遵义地区犬弓形虫感染的血清学调查

马晓春，代 军，张仕斌，秦廷洋，徐 磊，高丽丽

(1.遵义医学院 实验动物中心，贵州 遵义 563000；2.遵义医学院 基础医学院，贵州 遵义 563000)

弓形虫病是一种严重危害人类健康，呈世界性分布的人兽共患寄生虫病，可以感染人和几乎所有的恒温脊椎动物(感染超过30 种鸟类和300 种哺乳动物)[1]。其病原为龚地弓形虫(Toxoplasmagondii)，属于球虫亚纲，真球虫目，肉孢子虫科、弓形体属，能引起人畜共患，为寄生在细胞内的一种原虫[2]。猫及猫科动物是其终末宿主，人、犬和猪等是中间宿主。食物、水源等能被含弓形虫卵囊的粪便污染，从而引起人和动物感染[3]。弓形虫病对人畜的危害很大，孕妇感染后会导致早产、流产、胎儿发育畸形。此外，弓形虫感染还与艾滋病(AIDS)有密切的关系。随着我国社会经济发展和人民生活水平的提高，犬类已成为人类的重要“伙伴”，因此人类感染动物源性弓形虫的风险日益增加。为了解遵义地区犬弓形虫病的感染情况，2017年3—12月采用酶联免疫吸附试验对部分宠物犬及农村田园犬进行血清学调查，以期对该病的防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 犬血液样品 从遵义市区3家宠物门诊，以及遵义周边农村地区收集外表健康犬血液样品共计320份，1 000 g离心10 min，取上清液于1.5 mL灭菌离心管中，统一编号。处理好的血清均置于-20℃冰箱保存，备用待检。

1.1.2 试剂与仪器 犬弓形虫抗体(Tox Ab)酶联免疫分析试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)，352型酶标仪(芬兰Labsystems Multiskan MS公司)，5165040型洗板机(Thermo ScientificTMWellwashTM)，GNP-9080型隔水式恒温培养箱(上海精宏)，WH-2漩涡混合仪(金坛新航)，MM-1低频振荡器(金坛国旺)，100～500 μL加液器(排枪，德国Eppendorf公司)。

1.2 方法

犬弓形虫抗体检测按照试剂盒说明书进行。对测定结果进行判定，试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00，阴性对照平均值≤0.10；临界值(CUT OFF)计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15；阴性判定：样品OD值<临界值(CUT OFF)者为弓形虫抗体(Tox Ab)阴性；阳性判定：样品OD值≥临界值(CUT OFF)者为弓形虫抗体(Tox Ab)阳性。

1.3 数据处理

检测结果采用软件SPSS 21.0进行分析，通过χ2检验分析差异显著性，P<0.05差异显著，P<0.01差异极显著。

2 结果与分析

2.1 试验有效性

对测定结果进行判定，其中阳性对照孔平均值为1.685(≥1.00)；阴性对照平均值为0.064(≤0.10)，表明试剂盒有效。

2.2 犬弓形虫感染情况

经检测，在320份血液样品中有40份检测出弓形虫抗体，总体阳性率为12.5%。从表1可看出不同来源、性别和年龄犬的弓形虫抗体阳性率变化。

2.2.1 不同来源犬 不同来源犬弓形虫抗体阳性率有差异，其中，农村田园犬的阳性率为13.4%，市区宠物犬为12.0%。经显著性检验，不同来源犬弓形虫抗体的阳性率差异不显著(P>0.05)。

2.2.2 不同性别犬 雌性犬弓形虫抗体阳性率为13.0%，略高于雄性的12.1%。经显著性检验，不同性别犬弓形虫抗体的阳性率差异不显著(P>0.05)。

2.2.3 不同年龄犬 随犬年龄增长，弓形虫抗体的阳性率升高，1岁以内最低，为10.7%；1～3岁次之，为12.7%；3岁以上最高，达15.6%。经显著性检验，不同年龄段犬弓形虫抗体的阳性率差异不显著(P>0.05)。

表1 遵义地区犬弓形虫抗体检测结果Table 1 Detection results of antibody against Toxoplasmosis in dogs in Zunyi

3 结论与讨论

弓形虫是一类普遍存在的细胞内寄生原虫，在人群中感染较普遍。犬是人类感染弓形虫的主要中间宿主，传播弓形虫的风险较大。因此，充分了解犬弓形虫病的感染情况，具有重要的公共卫生学意义。近年来，经流行病学调查显示，各地区犬弓形虫抗体阳性率存在较大差异，如郑州[4]、乌鲁木齐[5]、北京[6]、长沙[7]等城市犬的弓形虫抗体阳性率分别为34.9%、31.8%、24.9%和23.8%，明显高于遵义地区犬弓形虫的抗体阳性率(12.5%)；辽西地区[8]、武汉[9]、温州[10]、信阳[11]等城市犬的弓形虫抗体阳性率分别为14.2%、13.4%、13.4%和11.3%，与遵义市犬弓形虫的抗体阳性率相近；山东部分地区[12]、桂林[13]、黔南州[14]、天水[15]等城市犬的弓形虫抗体阳性率分别为3.50%、2.68%、2.62%和1.98%，明显低于遵义地区犬弓形虫的抗体阳性率。

遵义市区宠物犬、农村田园犬弓形虫的抗体阳性率分别为12.0%和13.4%，两者差异无统计学意义，与汪萍等[5]对乌鲁木齐市犬的调查结果一致。宠物犬一般都有外出遛玩的习惯，且会与人亲密接触，会大大增加感染或传播该病的机会。不同性别犬的弓形虫抗体阳性率差异不显著，与其他地方报道的结果一致。随着犬的年龄增长，弓形虫抗体阳性率升高，但差异不显著，与汪萍等[5]的调查结果一致。这是因为随着犬年龄增长，接触外界环境的时间越长，感染的概率越大，并且弓形虫抗体一旦形成，能终生存在。

弓形虫病是一种主要的人兽共患病，对人类健康危害较大。调查结果显示，遵义地区犬弓形虫的抗体阳性率相对较高，在全国处于中等水平。建议今后应持续监测犬弓形虫的抗体阳性率，同时大力开展教育宣传，加强宠物犬、散养犬和流浪犬的管理，定期饲喂预防药物，以控制弓形虫病的发生与传播。