5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂对2种水生生物的毒性研究

陈亮　沈燕　孙如意

摘 要：该文以水生动物斑马鱼及大型溞为受试生物，在实验室条件下测定了5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂对2种水生生物的急性毒性，并进行了安全性评价。结果表明，5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂对斑马鱼和大型溞的毒性均为中毒，因而在水田及附近应谨慎施用，避免造成对水生生物的危害。

关键词：5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂；斑马鱼；大型溞；急性毒性；安全性评价

中图分类号 X171 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）17-0034-03

Abstract：Aquatic animal zebrafish and Daphnia magna are as test organisms in this paper，under laboratory conditions，5% nicosulfuron-21% atrazine dispersed oil suspension agent was studied on two acute toxicity of aquatic organisms，and safety evaluation. The results showed that the 5% nicosulfuron-21% atrazine dispersed oil suspension agent are poisoning to zebar fish and daphnia magna.so in the paddy field and the nearby caution should be applied，to avoid causingharm to aquatic organisms.

Key words：5% nicosulfuron-21% atrazine dispersed oil suspension agent；Zebra fish；Daphnia magna；Acute toxicity；Safety evaluation

农药污染是世界主要环境污染问题之一，长期以来受到了全球范围内的广泛关注，随着农药使用量的增加，残留农药进入水体对水环境的污染日益加重，对水生生物的危害也越来越大，甚至对人类健康产生了潜在威胁[1]。大型溞和斑马鱼均为经合组织（OECD）推荐的环境毒理试验代表性受试生物，被广泛应用于水生生物毒性的测试和评价[2-4]。

烟嘧磺隆和莠去津是玉米和谷物田地中的常用除草剂品种，烟嘧磺隆系磺酰脲类除草剂，主要用于防治禾本科杂草并兼治若干阔叶杂草，莠去津是三氮苯类除草剂，用于防除阔叶杂草和多种一年生禾本科杂草。文献表明，烟嘧磺隆和莠去津混用不仅可以提高药效，还可以克服对烟嘧磺隆中度敏感的玉米品种药害[5-7，12]。目前国内研究主要集中于其除草效果和残留降解方面[5-12]，而有关上述2种除草剂对水生生物的毒性研究则相对较少。为此，本研究选用5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂，参照国家《化学农药环境安全评价试验准则》[13]中农药对水生物的毒性等级，分别测定了其对斑马鱼和大型溞的急性毒性，结合试验药液的真实浓度，对其进行安全性评价，以期为科学评价其对水生系统可能造成的危害提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 供试生物 蓝色斑马鱼（Brachydanio rerio），购自合肥裕丰花鸟市场飞扬水族馆，平均体重0.25g，平均体长2.5cm，健康无病，与试验相同条件下预养10d，预养期间自然死亡率0.6%（<5.0%），试验前24h停止喂食。大型溞（Daphnia magna），选用实验室条件下孤雌繁殖代数3代以上、出生时间6～24h的幼溞用于试验。

1.2 试验药剂 5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂，由上海市农药研究所提供。

1.3 主要仪器设备 电子天平、智能人工气候箱、光学显微镜、血球计数板、超净工作台、高压灭菌锅、酸度计、便携式pH计、溶解氧测定仪、硬度计、温湿度记录仪、移液器、容量瓶、三角瓶、量筒、玻璃缸、玻璃棒、烧杯、滴管等。SHIMADZU LCMSMS-8030，旋转蒸发器，分液漏斗，浓缩瓶。

1.4 试验方法

1.4.1 鱼类急性毒性试验 在预实验确定的浓度范围内，按照1.2倍几何倍差设置5个浓度组，进行正式试验时，以不加药的曝气水为空白对照。试验中，每处理均放入10条斑马鱼，试验周期为96h，于24h、48h、72h和96h观察记录各处理斑马鱼死亡数和中毒症状以及供试物各浓度溶液的温度、溶解氧浓度、pH值等。于试验开始后0h、48h和96h时分别留取药液样品，检测药液真实浓度。

1.4.2 溞类急性活动抑制试验 在预实验确定的浓度范围内，按照1.3倍几何倍差设置7个浓度组，试验时，以不加药的人工稀释水为空白对照。试验用50mL的烧杯装30mL各处理组药液及对照组溶液，每个浓度4个重复，每个重复放入5只幼溞。于24h、48h观察和记录供试幼溞中毒症状和受抑制数以及供试物溶液的温度、溶氧量、pH值、硬度等。并于试验开始后0h和48h时分别留取药液样品，检测药液真实浓度。

1.5 药液真实浓度检测 随着试验的进行，药液会发生一定程度的降解，其实际浓度与初始设计浓度存在一定差别，故需分别在鱼类急性毒性试验的0h、48h、96h，溞类急性活动抑制试验的0h、48h以及藻类生长抑制试验的0、72h测定药液的真实浓度。取混匀后的式样0.1mL，加入0.9mL超纯水稀释，混合均匀后过0.22μm水系滤膜，待测。

1.6 数据处理 根据试验期间斑马鱼的死亡数和大型溞的受抑制数，用统计软件SPSS 20.0处理数据，得到5%烟嘧磺隆·21%莠去津可分散油悬浮剂对2种水生生物的回归方程、差异显著性、半致死浓度LC50或半抑制浓度EC50以及95%置信限[16]。

1.7 毒性等级划分 参照《化学农药环境安全评价试验准则》进行毒性等级划分。按鱼类半致死浓度LC50（96h）值，将农药对鱼类毒性等级划分为4个等级：剧毒（LC50≤0.1mg a. i. /L）；高毒（0.110mg a. i. /L）。按溞类半抑制浓度EC50（48h）值，将农药对溞类毒性等级划分为4个等级：剧毒（EC50≤0.1mg a. i. /L）；高毒（0.1