茜草根中蒽醌成分超声提取的工艺研究

王春兰，周 婷，祁 宇

（吉林农业科技学院，吉林 吉林132101）

中药茜草（Rubia cordifolia L.）系茜草科茜草属植物，主要分布在东北、华北、西北和四川及西藏等地。茜草化学成分研究表明以蒽醌及其苷类化合物为主，还含有萘醌类、萜类、己肽类、多糖类等其他化学成分[1]，具有凉血止血、活血祛瘀等功效。具有蒽醌母核的化合物是抗肿瘤药物研究的重要资源[2]。试验以不同浓度乙醇为提取溶剂，采用超声波方法进行提取，以茜草中蒽醌提取率为指标，筛选最优提取工艺条件。

1 材料与方法

1.1 仪器和材料

超声波清洗机（KQ-100TDB 昆山市超声仪器有限公司），UV-752N 紫外可见分光光度计（上海成光仪器）。1,8 二羟基蒽醌对照品（批号为2016/12，北京博奥拓达科技有限公司，AR），茜草根（产地为陕西），无水乙醇（天津市永大化学试剂有限公司，AR）。

1.2 试验方法

1.2.1 标准曲线的制备

精密称取105℃干燥2 h 的1,8-二羟基蒽醌10.00 mg，用乙醇溶解，定容至100 mL，作为标准溶液。精密吸取上述溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL 各2 份，分别置于10 mL 容量瓶中，一份加0.5%醋酸镁乙醇溶液稀释至刻度，另一份用乙醇溶液稀释至刻度，摇匀。前者置于样品池中，后者置于参比池中，于520 nm 处测定各溶液的吸收值[4]。

1.2.2 样品中蒽醌类成分的测定

茜草样品提取的方法为：茜草根经过粉碎过40 目筛后，再用超声方法提取、过滤，乙醇定容后，待测。分别吸取2 份样品溶液各1 mL，加入0.6 g 醋酸镁乙醇溶液定容10 mL，另一份加入乙醇定容，前者置样品池，后者置参比池中，摇匀后在520 nm 波长处测定吸光度值。

1.2.3 超声法提取条件的选择

通过考察乙醇浓度、乙醇用量、超声时间等因素对提取率的影响，在此基础上进行正交试验。

1.2.4 正交试验方案设计

试验选用L9（34）正交表设计，正交试验的因素和水平具体见表1。

表1 L9（34）正交试验的因素与水平设置

1.3 试验数据分析

正交试验数据处理选用极差分析法（即为R 法）和方差分析法（即为SPSS 法）。

2 结果与分析

2.1 单因素试验

考察了超声提取时间、溶剂用量、乙醇浓度和超声功率对蒽醌成分提取的影响。

称取茜草根粉1.0 g，以70%乙醇为超声提取溶剂，选用不同的提取时间，乙醇用量均为8 mL。从图1 中可知，总蒽醌的提取率随超声时间的延长而增大，当提取时间达到20 min 后再延长提取时间，提取率增加不大，说明在20 min 内提取较完全。

图1 不同超声时间对蒽醌提取率的影响

称取茜草根粉1.0 g，以70%乙醇为超声提取溶剂，超声时间均为20 min，考察溶剂用量对提取率的影响。从图2 中可知，蒽醌提取率随乙醇溶剂用量的增加呈增加趋势，但增加幅度减缓，乙醇用量太大会增加提取成本，因此选取10 mL 的溶剂用量。

图2 不同料液比的提取效果对蒽醌提取率的影响

精密量取茜草根粉1.0 g，乙醇用量10 mL，超声提取时间均为20 min，考察乙醇浓度对提取率的影响。从图3 中可知，乙醇浓度在60%到70%左右，提取率较高，乙醇浓度太高或太低，提取率降低。所以选择70%的乙醇为超声提取溶剂。

2.2 正交试验

对正交试验结果进行组合寻优，得出最佳组合为A2B3C2，极差最大为RA（0.845），RB和RC分别为0.303 和0.243，说明乙醇浓度是影响超声提取效率的主要因素，其次为溶剂用量，超声时间的影响最小。

由表2 看出，第4 号A2B1C2和第6 号A2B3C1两组合的提取率也较高，乙醇浓度一致为70%，乙醇浓度影响大，B 和C 相互补充，影响较小。因此将A2B3C2选为最优组合。

图3 不同乙醇浓度的对蒽醌提取效果率的影响

表2 超声提取蒽醌成分L9（34）正交试验结果

2.3 验证试验

精密称取茜草粉10.00 g，按照正交试验确定的最佳工艺A2B3C2进行试验，同样以蒽醌提取率为指标，3 次提取率分别为1.276%、1.258%和1.263%，平均1.266%。

4 结论

通过选用1,8 二羟基蒽醌为标品，紫外分光光度法测定，考察乙醇浓度、超声时间和溶剂用量等因素对茜草中总蒽醌提取率的影响。经正交试验，得出超声波法提取茜草中蒽醌提取率的影响因素顺序是乙醇浓度＞溶剂用量＞提取时间；筛选得到最佳工艺条件是：乙醇浓度70%，料液比为10，超声时间20 min，该条件下茜草中蒽醌提取率可达1.266%。研究可为开发利用茜草根中蒽醌类资源提供依据。

[1]王素贤，华会明，吴立军.茜草中新蒽醌苷的结构鉴定[J].沈阳药学院学报，1991，8（3）：211.

[2]姚思泰.当代抑制肿瘤的药物蒽环类[J].国外医学-药学分册，1987，5（6）：344.

[3]谭朝阳,尤昭玲.茜草提取工艺的研究[J].中草药，2004，（4）：399-401.

[4]卫亚丽，梁 芳，汤洪敏等.中药茜草中总蒽醌含量的测定[J].贵州农业科学，2011，39（8）：51-53.