余甘子中有效成分与矿质元素含量的相关性研究

杨晓琼,何 璐*,袁建民,许智萍,孔维喜,雷 虓

(1.云南省农业科学院 热区生态农业研究所,云南 元谋 651300;2.云南省元谋干热河谷植物园,云南 元谋 651300)

余甘子为大戟科(Euphorbiaceae)叶下珠属PhynanthusLinn.植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的成熟果实[1],俗名橄榄子、油甘子、滇橄榄。余甘子源产于缅甸和印度,现在菲律宾、印度尼西亚、中南半岛、中国等国家和地区均有分布,在中国的产量较多[2]。余甘子是一种“药食同源”的植物,具有悠久的药用历史,其性凉,味酸、涩、甘,具有清热凉血、生津止咳、消食健胃等功效[3]。现代研究表明,余甘子具有抗菌消炎[4]、降血糖血脂[5]、保肝[6]、抗糖尿病[7]、提高机体免疫力[8]、美白[9]等生理功效。余甘子中富含鞣质、黄酮、多酚、多糖、三萜、维生素和有机酸等多种活性物质[10-12],其中最具特征的成分是多酚,约占余甘子成分的20%,其中有效多酚的主要成分是没食子酸[13-16],没食子酸具有抗氧化、抗癌、降糖、降脂、抗菌、消炎等生物活性[17-18]。

余甘子富含矿质元素。袁建民等[19]利用ICP-OES法测定了干热河谷区余甘子不同器官中的矿质元素,发现不同器官中各矿质元素含量存在显著性差异,其中Fe、Zn、Mg、Mn元素含量丰富。蔡英卿等[20]利用火焰原子吸收法测定了余甘子不同器官中的矿质元素含量,发现Fe、Cu、Mn、Zn元素在余甘子不同器官中都有一定的分布。矿质元素在植物的生理活动中发挥着极其重要的作用,例如Mg直接影响植物的光合作用,且是构成叶绿素的元素,同时也是多种酶的活化剂[21]。矿质元素与人体健康息息相关,在体内具有激活酶、运载宏量元素、代谢核酸和参与激素生成等生物学功能[19]。近年来的研究发现,矿质元素不仅会影响植物的生长发育,还会影响其有效成分的累积,从而影响中医临床的治疗效果[22-23]。余甘子作为一种“药食同源”的药材[3],因富含矿质元素和有效活性成分,又具有较好的药用价值,所以被应用到各种中药和保健品的研发中。目前,对余甘子化学成分、含量分析、药理药效的研究报道较多,但对其矿质元素与有效活性成分之间的相关性研究尚未见报道。因此,明确余甘子中矿质元素与有效活性成分之间的相关性,可为余甘子的质量控制提供参考依据[22]。

本研究利用高效液相色谱法测定了18种余甘子中有效成分没食子酸的含量,利用ICP-OES(电感耦合等离子体发射光谱)法测定了余甘子中20种矿质元素(Al、B、Fe、Cr、Cu、Ca、Mn、K、P、Na、S、Si、Zn、Se、Mg、Mo、Ni、Cd、Co、Pb)的含量,并对余甘子中主要有效成分没食子酸含量与矿质元素含量之间的相关性进行了分析,以期为其质量的控制提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料概况 供试材料余甘子样品分别采集于元谋(YM)、元江(YJ)、宾川(BC),详细信息见表1。采集时间为2019年12月,采集时期为余甘子果实成熟期,均由云南省农业科学院热区生态农业研究所分析测试中心野外采集。

1.1.2 仪器设备与试剂 Agilent1260高效液相色谱仪,含Agilent ZORBAX Eclipse XRD-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);Milestone Ethos up微波消解仪(意大利迈尔斯通);PQ-9000电感耦合等离子体发射光谱仪(德国耶拿);GZX-9140MBE电热恒温鼓风干燥箱(上海博讯);UPH-IV-20T超纯水仪(中国优普);ATX224万分之一电子分析天平(日本岛津);QM3SP行星式球磨机(南京驰顺);RAININ移液枪(美国瑞宁);超声波清洗机(宁波新芝,300 W,40 kHZ);0.45 μm微孔滤膜;粉碎机。

表1 余甘子样品及产地信息

将实验用的18批余甘子样品于60 ℃电热恒温鼓风干燥箱中烘至恒重,过60目尼龙筛,混匀,保存备用。乙腈(色谱纯)、甲醇(色谱纯)、氢氧化钠(AR)、磷酸(AR)、没食子酸对照品(纯度99.8%)、无水乙醇(AR)、硝酸铝(AR)、芦丁标准品(纯度99%)、亚硝酸钠(AR)、30%过氧化氢(GR)、浓硝酸(GR)、超纯水，均为市购;氩气(纯度99.999%)、多元素混合标准溶液以及单个元素(Fe、B、Mg、Cr、Al、Mn、Zn、Cd、Ni、Cu、Co、Pb、Ca、Na、S、P、Se、K、Mo)标准溶液,购自国家有色金属及电子材料分析测试中心。

1.2 实验方法

1.2.1 有效成分含量的测定方法 (1)色谱条件：Agilent ZORBAX Eclipse XRD-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈+0.2%磷酸水溶液(5∶95),等度洗脱;流速为1.000 mL/min；进样量为5 μL；检测波长为273 nm；柱温为30 ℃[23]。

(2)对照品溶液的配制：精确称取20 mg没食子酸对照品,溶解,加入浓度为50%的甲醇溶液定容至10 mL棕色容量瓶,得到浓度为2.0 mg/mL的没食子酸对照品溶液。

(3)供试品溶液的制备：将采集的新鲜余甘子洗净、去核、烘干、粉碎、过筛后,保存备用；用万分之一的电子天平准确称取0.1000 g余甘子粉末,每份样品平行3次,置于10 mL容量瓶中,加入10 mL 50%的甲醇溶液,超声提取90 min(超声功率为300 W,频率为40 kHZ)；然后冷却,再称定质量,用50%的甲醇溶液补足质量,摇匀，最后用0.45 μm有机系微孔滤膜过滤；取滤液,待上机测试。

(4)线性关系考察：精密吸取没食子酸对照品溶液(2.00 mg/mL)适量,用50%的甲醇进行梯度稀释,分别配制成浓度为0.030、0.0625、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/mL的系列对照品溶液,按1.2.1节(1)中的色谱条件进行测定。

(5)检出限与定量限试验：取1.2.1节(2)中浓度为2.00 mg/mL的没食子酸对照品溶液适量,进行倍比稀释,按1.2.1节(1)中的色谱条件连续进样6次,记录峰面积。当信噪比为3∶1时,得出检出限;当信噪比为10∶1时,得出定量限。

(6)精密度试验：取浓度为2.00 mg/mL的没食子酸对照品溶液适量,按1.2.1节(1)中的色谱条件连续进样6次,计算峰面积的RSD。

(7)稳定性试验：依据1.2.1节(3)中的方法制备余甘子提取液,按1.2.1节(1)中的色谱条件对同一样品在0、2、4、6、8、10、12、24 h分别进行测定,计算余甘子中没食子酸含量的RSD。

(8)重复性试验：参照1.2.1节(3)中的方法平行制备6份余甘子提取液,在1.2.1节(1)中的色谱条件下进行测试,计算余甘子中没食子酸含量的RSD。

(9)加标回收率试验：按照1.2.1节(3)中的方法制备余甘子提取液,加入不同浓度的没食子酸标准品溶液,按1.2.1节(1)中的色谱条件进行测试，计算加标回收率。

(10)样品含量的测定：参照1.2.1节(3)中的方法制备18批余甘子样品提取液,在1.2.1节(1)中的色谱条件下,连续进样3次,分别计算18批余甘子样品中没食子酸的含量。

1.2.2 矿质元素含量的测定方法 (1)样品的前处理：准确称取18批余甘子样品各0.2000 g,每批样品平行称取3份,置于聚四氟乙烯高压微波消解罐中,分别加入6 mL浓HNO3和2 mL H2O2,拧紧消解罐,在确保完全密封的条件下将消解罐放入微波消解炉内,设定微波消解程序(微波消解最大功率为1800 W；首先设置温度为140 ℃,爬升时间设置为15 min,保持时间为5 min;然后将温度升高至180 ℃,爬升时间设置为10 min,保持时间为20 min;最后冷却至室温)进行消解。在微波消解完毕后,先利用赶酸仪赶酸60 min左右；再用2%HNO3溶液少量多次洗涤高压消解内罐,合并洗液，将其转入50 mL容量瓶,定容并混匀；最后用0.22 μm微孔滤膜过滤,取滤液,待上机测试。同时制备空白对照品[21]。

(2) ICP-OES的工作参数：利用轴向(axial)作为等离子体观测方式;氩气压力为0.65 MPa;高频发射器功率为1200 W;冷却气流量为12 L/min;雾化气流量为0.5 L/min;辅助气流量为0.5 L/min;快泵流速为4.0 mL/min;蠕动泵正常流速为1.00 mL/min;测定次数为3次。

(3)标准曲线的绘制：准确吸取浓度为100 μg/mL的多元素标准溶液10 mL于100 mL容量瓶中,定容摇匀,从而得到浓度为10 μg/mL的标准溶液。吸取一定量的10 μg/mL标准溶液,进行梯度稀释,得到浓度分别为0.00、0.10、0.50、1.00、2.50和5.00 mg/L的系列标准溶液,待上机测试,从而获得矿质元素的标准曲线。

(4)待测样品矿质元素含量的测定：对18批余甘子样品的待测液分别进行Al、B、Mn、Zn、Fe、Cu、Ca、Cr、K、S、Cd、Se、P、Na、Si、Mg、Mo、Ni、Co、Pb共20种矿质元素含量的测定,每批平行测定3次。

1.3 数据分析

利用SPSS 20.0和SAS统计分析软件对所有试验数据进行单因素方差分析(ANOVA)；差异性多重比较采用LSD(least significant difference)分析法；双变量相关性分析(Pearson correlation analyis)的显著性水平为0.05；采用Origin 8.6绘制系统聚类分析结果图。

2 结果与分析

2.1 采用HPLC法测定余甘子中没食子酸含量

2.1.1 色谱条件的选择 为了考察供试品余甘子提取液的系统适用性,采用甲醇+0.2%磷酸水(5∶95)进行等度洗脱,结果发现余甘子中没食子酸峰的理论塔板数不理想，分离度低，重现性差(图1)；采用乙腈+0.2%磷酸水(5∶95)进行等度洗脱,发现余甘子中没食子酸峰的理论塔板数高于2000，分离度较好，出峰快，重现性好,因此选择乙腈+0.2%磷酸水(5∶95)作为流动相条件测定余甘子中没食子酸的含量。目前大部分研究中没食子酸的检测波长为273 nm[25],因此选择273 nm作为检测波长。

图1 没食子酸对照品A和供试品B的HPLC图谱

2.1.2 线性关系考察 以没食子酸对照品溶液的浓度(x)为横坐标,以峰面积(y)为纵坐标绘制标准曲线,得到回归方程y=18934x-16.921,R2=0.9999 (n=7),结果表明,没食子酸在0.030～2.00 mg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(图2)。检出限为0.17614 mg/kg,定量限为0.58938 mg/kg,此方法具有较低的检出限和定量限,因此其灵敏度较高。

图2 没食子酸的标准曲线图谱

2.1.3 精密度、稳定性、重复性与回收率 通过对没食子酸对照品进行精密度考察,计算得到没食子酸峰面积的相对标准偏差(RSD)为0.21%,说明仪器的精密度较高;对供试品提取液进行稳定性考察,发现没食子酸峰面积的RSD为1.01% (n=6),说明供试品溶液在室温下放置24 h稳定性较好;取供试品进行重复性实验,计算得到没食子酸峰面积的RSD为0.79%,表明该方法的重复性良好。在余甘子提取液中按照0.5、1.0、5.0 mg/kg三个水平分别添加没食子酸,每个添加水平重复6次。添加回收试验结果如表2所示,在0.5～5.0 mg/kg 3个添加水平下,余甘子中没食子酸的平均回收率在92.2%～98.7%, RSD为2.12%～5.63%,说明本试验方法具有较好的回收率且加标回收结果准确可靠。

表2 没食子酸的添加回收率与相对标准偏差

2.2 18种余甘子中没食子酸含量的变化

由图3可知,18种余甘子中没食子酸的含量差异显著,其中以BCYY的没食子酸含量最高,高达(3011.589±34.368)mg/kg；以BCYS的含量最低,仅有(215.209±2.097)mg/kg；BCYY的没食子酸含量是BCYS的14倍，差异显著(P<0.05)。YMYY中没食子酸的含量略低于BCYY中的没食子酸含量,为(2403.698±28.623)mg/kg,但高于其他种质的含量。方差分析结果表明：YM02和BCJY的没食子酸含量无显著性差异(P>0.05)；YMJY和YJ01、YJ03、YJ06、YJ08的没食子酸含量无显著性差异(P>0.05)；在其余种质间没食子酸的含量具有显著性差异。表3列出了18种余甘子中没食子酸含量的平均值、标准偏差、最大值、最小值和变异系数,通过平均值可知BCYY中没食子酸的含量最高,且平行测定3组数据间的变异系数较小,说明测定结果准确。

不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

表3 不同种质余甘子中没食子酸含量的统计值(n=3)

2.3 18种余甘子中矿质元素含量的变化

2.3.1 矿质元素的标准曲线方程 使用ICP-OES(电感耦合等离子体发射光谱仪)测试多种元素混合标准溶液,绘制标准曲线并计算线性回归方程及相关系数。结果如表4所示,当线性范围为0～5.00 mg/L时,Al、B、Mn、Zn、Fe、Cu、Ca、Cr、K、S、Cd、Se、P、Na、Si、Mg、Mo、Ni、Co、Pb共20种元素在相关系数范围0.9968～0.9999内具有较好的线性关系。

2.3.2 18种余甘子中矿质元素含量的比较 利用单因素方差分析法分析余甘子中矿质元素含量是否存在差异性,由表5可以看出,18种余甘子中20种矿质元素的含量差异性显著,其中K元素的含量最高,其次是Mg元素,而Ni、Cr元素的含量居后两位。在18种余甘子中个别矿质元素的含量差异显著,其中YJ05中Mn元素的含量是YM02的5.7倍,YM05中Fe元素的含量是YJ05的7.6倍,而Ca元素的含量又是BCJY的7.5倍。18种余甘子均含有人体必需的微量元素如Fe、Zn、Mn、Cu、Ni、B和Si,同时含有人体必需的矿质元素如Ca、Mg、P和Na；有害元素Pb、Cd在18种余甘子中均未检出。由变异系数可知：Cu元素的变异系数最大,为139.05%,说明18种余甘子中Cu元素的含量差异较大；其次是Al、B,变异系数分别为136.86%、106.47%；Mg元素含量的变异系数最小,为6.14%,说明18种余甘子中Mg元素的含量差异最小。

表4 线性回归方程及其相关系数

2.3.3 18种余甘子中矿质元素含量的相关性分析 相关性分析结果(表6)表明：18种余甘子中Fe元素含量与Al、B、Cr、Ni、Ca、Na、Si元素含量之间存在极显著的正相关关系,相关系数分别为0.944、0.675、0.923、0.700、0.352、0.405、0.813,说明在Fe元素含量高的余甘子产地,其Al、B、Cr、Ni、Ca、Na、S元素的含量也较高；Al元素含量与B、Cr、Ni、Ca、Na、Si元素含量之间存在极显著正相关关系；B含量与Cr、Ni、Ca、Na、S含量间呈极显著正相关；Cr含量与Ni、Ca、Na、S含量间呈极显著正相关；Fe、Al、B、Cr、Ni、Ca、Na、Si含量在18种余甘子中存在正相关关系；Cu与Ni、Zn之间呈极显著正相关；Mn与Mg呈显著正相关，与P呈极显著负相关；Ni与Zn、Si之间存在极显著正相关；Zn与Na呈极显著正相关；Ca与K、Na、Mg之间存在极显著正相关；K与Na、Mg之间存在显著正相关,与S元素存在极显著负相关；Na与Mg存在显著正相关。

2.3.4 18种余甘子中矿质元素含量的聚类分析 采用系统聚类法对18种余甘子中的矿质元素含量进行聚类分析,结果如图4所示,可将18种余甘子样品分为3类：YM02、YM03、YMJY、YJ05、YJ06、YJ07、YJ08、BCYY、BCYS为Ⅰ类群,其特点为Mn元素含量较高,而Cr、P、Si元素的含量较低;YM01、YM04、YM05、YJ01、YJ02、YJ03为Ⅱ类群,其特点为K、Ca、Na三种元素的含量较高;YMYY、YJ04、BCJY为Ⅲ类群,其特点为P元素的含量较高,而Mn、Zn、Cu、K四种元素的含量较低。

2.4 没食子酸含量与矿质元素含量间的相关性

对18种余甘子中的没食子酸含量和矿质元素含量进行双变量相关性分析。由表7可知：没食子酸含量与Ca元素含量存在极显著的负相关,相关系数为-0.374,与Na元素含量存在显著的负相关,相关系数为-0.286,说明当Ca、Na元素含量较高时,余甘子中没食子酸的含量较低。没食子酸作为一种次生代谢产物,其含量会受到矿质元素的影响,同时矿质元素也会参与植物次生代谢产物的合成,最终影响植物次生代谢产物的形成和积累[26]。

3 讨论

余甘子在金沙江干热河谷区分布较为广泛,以野生居多,作为一种在干热河谷区具有较好发展前景的“药食同源”特色资源植物,其种质资源优势和加工利用价值未得到充分发挥,存在优良品种栽培少、开发利用率低、加工技术滞后等问题。目前干热河谷区余甘子主要作为药材或者食品的初级加工原料,大多停留在初级产品、粗提阶段。余甘子富含鞣质、黄酮、多酚、多糖等多种活性物质[10-12],其酚酸类物质是主要的活性成分,其中没食子酸具有抗菌、抗氧化、消炎、降糖、抗癌、降脂等生物活性功能[17-18]。同时余甘子富含多种矿质元素,矿质元素在植物的生理活动中发挥着极其重要的作用,不仅影响植物的生长发育,还会影响有效活性成分含量的累积[22-23]。因此,探索余甘子中矿质元素如何影响其有效活性成分的积累,对于干热河谷区余甘子植物资源的开发利用及质量控制具有一定的意义。

本研究发现利用乙腈+0.2%磷酸水(5∶95)进行等度洗脱时余甘子中没食子酸峰具有较高的理论塔板数，分离度好，出峰快，重现性好,说明乙腈具有更好的分离效果。没食子酸对照品在0.030～2.00 mg/mL浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系,检出限为0.17614 mg/kg,定量限为0.58938 mg/kg,因此本试验方法的灵敏度较高。对没食子酸进行精密度、稳定性、重复性考察,分别得到没食子酸峰面积的RSD为0.21%、1.01%、0.79%,说明仪器的精密度较高，供试品溶液的稳定性好，本方法的重复性良好。加标回收试验显示,余甘子中没食子酸在0.5～5.0 mg/kg3个添加水平下,平均回收率在92.2%～98.7%,RSD为2.12%～5.63%,表明此方法具有较好的回收率且加标回收结果准确可靠。

表5 18种余甘子中矿质元素含量的比较 mg/kg

样品CdSePNaSiMgMoNiCoPbYM01NDND1025.83±26.9669.17±7.6511.67±1.445076.67±1.44ND2.50±0.02NDNDYM02NDND772.50±11.6624.17±2.895.00±1.505075.00±5.00ND0.00±0.00NDNDYM03NDND920.00±6.6119.17±3.042.50±0.504953.33±44.74ND2.50±0.50NDNDYM04NDND1052.50±10.0024.17±1.2915.00±0.205074.17±1.44ND2.50±0.02NDNDYM05NDND911.67±11.2746.67±3.8228.33±2.895067.50±4.33ND10.00±1.50NDNDYMJYNDND1067.50±2.5034.17±3.8210.00±0.104869.17±6.29ND2.50±0.10NDNDYMYYNDND1140.00±25.0012.50±0.507.50±4.334557.50±2.50ND2.50±0.05NDNDYJ01NDND850.83±6.2915.83±1.297.50±0.055075.00±5.00ND2.50±0.50NDNDYJ02NDND927.50±20.4623.33±2.202.50±0.025080.00±10.21ND0.00±0.00NDNDYJ03NDND1160.83±6.2925.83±2.894.17±0.445065.83±14.22ND0.00±0.00NDNDYJ04NDND736.67±3.8222.50±1.505.83±0.894377.50±20.50ND1.67±0.44NDNDYJ05NDND580.00±15.0020.00±4.332.50±0.305077.50±12.46ND2.50±0.10NDNDYJ06NDND804.17±9.4617.50±2.618.33±0.445077.50±20.32ND2.50±0.20NDNDYJ07NDND749.17±3.8210.83±0.6412.50±2.505075.00±30.14ND2.50±0.05NDNDYJ08NDND600.00±2.5021.67±3.775.00±0.205070.00±14.33ND2.50±0.10NDNDBCJYNDND1045.83±11.279.17±0.4420.83±1.203980.00±2.50ND2.50±0.20NDNDBCYYNDND950.83±28.9821.67±1.4415.00±0.505046.67±35.03ND5.00±0.40NDNDBCYSNDND802.50±9.0126.67±1.4410.00±2.505080.00±10.20ND9.17±3.82NDND变异系数/%0.000.0018.8661.8672.576.140.0092.830.000.00

表6 18种余甘子中矿质元素含量间的相关系数

18种余甘子中没食子酸的含量差异显著,其中BCYY的没食子酸含量最高,BCYS的含量最低；YMYY的没食子酸含量略低于BCYY的，但高于其他种质的。这可能是因为BCYY和YMYY为“盈玉”新品种,YMYY种植于元谋,BCYY种植于宾川,是选育出的新品种,其单果果形较大,单果均重38.43 g[27],因是人工种植的品种,外部施加化肥和水分较为充足，可能导致没食子酸的含量较高。而BCYS中没食子酸含量最低,可能是因为其在野外生长，加之宾川地区气温较高、干旱缺水、缺肥，导致其没食子酸的含量较低。方差分析结果表明：YM02和BCJY中没食子酸含量无显著性差异；YMJY和YJ01、YJ06、YJ03、YJ08中没食子酸含量无显著性差异；在其余种质间没食子酸的含量均具有显著性差异。这可能是因为次生代谢产物的合成与积累除了受遗传特性的影响外,还可能与环境因子、土壤、人工种植与否、采摘时间等因素有关[26,28]。

图4 18种余甘子中矿质元素含量的聚类分析树状图

表7 18种余甘子中没食子酸含量与矿质元素含量间的相关系数

余甘子除了富含鞣质、多酚、黄酮、多糖等多种有效化学成分外,还含有对人体健康极其重要的微量元素,其在机体中起着非常重要的作用,与机体正常代谢等生理功能息息相关[29]，例如：骨骼的发育功能不仅与矿质元素Ca有关,还与微量元素Fe、Mn、Zn有关;Mg具有预防心脏动脉硬化、降低“三高”发生几率的功效;Cu会对机体的毛发色素、自由基解毒、造血机能、神经递质分泌和血液凝固等方面有影响[29]。本研究分析了18种余甘子中20种矿质元素含量的差异性,发现K、Mg元素的含量较高,而Ni、Cr元素的含量较低；余甘子富含人体必需的微量元素Fe、Cu、Si、Zn、Ni、B和Mn,同时含有人体必需的矿质元素Ca、Mg、P和Na,而有害元素Pb、Cd未检出。在不同余甘子种质间个别矿质元素的含量差异显著,例如YM05中Fe元素的含量是YJ05的7.6倍。这可能是因为余甘子中矿质元素含量与其生长土壤所含的矿质元素含量有一定关系[30]。

矿质元素之间存在着复杂的相互作用机制,既有协同、拮抗,又有替换、补充等关系[31]。相关分析结果显示：18种余甘子中Fe元素与Al、B、Cr、Ni、Ca、Na、Si元素之间存在极显著的正相关关系；Cu与P呈极显著负相关。利用系统聚类法对18种余甘子中的矿质元素含量进行聚类分析,最终将18种余甘子样品分为3个类群：YM02、YM03、YMJY、YJ05、YJ06、YJ07、YJ08、BCYY、BCYS为Ⅰ类群;YM01、YM04、YM05、YJ01、YJ02、YJ03为Ⅱ类群;YMYY、YJ04、BCJY为Ⅲ类群。

本研究对18种余甘子中的没食子酸含量和矿质元素含量进行了双变量相关性分析,发现没食子酸含量与Ca元素含量存在极显著的负相关,与Na元素含量存在显著的负相关,说明余甘子中的没食子酸与Ca、Na元素存在拮抗作用。因此,研究余甘子有效活性成分与矿质元素之间的相关性，以及不同生态环境条件对余甘子次生代谢产物含量的影响,对于其良种培育、养分管理、现代化栽培生产具有重要意义[32]。