山东省丹参种子质量分级标准研究

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(1.陕西国际商贸学院，陕西 咸阳 712046； 2.陕西步长制药有限公司，陕西 西安 710075；3.山东步长制药股份有限公司，山东 菏泽 274000；4.陕西省中药绿色制造技术协同创新中心，陕西 西安 710075)

丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)为唇形科鼠尾草属草本植物，又名赤参、血参根、大红袍、紫丹参、红根、红丹参、赤丹参、紫参，主产自河北、山西、陕西、山东、河南、江苏、浙江、安徽、江西及湖南等地[1]。丹参以其植株的根和根茎入药，味苦；性微寒，归心、肝经，具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈之功效[2]，现代药理研究表明，丹参具有保护心肌、抗动脉粥样硬化、抗心律失常、抗血栓、抗凝、抗心肌肥厚、肝保护、肾保护、抗肿瘤、脑保护、呼吸系统保护、消化系统保护等作用[3]。丹参是我国传统的大宗中药材，具有悠久的药用历史，近年来随着心脑血管疾病的发生成为危害人类生命健康的主要疾病之一，诸如脑心通、复方丹参滴丸、复方丹参片等以丹参为原料的中成药的需求量急剧上升，而野生丹参远远不能满足市场对丹参药材的需求，所以近几年全国很多地方都开始进行丹参的大规模人工种植。山东省作为丹参药材的主产区之一，现已建成通过国家GAP认证的丹参规范化种植基地，带动周边农户大面积种植丹参，然而在丹参种植过程中种子的质量是保证其产量的重要因素之一。目前，仅有极少数中药材种子有现行的地方质量标准，这远不能满足种子市场检验的需求[4]。四川省、陕西省均已制定出适合当地市场的丹参种子质量标准，但因为地域差异，所以不能广泛适用，所以就要求各个地方制定出适合本地方的种子质量标准，以保证本地种子市场的有序流通。本研究在山东省丹参的主要分布区收集丹参种子，参照《农作物种子检验规程》(GB/T 3543-1995)[5]中的相关检验方法，结合丹参种子的生理特性[6-8]对山东丹省参种子质量分级标准进行研究，为山东省丹参种子质量评价提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

2017年7月，在山东省丹参主要分布区采收成熟的丹参种子，每份500 g，共收集19份种子，具体产地和编号见表1。

1.2 试验方法

1.2.1 扦 样

参照《农作物种子检验规程 扦样 》(GB/T 3543.2)(中华人民共和国国家标准1995)执行。采用四分法[9]进行取样。

1.2.2 净度分析

采用徒手减半法。从50 g待检样品中分取试验样本5 g(不少于2 500粒种子)左右。参照《农作物种子检验规程 净度分析》(GB/T 3543.3)(中华人民共和国国家标准1995)进行检验，并计算净度[9]。

表1 丹参种子材料信息

1.2.3 种子真实性鉴定

参照《农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定》(GB/T 3543.5)(中华人民共和国国家标准1995)的方法进行检验，测定丹参种子的大小，观察种子形状和种皮颜色[9]。

1.2.4 千粒重测定

参照《农作物种子检验规程 其他项目检验》(GB/T 3543.7)(中华人民共和国国家标准1995)，采用百粒法进行测定[9]。

1.2.5 含水量测定

参照《农作物种子检验规程 水分测定》(GB/T 3543.6)(中华人民共和国国家标准1995)，采用高恒温烘干法进行测定，计算含水量[9]。

1.2.6 生活力测定

参照《农作物种子检验规程 其他项目检验》(GB/T 3543.7)(中华人民共和国国家标准1995)，将在水中浸泡12 h后的丹参种子沿垂直腹缝线纵切开，露出种胚，置于0.5%的TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)溶液中，35 ℃下避光染色4 h后，统计被染色种子数目，计算生活力[9]。

1.2.7 标准发芽试验

参照《农作物种子检验规程发芽试验》(GB/T 3543.4)(中华人民共和国国家标准1995)，发芽床为滤纸，培养条件为25 ℃、12 h光照/12 h黑暗，以胚根是否突破种皮作为判定是否发芽的标准，按下列公式计算发芽率、发芽势、发芽指数[9]。

发芽率(%) =(整个发芽周期内发芽种子数/供试种子总数)×100%；

发芽势(%)=(前4 d发芽总数/供试种子数)×100%；

发芽指数=∑Gt/Dt，式中：Gt为时间t内发芽数，Dt为相应发芽日数。

2 结果与分析

2.1 丹参种子形态特征

丹参种子长1.30～3.88 mm，种子宽0.87～2.54 mm，三棱形长卵形，两头略有钝尖，背面稍平，腹面隆起成脊，圆钝，近基部收缩稍有凹陷。无毛，种皮呈灰褐色或茶褐色[9]。

2.2 丹参种子质量指标检测结果

对收集的19份丹参种子的净度、千粒重、含水量、生活力、发芽率、发芽势、发芽指数的测定结果见表2。

由表2可知，种子净度在67.32%～88.43%之间，平均为77.56%。丹参种子批中的杂质主要为废种子、花序和细沙，少数丹参种子批中混有其他植物种子。丹参种子千粒重在1.22～1.76 g之间，平均为1.59 g。丹参种子含水量在10.00%～11.92%之间，平均为10.82%。丹参种子生活力在21.33%～51.67%，平均为35.53%。丹参种子发芽率在20.67%～58.67%，平均为30.82%。丹参种子发芽势在9.67%～48.67%，平均为23.32%。丹参种子发芽指数在4.63～21.81，平均为9.65。不同产地丹参种子的各项指标差异明显。

对19份丹参种子样品所测得实验数据进行K-聚类分析，具体结果见表3，将19份丹参种子分为3类，1类12份，占总数的63.16%；2类3份，占总数的15.79%；3类4份，占总数的21.05%。

以K-聚类分析的数据结果作为参考，结合实际应用中快速、简便、准确的需求，最终确定了以发芽率、发芽势、生活力、千粒重、水分、净度作为山东省丹参种子质量分级标准的主要考量指标[9]，初步将山东丹参种子分为3个等级，结果见表4。分级方法采用最低定级原则，即任何一项指标不符合规定标准都不能作为相应等级的合格种子，其中三级种子为不合格种子[10]。

表2 丹参种子各项指标检测值

表3 K-聚类分析结果(n=19)

表4 丹参种子质量分级标准

3 讨 论

在各项分级指标中，发芽率最为重要，因其可较直接反映种子的田间出苗率[10]；发芽势可以快速反映出种子的发芽能力及整齐度；故以丹参种子的发芽率、发芽势作为首要指标。生活力可以反映种子是否具有发芽的内在潜力，是种子活力的判断依据；千粒重可反映种子饱满程度和种子成熟度等[11]；丹参种子的生活力、千粒重可以间接反映种子的萌发潜力，作为次要指标。而净度和含水量却不同，往往可通过再加工如清选和干燥等来提高质量，但发芽率是以净种子测定的，所以离不开净度分析[10]。含水量也与种子的千粒重、发芽率、发芽势等有着极为密切的关系。此外，净度和水分因素容易人为控制且与种子的贮藏质量有直接相关性，固以净度和水分作为收购种子时的参考指标[10]。本次制定的丹参种子质量分级标准中的各项指标均有重要的指导价值，故在市场检测中，要综合考虑各项指标的检测结果，才能对每一批种子的质量做出科学合理的判定。

本研究中所收集的丹参种子的各项种子质量指标数据差异较大，如丹参种子的发芽率最高为58.67%，最低仅为20.67%，这较为真实地反映了市场上中药材种子质量参差不齐的现状，亟待制定科学合理的标准去指导市场[10]，以保证中药材种子市场的健康运转。本标准大致反映了当前山东省丹参种子质量的实际情况，然植物种子质量的好坏，还受到当年气候状况的影响，故还需进一步在生产实践和市场中收集丹参种子相关信息以验证和完善此标准。此外，丹参种子不耐储藏，因而本标准只能作为当年新产丹参种子质量分级标准的参考依据。