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苦荆茶多糖对小鼠免疫功能的影响

时间:2024-05-23

王炫+雷桂兰+吴中华+项俊+雷国涛

摘要:采用小鼠碳粒廓清试验和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验研究苦荆茶多糖对小鼠免疫功能的影响。将试验小鼠分为3组,即空白对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)和苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药),给药方式为灌胃给药。7 d后,测定小鼠脾脏指数、碳粒廓清指数、吞噬指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果表明,苦荆茶多糖给药组和左旋咪唑给药组小鼠的碳粒廓清指数、脾脏指数和吞噬指数均显著(P<0.01或P<0.05)高于空白对照组,腹腔巨噬细胞吞噬功能显著(P<0.05)高于空白对照组。说明苦荆茶多糖具有增强小鼠机体免疫力的作用。

关键词:苦荆茶多糖;碳粒廓清指数;脾脏指数;吞噬指数;腹腔巨噬细胞吞噬功能;小鼠

中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)17-4123-03

Effects of Polysaccharide from Kujingcha on Immune Function of Mice

WANG Xuan1, LEI Gui-Lan1, WU Zhong-Hua1, XIANG Jun1, LEI Guo-tao2

(1. Hubei Key Laboratory of Economic Forest Germplsam Improvement and Resources Comprehensive Utilization/College of Life Scieces, Huanggang Normal University, Huanggang 438000, Hubei, China; 2.Kujingcha Farm of Baiyang Mountain Villa in Huilong Town, Tuanfeng County, Tuanfeng 438800, Hubei, China)

Abstract: Using carbon granules clearance test in mice and chicken RBC phagocytosis test of macrophage cell in abdominal, the effects of polysaccharide from Kujingcha on the immune functions of mice were studied. The mice were divided into 3 groups including blank control group, levamisole group, Kujingcha polysaccharide group and administrated normal saline, levamisole and Kujingcha polysaccharide with 0.6 mL, 22.5 mg per kg weight and 4 g per kg weight, respectively. After 7 days, the spleen index, carbon clearance rate, phagocytic index and monocytes-macrophages function were calculated. The results showed that the spleen index, carbon clearance rate, phagocytic index and in levamisole group and Kujingcha polysaccharide group were significantly or extreme significantly higher than that the in control group(P<0.01 or P<0.05). The monocytes-macrophages function in Kujingcha polysaccharide group were significantly higher than that in control group(P<0.05). It is indicated that Kujingcha polysaccharides could enhance the immune functions of mice.

Key words: Kujingcha polysaccharide; carbon clearance rate; spleen index; phagocytic index; monocytes-macrophages function; mice

苦荆茶属冬青科植物,分布于大别山区。目前种植的苦荆茶树种是于1967年由李树文先生扦插育苗培育而成,因味极苦,茶树叶缘生刺而得名[1],又称为黄冈苦丁茶。苦荆茶富含有人体需要的多种营养成分和矿物质元素,其中包括硒和锗两种抗癌微量元素;茶叶还含有丰富的多酚类物质、皂甙、生物碱和多糖等药用有机化合物,具有清热解毒、降压和降血脂等功效[2]。

植物多糖是一种广泛存在于植物中的天然大分子物质,由于其独特的功能,近来被广泛应用于临床来提高机体的免疫能力,增强机体的抗氧化作用,以调节生理功能。多糖类化合物作为免疫调节剂能激活淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞;还能激活补体,促进细胞因子生成等多途径对免疫系统发挥调节作用。本试验以苦荆茶粗多糖为材料,初步探讨了苦荆茶多糖对小白鼠单核吞噬细胞系统吞噬功能的影响,旨在为苦荆茶的合理开发和利用提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 材料

供试苦荆茶:试验用苦荆茶绿茶购于湖北省团风县回龙山镇白羊山庄苦荆茶场。

主要试剂:95%乙醇、碳酸钠均为AR试剂,天津市恒兴化学试剂制造有限公司;瑞氏染液(生化试剂),上海研生生化试剂有限公司;盐酸左旋咪唑片,山东仁和堂药业有限公司(批准文号:国药准字H37020819)。

主要仪器:RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),LD4-2A型离心机(北京医用离心机厂),SP-723PC型可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。

试验动物:昆明种小鼠,体重18~25 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。鸡血红细胞,由购自农贸市场家鸡屠宰获得。

1.2 方法

1.2.1 苦荆茶粗多糖的制备 将苦荆茶绿茶用粉粹机粉粹成粉末状,然后用85%的乙醇浸提3次;取沉淀残渣每次加3倍的蒸馏水文火煎煮,煎煮3次,过滤去残渣,滤液用30%的乙醇沉淀蛋白质和淀粉类物质,再次过滤收集上清液;将上清液用旋转蒸发器浓缩至浸膏状,收集浸膏,即苦荆茶多糖和糖甙类物质粗品。测定浸膏含水量,4 ℃保存备用。

1.2.2 小鼠碳粒廓清试验 苦荆茶对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响采用小鼠碳粒廓清法[3,4]。将体重约18~25 g小鼠随机分为3组,每组8只,雌雄各半。设立正常对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)、苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药)。灌胃给药,每天1次,空白对照组小鼠按0.6 mL/只给予生理盐水,连续给药7 d。末次给药后称鼠体重;末次给药2 h后,每鼠尾静脉注射8倍稀释的印度墨汁0.1 mL/10 g体重;分别于第1分钟和第3分钟用毛细采血管在小鼠眼眶后静脉丛取血20 μL溶于盛有2 mL 0.2%碳酸钠溶液的试管内。以0.2%碳酸钠溶液作空白对照,于600 nm波长处测定吸光度(A)。最后将小鼠颈椎脱臼处死,分别称取肝、脾质量,并计算脾脏指数、碳粒廓清指数(k)和吞噬指数(α)。

脾脏指数=脾脏质量(mg)/体重(g)

k=(logAl-logA2)/(t2-t1)

α=k1/3×体重/(肝重+脾重)

式中,t1、t2分别为注射印度墨汁后两次采血时间,A1、A2分别为注射印度墨汁后第1分钟和第3分钟采血样品经处理后的吸光度。

1.2.3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验 鸡血红细胞制备:鸡颈部静脉采血,置于锥形瓶中,加入相当于1/5血液量的5%柠檬酸钠溶液摇匀,4 ℃贮存。临用时用生理盐水配成5%浓度。

苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响试验[5]:将体重约18~25 g小鼠随机分为3组,即正常对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)、苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药)。每组8只,雌雄各半。灌胃给药,每天1次,空白对照组小鼠按0.6 mL/只给予生理盐水,连续给药7 d。于第七天早上每鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水溶液0.5 mL,2 h后灌胃给药,给药2 h后,颈椎脱臼处死小鼠。腹腔注入生理盐水2 mL,轻揉小鼠腹部,剖腹,吸出腹腔洗液1 mL,分滴于2片载玻片上,放湿盒内,移至37 ℃温箱孵育30 min,漂洗,晾干,以甲醛固定,瑞氏染色,油镜下观察100个巨噬细胞,计算其吞噬率。

1.2.4 统计学处理 所有数据用SPSS 12.0统计软件处理,组间多样本均数间比较采用单因素方差分析,组内给药前后比较采用配对t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 苦荆茶多糖对小鼠碳粒廓清能力的影响

采用小鼠碳粒廓清试验,检测了苦荆茶多糖对小鼠单核吞噬细胞系统细胞吞噬功能的影响,结果见表1。由表1可知,阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组小鼠对碳粒的廓清指数及脾脏指数均极显著(P<0.01)高于空白对照组;单核巨噬细胞的吞噬指数方面,阳性药物对照组极显著(P<0.01)高于空白对照组,苦荆茶多糖给药组显著(P<0.05)高于空白对照组,而阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组之间无显著性差异。说明苦荆茶多糖能明显增强小鼠的碳粒廓清能力。

2.2 苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

采用小鼠腹腔注射鸡血红细胞方法,检测了苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果见表2。由表2可知,阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能显著(P<0.05)高于空白对照组;而阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组之间无显著性差异。说明苦荆茶多糖能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

3 小结与讨论

多糖由单糖聚合而成,是聚合度超过10的极性大分子。由于多糖组分中单糖的种类繁多,连接形式千差万别,由此决定了多糖生物学活性的多样性[6-8],某些中药多糖的一级结构相似,但生物学活性差异很大,主要原因在于它们的二级结构或三级结构不同。高等动物细胞表面分布有许多糖脂和糖蛋白,其多参与细胞识别和信号转导环节,调节细胞内生理生化活动,多糖对哺乳动物的免疫细胞功能有调节作用可能与细胞表面识别分子的化学组成及结构有关。

哺乳动物的非特异性免疫系统中最重要的吞噬功能细胞是单核吞噬细胞系统的细胞,它们在机体内既起着吞噬细菌、衰老细胞、病变细胞、肿瘤细胞作用,还呈递抗原、分泌细胞因子调节机体免疫功能。本试验将提取的苦荆茶粗多糖以灌胃方式饲喂小鼠,然后检测了小鼠对碳粒的廓清能力和腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的能力。结果表明,苦荆茶多糖给药组小鼠的碳粒廓清指数、吞噬指数和脾脏指数显著(P<0.01或P<0.05)高于空白对照组,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞比率也显著(P<0.05)高于空白对照组。表明苦荆茶多糖可提高小鼠的碳粒廓清能力,增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能,小鼠脾脏重量增加,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力增强。表明苦荆茶多糖能提高小鼠的非特异性免疫功能,长期饮用苦荆茶可以提高人体的免疫机能,起到抗衰老的作用。

参考文献:

[1] 李树文.苦荆茶[J].特产研究,1991(1):31,45.

[2] 王 娟,吴中华,丁海峰,等.苦荆茶提取物对高血脂症小鼠血脂的影响[J].黄冈师范学院学报,2006,26(6):54-56,72.

[3] 陈 奇. 中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社, 1993.757-759.

[4] 覃容贵,李淑芳,罗中圣.九头狮子草对小鼠免疫功能的影响[J]. 贵阳医学院学报,2003,28(5):405.

[5] 宫晓燕,曲晓波,王泽玉,等.扶正除疫颗粒对免疫功能低下动物免疫调节的影响[J].中国临床药理学与治疗学,2005,10(8): 929-931.

[6] 汪东风,谢晓凤.茶多糖的组分及理化性质[J].茶叶科学,1996, 16 (1):1-8.

[7] 齐春会,张永祥,赵修南,等.枸杞粗多糖的免疫性[J].中国药理学与毒理学杂志,2001,15(3):180-184.

[8] 周裔彬,汪东风,周小玲,等.茶叶多糖复合物的研究进展[J].食品与发酵工业,2005,31(2):90-91.

主要试剂:95%乙醇、碳酸钠均为AR试剂,天津市恒兴化学试剂制造有限公司;瑞氏染液(生化试剂),上海研生生化试剂有限公司;盐酸左旋咪唑片,山东仁和堂药业有限公司(批准文号:国药准字H37020819)。

主要仪器:RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),LD4-2A型离心机(北京医用离心机厂),SP-723PC型可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。

试验动物:昆明种小鼠,体重18~25 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。鸡血红细胞,由购自农贸市场家鸡屠宰获得。

1.2 方法

1.2.1 苦荆茶粗多糖的制备 将苦荆茶绿茶用粉粹机粉粹成粉末状,然后用85%的乙醇浸提3次;取沉淀残渣每次加3倍的蒸馏水文火煎煮,煎煮3次,过滤去残渣,滤液用30%的乙醇沉淀蛋白质和淀粉类物质,再次过滤收集上清液;将上清液用旋转蒸发器浓缩至浸膏状,收集浸膏,即苦荆茶多糖和糖甙类物质粗品。测定浸膏含水量,4 ℃保存备用。

1.2.2 小鼠碳粒廓清试验 苦荆茶对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响采用小鼠碳粒廓清法[3,4]。将体重约18~25 g小鼠随机分为3组,每组8只,雌雄各半。设立正常对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)、苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药)。灌胃给药,每天1次,空白对照组小鼠按0.6 mL/只给予生理盐水,连续给药7 d。末次给药后称鼠体重;末次给药2 h后,每鼠尾静脉注射8倍稀释的印度墨汁0.1 mL/10 g体重;分别于第1分钟和第3分钟用毛细采血管在小鼠眼眶后静脉丛取血20 μL溶于盛有2 mL 0.2%碳酸钠溶液的试管内。以0.2%碳酸钠溶液作空白对照,于600 nm波长处测定吸光度(A)。最后将小鼠颈椎脱臼处死,分别称取肝、脾质量,并计算脾脏指数、碳粒廓清指数(k)和吞噬指数(α)。

脾脏指数=脾脏质量(mg)/体重(g)

k=(logAl-logA2)/(t2-t1)

α=k1/3×体重/(肝重+脾重)

式中,t1、t2分别为注射印度墨汁后两次采血时间,A1、A2分别为注射印度墨汁后第1分钟和第3分钟采血样品经处理后的吸光度。

1.2.3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验 鸡血红细胞制备:鸡颈部静脉采血,置于锥形瓶中,加入相当于1/5血液量的5%柠檬酸钠溶液摇匀,4 ℃贮存。临用时用生理盐水配成5%浓度。

苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响试验[5]:将体重约18~25 g小鼠随机分为3组,即正常对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)、苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药)。每组8只,雌雄各半。灌胃给药,每天1次,空白对照组小鼠按0.6 mL/只给予生理盐水,连续给药7 d。于第七天早上每鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水溶液0.5 mL,2 h后灌胃给药,给药2 h后,颈椎脱臼处死小鼠。腹腔注入生理盐水2 mL,轻揉小鼠腹部,剖腹,吸出腹腔洗液1 mL,分滴于2片载玻片上,放湿盒内,移至37 ℃温箱孵育30 min,漂洗,晾干,以甲醛固定,瑞氏染色,油镜下观察100个巨噬细胞,计算其吞噬率。

1.2.4 统计学处理 所有数据用SPSS 12.0统计软件处理,组间多样本均数间比较采用单因素方差分析,组内给药前后比较采用配对t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 苦荆茶多糖对小鼠碳粒廓清能力的影响

采用小鼠碳粒廓清试验,检测了苦荆茶多糖对小鼠单核吞噬细胞系统细胞吞噬功能的影响,结果见表1。由表1可知,阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组小鼠对碳粒的廓清指数及脾脏指数均极显著(P<0.01)高于空白对照组;单核巨噬细胞的吞噬指数方面,阳性药物对照组极显著(P<0.01)高于空白对照组,苦荆茶多糖给药组显著(P<0.05)高于空白对照组,而阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组之间无显著性差异。说明苦荆茶多糖能明显增强小鼠的碳粒廓清能力。

2.2 苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

采用小鼠腹腔注射鸡血红细胞方法,检测了苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果见表2。由表2可知,阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能显著(P<0.05)高于空白对照组;而阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组之间无显著性差异。说明苦荆茶多糖能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

3 小结与讨论

多糖由单糖聚合而成,是聚合度超过10的极性大分子。由于多糖组分中单糖的种类繁多,连接形式千差万别,由此决定了多糖生物学活性的多样性[6-8],某些中药多糖的一级结构相似,但生物学活性差异很大,主要原因在于它们的二级结构或三级结构不同。高等动物细胞表面分布有许多糖脂和糖蛋白,其多参与细胞识别和信号转导环节,调节细胞内生理生化活动,多糖对哺乳动物的免疫细胞功能有调节作用可能与细胞表面识别分子的化学组成及结构有关。

哺乳动物的非特异性免疫系统中最重要的吞噬功能细胞是单核吞噬细胞系统的细胞,它们在机体内既起着吞噬细菌、衰老细胞、病变细胞、肿瘤细胞作用,还呈递抗原、分泌细胞因子调节机体免疫功能。本试验将提取的苦荆茶粗多糖以灌胃方式饲喂小鼠,然后检测了小鼠对碳粒的廓清能力和腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的能力。结果表明,苦荆茶多糖给药组小鼠的碳粒廓清指数、吞噬指数和脾脏指数显著(P<0.01或P<0.05)高于空白对照组,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞比率也显著(P<0.05)高于空白对照组。表明苦荆茶多糖可提高小鼠的碳粒廓清能力,增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能,小鼠脾脏重量增加,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力增强。表明苦荆茶多糖能提高小鼠的非特异性免疫功能,长期饮用苦荆茶可以提高人体的免疫机能,起到抗衰老的作用。

参考文献:

[1] 李树文.苦荆茶[J].特产研究,1991(1):31,45.

[2] 王 娟,吴中华,丁海峰,等.苦荆茶提取物对高血脂症小鼠血脂的影响[J].黄冈师范学院学报,2006,26(6):54-56,72.

[3] 陈 奇. 中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社, 1993.757-759.

[4] 覃容贵,李淑芳,罗中圣.九头狮子草对小鼠免疫功能的影响[J]. 贵阳医学院学报,2003,28(5):405.

[5] 宫晓燕,曲晓波,王泽玉,等.扶正除疫颗粒对免疫功能低下动物免疫调节的影响[J].中国临床药理学与治疗学,2005,10(8): 929-931.

[6] 汪东风,谢晓凤.茶多糖的组分及理化性质[J].茶叶科学,1996, 16 (1):1-8.

[7] 齐春会,张永祥,赵修南,等.枸杞粗多糖的免疫性[J].中国药理学与毒理学杂志,2001,15(3):180-184.

[8] 周裔彬,汪东风,周小玲,等.茶叶多糖复合物的研究进展[J].食品与发酵工业,2005,31(2):90-91.

主要试剂:95%乙醇、碳酸钠均为AR试剂,天津市恒兴化学试剂制造有限公司;瑞氏染液(生化试剂),上海研生生化试剂有限公司;盐酸左旋咪唑片,山东仁和堂药业有限公司(批准文号:国药准字H37020819)。

主要仪器:RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),LD4-2A型离心机(北京医用离心机厂),SP-723PC型可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。

试验动物:昆明种小鼠,体重18~25 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。鸡血红细胞,由购自农贸市场家鸡屠宰获得。

1.2 方法

1.2.1 苦荆茶粗多糖的制备 将苦荆茶绿茶用粉粹机粉粹成粉末状,然后用85%的乙醇浸提3次;取沉淀残渣每次加3倍的蒸馏水文火煎煮,煎煮3次,过滤去残渣,滤液用30%的乙醇沉淀蛋白质和淀粉类物质,再次过滤收集上清液;将上清液用旋转蒸发器浓缩至浸膏状,收集浸膏,即苦荆茶多糖和糖甙类物质粗品。测定浸膏含水量,4 ℃保存备用。

1.2.2 小鼠碳粒廓清试验 苦荆茶对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响采用小鼠碳粒廓清法[3,4]。将体重约18~25 g小鼠随机分为3组,每组8只,雌雄各半。设立正常对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)、苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药)。灌胃给药,每天1次,空白对照组小鼠按0.6 mL/只给予生理盐水,连续给药7 d。末次给药后称鼠体重;末次给药2 h后,每鼠尾静脉注射8倍稀释的印度墨汁0.1 mL/10 g体重;分别于第1分钟和第3分钟用毛细采血管在小鼠眼眶后静脉丛取血20 μL溶于盛有2 mL 0.2%碳酸钠溶液的试管内。以0.2%碳酸钠溶液作空白对照,于600 nm波长处测定吸光度(A)。最后将小鼠颈椎脱臼处死,分别称取肝、脾质量,并计算脾脏指数、碳粒廓清指数(k)和吞噬指数(α)。

脾脏指数=脾脏质量(mg)/体重(g)

k=(logAl-logA2)/(t2-t1)

α=k1/3×体重/(肝重+脾重)

式中,t1、t2分别为注射印度墨汁后两次采血时间,A1、A2分别为注射印度墨汁后第1分钟和第3分钟采血样品经处理后的吸光度。

1.2.3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验 鸡血红细胞制备:鸡颈部静脉采血,置于锥形瓶中,加入相当于1/5血液量的5%柠檬酸钠溶液摇匀,4 ℃贮存。临用时用生理盐水配成5%浓度。

苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响试验[5]:将体重约18~25 g小鼠随机分为3组,即正常对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)、苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药)。每组8只,雌雄各半。灌胃给药,每天1次,空白对照组小鼠按0.6 mL/只给予生理盐水,连续给药7 d。于第七天早上每鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水溶液0.5 mL,2 h后灌胃给药,给药2 h后,颈椎脱臼处死小鼠。腹腔注入生理盐水2 mL,轻揉小鼠腹部,剖腹,吸出腹腔洗液1 mL,分滴于2片载玻片上,放湿盒内,移至37 ℃温箱孵育30 min,漂洗,晾干,以甲醛固定,瑞氏染色,油镜下观察100个巨噬细胞,计算其吞噬率。

1.2.4 统计学处理 所有数据用SPSS 12.0统计软件处理,组间多样本均数间比较采用单因素方差分析,组内给药前后比较采用配对t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 苦荆茶多糖对小鼠碳粒廓清能力的影响

采用小鼠碳粒廓清试验,检测了苦荆茶多糖对小鼠单核吞噬细胞系统细胞吞噬功能的影响,结果见表1。由表1可知,阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组小鼠对碳粒的廓清指数及脾脏指数均极显著(P<0.01)高于空白对照组;单核巨噬细胞的吞噬指数方面,阳性药物对照组极显著(P<0.01)高于空白对照组,苦荆茶多糖给药组显著(P<0.05)高于空白对照组,而阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组之间无显著性差异。说明苦荆茶多糖能明显增强小鼠的碳粒廓清能力。

2.2 苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

采用小鼠腹腔注射鸡血红细胞方法,检测了苦荆茶多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果见表2。由表2可知,阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能显著(P<0.05)高于空白对照组;而阳性药物对照组和苦荆茶多糖给药组之间无显著性差异。说明苦荆茶多糖能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

3 小结与讨论

多糖由单糖聚合而成,是聚合度超过10的极性大分子。由于多糖组分中单糖的种类繁多,连接形式千差万别,由此决定了多糖生物学活性的多样性[6-8],某些中药多糖的一级结构相似,但生物学活性差异很大,主要原因在于它们的二级结构或三级结构不同。高等动物细胞表面分布有许多糖脂和糖蛋白,其多参与细胞识别和信号转导环节,调节细胞内生理生化活动,多糖对哺乳动物的免疫细胞功能有调节作用可能与细胞表面识别分子的化学组成及结构有关。

哺乳动物的非特异性免疫系统中最重要的吞噬功能细胞是单核吞噬细胞系统的细胞,它们在机体内既起着吞噬细菌、衰老细胞、病变细胞、肿瘤细胞作用,还呈递抗原、分泌细胞因子调节机体免疫功能。本试验将提取的苦荆茶粗多糖以灌胃方式饲喂小鼠,然后检测了小鼠对碳粒的廓清能力和腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的能力。结果表明,苦荆茶多糖给药组小鼠的碳粒廓清指数、吞噬指数和脾脏指数显著(P<0.01或P<0.05)高于空白对照组,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞比率也显著(P<0.05)高于空白对照组。表明苦荆茶多糖可提高小鼠的碳粒廓清能力,增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能,小鼠脾脏重量增加,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力增强。表明苦荆茶多糖能提高小鼠的非特异性免疫功能,长期饮用苦荆茶可以提高人体的免疫机能,起到抗衰老的作用。

参考文献:

[1] 李树文.苦荆茶[J].特产研究,1991(1):31,45.

[2] 王 娟,吴中华,丁海峰,等.苦荆茶提取物对高血脂症小鼠血脂的影响[J].黄冈师范学院学报,2006,26(6):54-56,72.

[3] 陈 奇. 中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社, 1993.757-759.

[4] 覃容贵,李淑芳,罗中圣.九头狮子草对小鼠免疫功能的影响[J]. 贵阳医学院学报,2003,28(5):405.

[5] 宫晓燕,曲晓波,王泽玉,等.扶正除疫颗粒对免疫功能低下动物免疫调节的影响[J].中国临床药理学与治疗学,2005,10(8): 929-931.

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