不同品种1岁青年马血清生化指标的比较分析

黄新新，李晓斌，李 海，李璇玥，李 倩， 马利鑫，陈 晖，马玉辉

(1.新疆农业大学动物科学学院，乌鲁木齐 830052；2.新疆马繁育与运动生理重点实验室,乌鲁木齐 830052；3.昭苏县畜牧兽医站，新疆昭苏 835699)

0 引 言

【研究意义】血清生理生化指标测定可以体现动物机体的健康状况，同时反映品种间的遗传特性、生长发育环境、饲草营养水平等内外环境因素对机体的影响，是研究动物生长发育的重要参考指标[1-3]，也是临床诊断疾病的有效方法[4-6]。【前人研究进展】在不同品种的牛和猪等的研究中发现，血液生理生化指标检测在饲草料利用率、培育新品系及疾病诊断等方面发挥重要作用[7-10]。薛宵等[11]研究发现，通过测定肉牛血清生化指标可反映出，给肉牛饲喂全株玉米青贮比饲喂普通玉米秸秆青贮和甜玉米青贮效果好，且能降低肉牛料重比，显著提高目粮消化率。田汉晨等[12]研究发现，通过对比雷州与川中2个品种黑山羊血清生化指标，表明雷州黑山羊具有更好的抗氧性。【本研究切入点】鉴于血清生理生化指标的检测价值，当前，国内对马匹血清生理生化指标的研究文献较少，且尚未建立马匹完善的健康评价体系。研究不同品种1岁青年马血清生化指标的比较分析。【拟解决的关键问题】研究以5个不同品种青年马匹为试验对象，通过测定其血清中常规指标、肝脏代谢指标、肾脏代谢指标及糖脂代谢等相关指标，在完善不同品种马匹血清生理生化指标基础数据的同时为不同品种青年马匹的日粮配比、饲养环境改善、疾病预防、健康养殖提供理论数据参考。

1 材料与方法

1.1 材 料

试验于2019年6月在新疆昭苏县进行。

试验选择临床健康的5个品种马匹，分别为3个新疆地方品种(伊犁马、哈萨克马和焉耆马)、1个引进品种(纯血马，纯血马的父母本由国外引进，但是在新疆地区进行自繁后，选择的子代作为试验动物)和1个杂交品种(杂交马，伊犁马♀×奥尔洛夫马♂)。分别为体重(217.44±21.35)kg相近的1岁伊犁马20匹，体重(215.86±18.42)kg相近的1岁哈萨克马20匹，体重(219.00±19.37)kg相近的1岁焉耆马16匹，体重(224.35±14.56)kg相近的1岁纯血马16匹，体重(227.98±21.49)kg相近的1岁杂交马(伊犁马♀×奥尔洛夫马♂)20匹，共计92匹，每个品种均公母各半。

1.2 方 法

1.2.1 试验设计

将以上92匹1岁马，以品种为单位，分为5个组，分别为伊犁马组、哈萨克马组、焉耆马组、纯血马组和杂交马组。在饲养管理和精饲料营养水平相同的基础，进行45 d补喂饲养，试验第45 d采集马匹血液样品，测定其血清中常规指标、肝脏代谢指标、肾脏代谢指标及糖脂代谢指标相关指标。

1.2.2 饲养管理

试验马匹舍饲饲养，精料补充料每匹马 2.50 kg/d，平均分3等份，分别与09:00、14:00及19:00补喂。粗饲料以苜蓿干草和当地禾本科干牧草为主，每天投喂3次，满足自由采食，自由饮水。每次采食结束后马匹活动圈自由运动。列出精料补充料营养水平，营养水平为实测值。表1

表 1 精料组成及营养成分(干物质基础)Table 1 Concentrate composition and nutrient composition(DM basis)(%)

1.2.3 样品采集

于试验第45 d早晨，空腹颈部静脉采集血样至肝素钠抗凝管中，3 500 r/min 离心15 min，取上清，立即-20℃冷冻保存，待测。

1.2.4 测定指标

试验样本均使用南京建成生物有限公司所提供的生化分析仪和试剂盒进行检测血浆中的总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸基转移酶(AST)、尿酸(UA)、肌酐(CREA)、葡萄糖(glucose,GLU)、总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)。

1.3 数据处理

试验数据采用SPSS 19.0软件ONE-WAY ANOVA进行方差分析。试验数据均以平均值加减标准差(Mean ± SD)表示，采用Duncan法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 不同品种马匹血清常规指标比较

研究表明，在5个不同品种青年马匹之间，血清总蛋白存在显著或极显著差异，杂交马和焉耆马极显著高于伊犁马和哈萨克马(P<0.01)，分别提高27.16%、21.79%、24.39%、11.55%；纯血马显著高于伊犁马，比伊犁马高15.33%(P<0.05)。白蛋白和尿素氮5个品种之间差异不显著(P>0.05)，但杂交马和焉耆马血清白蛋白高于伊犁马(高52.74%和62.86%)、哈萨克马(高15.32%和22.96%)和纯血马(高59.33%和69.88%)，哈萨克马高于伊犁马和纯血马(高38.16%)；尿素氮伊犁马高于其他4个品种，但差异不显著(P>0.05)。表2

表 2 不同品种马匹血清常规指标比较Table 2 Comparison of serum routine indexes of horses of different breeds

2.2 不同品种马匹肝、肾代谢指标比较

研究表明，在5个不同品种青年马匹之间，丙氨酸氨基转移酶活力杂交马极显著高于伊犁马、哈萨克马、焉耆马和纯血马(P<0.01)，分别高126.55%、113.09%、34.53%和76.22%；焉耆马极显著高于伊犁马和哈萨克马、显著高于纯血马，分别高68.40%(P<0.01)、48.43%(P<0.01)和30.99%(P<0.05)。血清门冬氨酸基转移酶活力伊犁马极显著高于哈萨克马和杂交马，分别高41.20%(P<0.01)和43.62%(P<0.01)；纯血马显著高于哈萨克马和杂交马，分别高34.79%(P<0.05)和37.10%(P<0.05)。血清中尿酸焉耆马极显著高于伊犁马和哈萨克马(P<0.01)，分别高31.89%和37.85%；杂交马极显著高于哈萨克马，显著高于伊犁马，分别高31.77%(P<0.01)和26.07%(P<0.05)。血清肌酐浓度焉耆马和杂交马分别极显著高于伊犁马、哈萨克马和纯血马(P<0.01)。表3

2.3 不同品种马匹血清糖、脂代谢指标比较

研究表明，在5个不同品种青年马匹之间，血清葡萄糖的浓度杂交马极显著高于伊犁马和纯血马(P<0.01)，分别高37.37%和41.39%，显著高于哈萨克马，高29.10%(P<0.05)；焉耆马显著高于伊犁马和纯血马，分别高25.09%(P<0.05)和28.75%(P<0.05)。血清总胆固醇浓度焉耆马、纯血马和杂交马分别极显著高于伊犁马和哈萨克马(P<0.01)。血清甘油三酯浓度焉耆马和杂交马与其他各品种马匹之间差异极显著(P<0.01)。血清高密度脂蛋白浓度杂交马极显著高于伊犁马，比伊犁马高77.53%(P<0.01)；哈萨克马、焉耆马和纯血马之间差异不显著(P>0.05)。血清低密度脂蛋白各品种之间差异均不显著(P>0.05)。表4

表 3 不同品种马匹肝、肾功能代谢指标比较Table 3 Comparison of metabolic indexes of liver and kidney in different breeds of horses

表 4 不同品种马匹血清糖、脂代谢指标比较Table 4 Comparison of serum glucose and lipid metabolism in different breeds of horses

3 讨 论

血清总蛋白、白蛋白及尿素氮含量体现了机体蛋白质代谢和氮沉积的能力，反映动物体内蛋白质和日粮氨基酸平衡状况[13]。日粮中蛋白质水平是导致血液中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量变化的直接原因。尿素氮是反映机体蛋白质代谢和氨基酸之间平衡状况的关键因素。血液中尿素氮水平低，说明氨基酸平衡好、蛋白质合成率较高。赵芳等[14]研究显示，提高日粮精料补充料的补喂水平对1岁伊犁马血清总蛋白含量无影响，但增加了血清白蛋白含量，降低了血清尿素氮水平。试验结果中，不同品种马匹血浆总蛋白质浓度存在一定差异。焉耆马、纯血马和杂交马血浆中总蛋白质水平显著高于伊犁马和哈萨克马。在相同的精料补充料水平下，焉耆马、纯血马和杂交马表现出更高的日粮蛋白质转化率。伊犁马和哈萨克马的血缘更近，伊犁马以哈萨克马为母本杂交而成，精料补充料水平对伊犁马和哈萨克马血清总蛋白含量影响较小与赵芳[14]等研究结果相近。品种、年龄、饲养管理及使役等因素均会导致马匹对蛋白质需要的差异。Reitnour 等[15]研究成年马对粗蛋白的需求量为16.60 g/kg；Olsman 等[16]研究青年马对粗蛋白的需求量为11.81 g/kg；赵芳等[14]研究青年伊犁马对粗蛋白的适宜需求量为14.28 g/kg。褚洪忠[17]研究显示，饲养管理条件影响血清中总蛋白、白蛋白含量，主要与饲喂时间、饲喂次数及饲喂量等有关。试验中，由于品种的差异，在饲喂相同精饲料的基础上，不同品种日粮氨基酸和蛋白质的平衡性不一致，是导致血浆蛋白质相关指标代谢差异的原因[3]。由于品种的差异，马匹的饲养管理存在一定差异，粗饲料的采食量不一致，也是导致血浆蛋白质水平差异的原因。

丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸基转移酶主要存在与肝脏、肾脏中，参与机体多种氨基酸的联合转氨基作用，通过转氨基作用促进机体不同来源的蛋白质合成、分解代谢过程；也是动物机体蛋白质、脂肪和糖类相互转化代谢过程中的关键酶[18]。机体内环境在稳态状态下其在血清中的活性很低，当机体受到内外刺激或肝肾功能发生病变时在血清中的活性会增加，可作为临床诊断的参考指标[19-21]。也有研究表明，血清丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸基转移酶、碱性磷酸酶活性与氧环境有关，低氧环境下均有升高的趋势[22]。在试验中，血浆中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸基转移酶活力因品种的不同存在显著或者及显著的差异。丙氨酸氨基转移酶是机体内氨基酸代谢过程中必需的催化剂，以肝脏细胞储存最为丰富，肝细胞内丙氨酸氨基转移酶浓度较血清中高1 000～3 000倍，肝细胞损伤是增加血清酶浓度的直接原因。肝细胞损伤时，丙氨酸氨基转移酶首先进入血液中，使血清丙氨酸氨基转移酶明显升高。某种程度上，丙氨酸氨基转移酶水平过高是否存在肝代谢疾病，杂交马达到43.95 U/L，需要做进一步的研究，是品种因素还是肝损伤问题。门冬氨酸基转移酶主要存在于细胞浆的线粒体中，肝损伤时，丙氨酸氨基转移酶浓度升高，增加细胞的损伤，导致门冬氨酸基转移酶在血清中的水平升高。尿酸是嘌呤代谢的最终产物，肌酐是肌酸代谢的产物，机体中的尿酸、肌酐都由肾脏排出体外，二者在血清中的浓度均可以作为评价肾脏排泄能力的参考指标之一[23]。杂交马和焉耆马血清中尿酸、肌酐均高于其它3个品种马匹，可能的原因不同品种青年马匹体质量、体型相近但肌肉含量不同，代谢产生的血清尿酸、肌酐和肌酐清除率存在差异。血清尿酸与动物机体一些激素的分泌也有关系，如雌激素水平能提高肾脏的排泄效率[24]，5个不同品种1岁青年马匹可能存在生长发育阶段不同的差异，血清激素水平不同使其他血清生化指标含量有差异。

动物肝脏是贮备胆固醇、葡萄糖的主要器官，血清总胆固醇含量能反映肝脏不同程度的储备能力；血清葡萄糖含量反映机体对葡萄糖的吸收、转运和基础代谢率。淀粉是动物葡萄糖的主要来源，在消化吸收过程中，肠道吸收的葡萄糖是血中葡萄糖的主要来源。血糖的升高与葡萄糖的吸收速度有关。胰岛素是机体唯一具有降糖作用的激素，具有抑制食后肝内葡萄糖生成，促进血糖向组织内转运和利用的作用，其水平反映了血糖的调节状况。脂类的代谢与血清中总胆固醇和甘油三脂含量关系密切[24]，脂肪动员后甘油三酯进入血液，血清甘油三酯含量能够直接反映机体脂肪储存、消化、吸收是否平衡，如果甘油三酯含量高表明机体对脂肪的利用率低[25]。试验中，杂交马和焉耆马血清葡萄糖水平、总胆固醇含量及甘油三酯浓度均显著或者极显著高于其他品种。与其日格日等[26]研究发现纯血马和蒙古马血清部分生化指标存在极显著差异一致，不同品种的马匹血清生化指标存在生理上的差异，这与不同品种的遗传、日粮适应能力及饲养管理等有关，而具体产生差异的机制需要进一步深入研究。

伊犁马血清中门冬氨酸基转移酶浓度为360.12 U/L，是因为线粒体损伤所致，还是品种的差异，或是初步的运动调训所致，需要进一步做深入研究。

4 结 论

因品种不同，5个品种青年马匹血清生化指标存在显著或极显著的差异，其中焉耆马血清中TP、ALP和BUN含量分别为76.20 U/L、58.27 U/L和7.22 mmol/L；哈萨克马血清中ALT和AST含量分别为22.01和255.05 U/L低于其他品种马，伊犁马血清中GLU浓度为5.62 mmol/L较高，而TG浓度0.66 mmol/L较低，不同品种青年马匹对日粮及日常管理的需求存在差异。在青年马匹的饲养管理过程中，不同品种青年马匹的饲养应依靠血清生化指标，并结合其生长特性、生长发育阶段对日粮组成合理调整，以达到健康养殖。