四种常用消毒剂对细鳞鲑幼鱼的急性毒性

韩姝伊 ，魏凯 ，陈春山 ，何亚鹏 ，赵宝华 ，何宏轩

（1.河北师范大学，河北 石家庄 050024； 2.北京市水生野生动植物救护中心，北京 102110；3.中国科学院动物研究所，北京 100101）

细鳞鲑Brachymystax lenok属于鲑形目Salmoniformes鲑科Salmonidae细鳞鱼属Branchymystax，主要分布在我国东北、华北及西北等地，具有重要的科研、生态及经济价值，被列为我国Ⅱ级保护动物[1]。在保护和合理开发资源的基础上，我国已经开展了细鳞鲑的人工繁育和养殖[2,3]。

随着我国鲑鳟养殖业的快速发展，细鳞鲑的养殖也初具规模，但虹鳟Oncorhynchus mykiss、大西洋鲑Salmo salar等传统养殖种类或品种的疫病极易威胁细鳞鲑的繁育、养殖及保护[4]，需要采取有效措施防控这些疫病，保护和合理开发利用细鳞鲑。不同鱼类对各种药物的敏感性不同，在病害防治中如用药不当会造成鱼类大规模死亡。本文通过研究高锰酸钾、聚维酮碘、食盐、甲醛4种常用水产消毒剂对细鳞鲑幼鱼急性毒性试验，以期为细鳞鲑的病害防治及健康养殖提供参考。

表1 各种试验药物规格及试验质量浓度梯度Tab.1 Specification and concentrations of the test chemicals

1 材料与方法

1.1 材料

试验鱼为北京市水生野生动植物救护中心人工繁育的1龄细鳞鲑，平均体长（11±0.5）cm，平均体质量（10.0±0.2）g，体质健康，规格整齐。试验前，将鱼在玻璃缸中暂养一周，试验前1d停止投喂。

试验选用高锰酸钾、聚维酮碘、食盐和甲醛4种消毒剂，药物规格见表1。试验前，配制试验药物母液，再按比例稀释成所需浓度，药液现配现用。

1.2 方法

试验容器为50cm×30cm×30cm的玻璃缸，试验用水为经过充分曝气的地下水，水温（12±1）℃，pH6.8～7.4，溶解氧（8±0.5）mg·L-1。试验期间不投饵，不充气。

正式试验前进行预试验，确定对细鳞鲑幼鱼24h致死的浓度下限值及96h无死亡的浓度上限值，然后在此浓度范围内按等对数间距设置5个浓度组和一个空白对照，每个试验浓度组设2个平行，数据取平均值。

参照卢玲[5]等的方法进行室内试验。甲醛具有挥发性，为保证试验药液的质量浓度，每隔24 h更换一次药液。各试验药物的质量浓度梯度如表1所示。每个试验玻璃缸加入已配好的药液，每组随机放入10尾鱼。试验开始后连续观察并记录试验鱼的中毒症状、死亡情况，及时捞出死鱼。试验鱼的死亡标准为：丧失游动能力，静卧水底，对外界刺激无反应。试验结束时，计算四种消毒剂对细鳞鲑的24h、48h、72h和 96h死亡率。

1.3 数据处理

采用寇式法（Karder）[6]计算4种消毒剂作用下细鳞鲑幼鱼的 24h、48h、72h和 96h半致死浓度（LC50），计算公式如下：LogLC50=Xm-d（∑p-0.5）。根据24h和48h的半致死浓度计算出安全浓度（SC）：SC=48hLC50×0.3/（24hLC50/48hLC50）2。式中：Xm为死亡组最大剂量的对数，d为相邻两组浓度对数差，p为各组的死亡率，∑p为各组死亡率的总和。

2 结果与分析

2.1 高锰酸钾毒性试验

在高锰酸钾质量浓度为10.00mg·L-1时，试验鱼放入药液中后急速游动，呼吸频率加快，侧卧水底，3h后开始死亡。死鱼身体僵直，口部张开，体色发黑，体表黏液增加，鳃上附着大量黑色沉淀，鳃丝充血红肿，24h死亡率达100%。低浓度组鱼在水底静伏不动或缓慢游动。随时间延长，高锰酸钾对细鳞鲑的急性毒性明显增强，死亡率上升（表2）。

表2 高锰酸钾对细鳞鲑幼鱼毒性试验Tab.2 Toxicityofpotassium permanganatetolenok Brachymystax lenok juveniles

2.2 聚维酮碘毒性试验

在聚维酮碘质量浓度为7.00mg·L-1时，试验鱼进入药液几分钟后就开始急速游动、极度不安，逐渐失去平衡能力，在玻璃缸底部聚集，呼吸困难，陆续开始死亡，死亡鱼身体僵硬，体表无黏液。低浓度组鱼有轻度的反应，呼吸急促，快速游动，而后慢慢恢复正常（表3）。

表3 聚维酮碘对细鳞鲑幼鱼毒性试验Tab.3 Toxicity of povidone iodine to lenok Brachymystax lenok juveniles

2.3 食盐毒性试验

在高浓度食盐溶液中，试验鱼表现不安，呈浮头状，偶尔上下游动，濒临死亡时呼吸微弱，对刺激反应不灵敏，失去平衡，5h后开始陆续死亡，体表有大量黏液。低浓度组鱼游动平缓，与空白对照组一致（表4）。

表4 食盐对细鳞鲑幼鱼毒性试验Tab.4 Toxicity of NaCl to lenok Brachymystax lenok juveniles

2.4 甲醛毒性试验

甲醛对细鳞鲑幼鱼的毒性试验结果见表5。甲醛浓度为50.00mg·L-1时，试验鱼极度不安，呈浮头状，失去平衡，尾部缓慢摆动，3h后开始死亡，死鱼口及鳃盖张开，翻卧于缸底，体色较对照组浅，体表有黏液，8h内全部死亡。死亡率随浓度升高明显上升。

表5 甲醛对细鳞鲑幼鱼毒性试验Tab.5 Toxicity of formaldehyde to lenok Brachymystax lenok juveniles

2.5 四种消毒剂对细鳞鲑幼鱼的半致死浓度和安全浓度

四种消毒剂对细鳞鲑幼鱼的24h、48h、72h、96h的半致死浓度和安全浓度见表6。根据化学物对鱼类急性毒性等级评价标准，按96hLC50的大小将药物划分为剧毒（＜0.1mg·L-1）、高毒（0.1～1mg·L-1）、中毒（1～10mg·L-1）和低毒（＞10mg·L-1）4 个等级[7]。由表6可知，聚维酮碘的安全浓度为0.71mg·L-1，对细鳞鲑幼鱼的急性毒性为高毒；高锰酸钾和甲醛的96hLC50分别为 1.19mg·L-1和 2.61mg·L-1，为中毒；食盐的96hLC50为2 376.00mg·L-1，为低毒。四种消毒剂对细鳞鲑幼鱼的急性毒性由高至低依次为：聚维酮碘＞高锰酸钾＞甲醛＞食盐。安全浓度为：高锰酸钾 1.19mg·L-1，聚维酮碘 0.71mg·L-1，食盐 2 376 mg·L-1，甲醛 2.61mg·L-1。

表6 四种消毒剂对细鳞鲑幼鱼的半致死浓度和安全浓度Tab.6 LC50and safe concentrations of the four disinfectants in lenok Brachymystax lenok juveniles

3 讨论

3.1 高锰酸钾对细鳞鲑的毒性

高锰酸钾是常用的外用消毒剂，具有较强的氧化性，溶于水后产生的新生态氧能破坏菌体蛋白或酶蛋白，起到杀菌、杀虫、消毒的作用。生产上通常用于防治鱼、虾等细菌、真菌和寄生虫类疾病及工具、设施的消毒，但在碱性或微酸性的水中，高锰酸钾易产生二氧化锰沉淀，沉积在水生动物鳃部，严重损坏鳃组织[8]。不同鱼类对高锰酸钾的耐受能力不同，细鳞鲑的安全浓度为1.19mg·L-1，比褐鳟Salmo trutta的安全浓度 0.18mg·L-1[9]高，与白斑狗鱼 Esox lucius Linnaeus的 1.37mg·L-1[10]接近。由此可见，不同的鱼对高锰酸钾的敏感性相差较大。生产中高锰酸钾全池泼洒浓度为2～3mg·L-1，短暂浸浴浓度为10～20mg·L-1[8]，高于细鳞鲑幼鱼的安全浓度。因此，防治细鳞鲑的病害时，要慎用高锰酸钾，但可用于养殖设施和工具的消毒。

3.2 聚维酮碘对细鳞鲑的毒性

聚维酮碘是一种高效的杀菌消毒剂，对细菌、真菌和病毒等均有不同程度的杀灭作用，可直接使菌体内的蛋白质变性、沉淀，致使病原微生物死亡，主要用于鱼卵和体表的消毒，防治鱼类烂鳃、疖疮、腐皮等细菌性疾病效果较好[11,12]，但是在贝类等软体动物和鲑、鳟等冷水性鱼类中需慎重使用。聚维酮碘全池泼洒的指导用药浓度为0.45～0.75mg·L-1，而在水产养殖中常用浓度为30～35mg·L-1浸泡5～20min[13]。聚维酮碘对锦鲤幼鱼24h和48h的半致死浓度为 96.39mg·L-1和 70.88mg·L-1，安全浓度为11.49mg·L-1[14]。聚维酮碘对卡拉白鱼的安全浓度为14.13 mg·L-1[15]。而在本次试验中，聚维酮碘对细鳞鲑幼鱼的安全浓度为0.71 mg·L-1，为高毒。细鳞鲑对其非常敏感，在防治细鳞鲑的病害中禁止使用。

3.3 食盐对细鳞鲑的毒性

在鱼类的养殖过程中，食盐是安全的常规药物，主要是通过改变渗透压来杀灭一些体外寄生虫及病原微生物，可防治鱼类水霉病、多种皮肤或鳃部的寄生虫病和细菌性鱼病。但是在实际操作中食盐用量少不起作用，用量大则易引起水分流失，使盐分透入血液导致鱼体脱水。在杀灭有害细菌的同时也杀灭有益菌，还容易使鱼体表粘液严重脱落，增加了细菌侵入机体的几率，因此必须严格控制食盐的用量[16]。本试验中，细鳞鲑的安全浓度为2 376.00 mg·L-1，与哲罗鲑Hucho taimen的安全浓度2 182.88mg·L-1相接近[17]，低于花鳗鲡Anguilla marmorata的安全浓度 6 600mg·L-1[18]，说明食盐对鱼类的毒性种间差异极大。本试验的结果远远高于张玉勇等[16]细鳞鲑的安全浓度9.25mg·L-1，这可能是试验鱼的规格不同或体质条件差异导致的耐受性差异。食盐的安全浓度较高，在生产实践中，建议用作浸洗药物，使用高浓度的食盐进行短时间浸洗效果更佳。

3.4 甲醛对细鳞鲑的毒性

甲醛能凝固蛋白质和溶解脂类，与氨基酸结合使其变性，灭杀细菌、芽孢、真菌、病毒和寄生虫的效果明显，常用来防治鱼、虾、蟹、鳖等寄生虫类疾病设施和工具消毒，还可用来浸泡标本，其常用剂量为10～30mg·L-1[19]。甲醛消耗水中的氧气，伤害鱼类的鳃组织，使鱼的黏液、表皮蛋白质凝固，危害鱼的鳃、体表。本试验结果表明，细鳞鲑对甲醛的安全浓度为2.61mg·L-1，与之前文献中福尔马林对细鳞鲑鱼种的安全浓度为3.52mg·L-1[16]和虹鳟幼鱼的安全浓度2.478 mg·L-1[20]相接近，低于其常用剂量，对细鳞鲑为中毒。在浓度为10.00mg·L-1时试验鱼96h的死亡率为0%，在浓度为14.95mg·L-1时试验鱼24h的死亡率为20%。在防治细鳞鲑的病害中可以使用甲醛，但要注意浸泡浓度及时间。

在生产上选用药物时，除了要考虑药物的剂量、用药时间外，还要结合实际，考虑水温、水质以及养殖鱼类的规格和生理状态等，以确保用药安全和有效。