蔬菜中灭蝇胺残留量的液质联用分析方法

张从文 李红梅

摘 要：该研究建立了液质联用测定蔬菜中灭蝇胺残留量的实验方法。色谱柱采用Agilent SB-C18柱（2.1×50mm），以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相，样品经过提取净化柱洗脱浓缩后，采用液相串联四级杆质谱检测器测定蔬菜中灭蝇胺残留量，方法线性范围在10～100ng/mL，最低检出限为1.0μg/kg，加标回收率在75.2%～82.4%。该方法适用于蔬菜中灭蝇胺残留量的定量分析。

关键词：灭蝇胺；高效液相色谱；蔬菜；残留量

中图分类号 TS255.7 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2018）22-0091-02

灭蝇胺，CAS NO.：66215-27-8，白色或淡黄色固体，熔点220～222℃，为1，3，5，-三嗪类昆虫生长调节剂，对双翅目幼虫有特殊活性，具有内吸传导诱使昆虫在形态上发生畸变，因而常用于防治蔬菜和花卉上的美洲斑潜蝇[1-3]。国家标准GB 2763-2016[4]《食品安全国家标准 食品中农药最大残留量》规定黄瓜中最大限量值为1mg/kg，其他豆类蔬菜中最大限量值为0.5mg/kg。本文采用液质串联4级杆联用检测蔬菜中灭蝇胺的残留量，方法回收率较高，适用于蔬菜中灭蝇胺残留量的测定。

1 材料与方法

1.1 材料和仪器 灭蝇胺标准品（农业部环境保护科研检测所）；蔬菜（超市购买）；甲醇、乙腈（色谱纯）（美国天地）；超纯水（实验室自制）；Cleanert SCX-SPE固相萃取柱（天津博纳艾杰尔科技有限公司）；美国安捷伦1290-6410B串联4级杆液质联用仪。

1.2 实验方法

1.2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent SB-C18柱（2.1×50mm）；流动相：乙腈∶0.1%甲酸水溶液=20∶80，进样量1μL；流速0.2mL/min。

1.2.2 质谱条件 LC-MS-MS接口为电喷雾接口（ESI）正离子模式，离子检测模式为选择离子扫描模式（SIM），选择监测灭蝇胺的准分子离子峰及子离子峰，即m/z 167.0母离子和m/z125.0子离子。电喷雾压力4500v，喷雾气和干燥气为氮气，干燥气流速为11L/min，离子源温度：350℃。

1.2.3 标准溶液配制 准确称取灭蝇胺标准品10mg，用乙腈溶解后定容至100mL容量瓶中，摇匀，该溶液作为标准储备溶液（100μg/mL）。稀释1000倍得到100ng/mL的溶液，同种方法依次用乙腈稀释定容为10，20，40，80，100ng/mL标准系列溶液。

1.2.3 样品制备 称取20g捣碎样品于离心管中，加入40mL乙腈，用高速组织捣碎机在15000r/min，匀浆提取1min，加入5mg氯化钠，再匀浆提取1min，在3800r/min离心5min，取上清液20mL，在40℃水浴中旋转浓缩至约1mL，经过SCX-SPE净化柱净化，旋转浓缩后，用乙腈+水（3+2）定容至5mL，用0.2μm微孔滤膜过滤后进样。

2 結果与分析

2.1 流动相选择 实验中比较了不同流动相对分离度、峰形等的影响。发现在水相中加入0.1%的甲酸会提高离子化效率，灭蝇胺信噪比提高3倍，所以选择了0.1%的甲酸溶液作为流动相。另外，采取乙腈∶0.1%甲酸水=60∶40，乙腈∶0.1%甲酸水=50∶50，乙腈∶0.1%甲酸水=20∶80这3个梯度，乙腈比例20%时候峰形最好，所以实验中采用乙腈∶0.1%甲酸水=20∶80作为此次实验的流动相体系。

2.2 质谱条件的选择 灭蝇胺分子式C6H10N6，相对分子质量166.18，从其分子结构看在ESI源中容易得到1个氢原子而带正电荷，因而选择ESI源正离子模式对其进行检测。灭蝇胺质谱图见图1，其分子中含有1个三元碳环，在双重4级杆中容易被轰击丢失掉，因而对其准分子离子峰（m/z167.0）和子离子峰（m/z125.0）进行选择离子扫描，采用外标法定量。

2.3 样品前处理 实验中比较了NH2-SPE萃取柱、PEP-SPE萃取柱、MCX-SPE萃取柱，发现经过NH2-SPE萃取柱、PEP-SPE萃取柱处理的灭蝇胺，杂质比较多，处理不干净，回收率比较低。经过MCX-SPE柱子处理后，效果比较好，故本实验选用MCX-SPE固相萃取柱。

2.4 线性范围、回归方程及检出限 吸取灭蝇胺标准系按照1.2.1条件进行检测，以峰面积为纵坐标，以质量浓度为X轴，绘制标准曲线得到回归方程为：y=2313.0586x+22434.98，R2=0.998。阿力甜在10～100ng/mL线性关系良好。并且以信噪比等于3为标准，测得阿力甜的检出限为1μg/kg。

2.5 方法精密度、回收率及检出限 选择中高低3个浓度，每个浓度测定6个样品，按照1.2.3样品制备样品溶液，液质联用仪外标法测定加标量，结果见表1。由表1可知，加标回收率在75.2%～82.4%，标准偏差在3.23%～9.95%，方法的回收率和精密度较好，能够达到分析检测要求。

2.6 样品测定 根据本实验建立的方法对蔬菜进行检测分析，灭蝇胺标准品色谱图和样品中灭蝇胺图谱见图3、图4，灭蝇胺标准品出峰时间在1min左右。从图3、图4可以看出，样品中灭蝇胺能够很好地被分离，基本无干扰峰，且分析时间很短，只需5min就能完成1个样品的检测，说明方法有较好的分离度。

3 结论

本研究建立了蔬菜中灭蝇胺残留量的高效液相色谱-串联质谱检测分析方法。样品经过提取和MCX-SPE柱子净化后，HPLC-MS/MS检测，灭蝇胺在蔬菜中平均加标回收率在75.2%～82.4%，RSD在3.23%～9.95%，最低检出限位1μg/kg。该方法可以满足蔬菜中灭蝇胺残留量的检测分析要求。

参考文献

[1]刘新艳，潘灿平，刘肃，等.蔬菜中灭蝇胺残留的强阳离子交换固相萃取柱净化-液相色谱分析[J].农药学学报，2008，10（2）：166-171.

[2]董娇，曹宁阳，耿鑫.全自动固相萃取-高效液相色谱测定蔬菜中灭蝇胺残留[J].现代食品，2018，（4）：94-98.

[3] 宋卫国，饶钦雄，陈珊珊，等.同位素内标法检测灭蝇胺及其代谢物三聚氰胺在双孢蘑菇子实体和覆土中的残留[J].农药学学报，2018，20（3）：363-369.

[4]中国人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB 2763-2016食品安全国家标准食品中农药最大残留限量[S].

（责编：张宏民）