J].安徽农业科学，2011，39（6）：3251-3252.

[19] 徐德昌，骆成高，陈凤芝.大戟狼毒杀虫剂药效试验[J].中国甜菜糖业，2004（2）：5-7.

[20] 任广伟，张连涛.烟蚜和烟青虫的发生与防治[J].烟草科技，2002（5）：43-45.

[21] 马亚玲，刘长仲.蚜虫的生态学特性及其防治[J].草业科学， 2014，31（3）：519-525.

[22] 张建英，杨贵军，于有志，等.11种植物提取物对枸杞蚜虫的拒食和毒杀活性测定[J].农业科学研究，2007，28（1）：21-23.

[23] 黄素青，徐汉虹，曾东强，等.农田害螨的几种生物测定方法[J].植物保护，2005，31（1）：79-81.

[24] 张 勇. 2种生物测定方法对杀虫剂毒力测定结果比较[J].中国果树，2007（4）：38-40.

[25] 刘素琪，顾雅静，王海香，等.大戟狼毒不同部位提取物对朱砂叶螨的触杀活性[J].林业科学，2010，46（3）：111-115.

[26] 赵奎君，杨 隽，张蒲芝.5种狼毒大戟提取物对结核杆菌抗菌作用的比较[J].时珍国医国药，2000，11（7）：589-590.