长蕊丝石竹的组织培养及快速繁殖初探

张燕霞 （上海市闵行区农业技术服务中心 201101）

长蕊丝石竹的组织培养及快速繁殖初探

张燕霞 （上海市闵行区农业技术服务中心 201101）

长蕊丝石竹的食用和药用价值较高，为满足其市场需求，对长蕊丝石竹的组织培养及快速繁殖技术进行了研究。结果表明，MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L为最佳诱导培养基；MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L为最佳增殖培养基；MS+IBA 0.1 mg/L为最佳生根培养基；泥炭和珍珠岩配比3∶1是理想的驯化基质。

长蕊丝石竹；诱导培养；增殖培养；生根培养；驯化

长蕊丝石竹是分布在我国东北、华北地区的一种多年生草本植物，植株高约30～100 cm，全株光滑无毛。该植物叶片内的生物碱含量较高，具有活血化瘀、消肿止疼的功效；根的提取液，可代替柴胡作药用；嫩叶及茎既可作家养动物的饲料，又是一种食用野菜。由于长蕊丝石竹的食用及药用价值明显，但作为一种野生资源，因被大量采摘，造成了分布锐减，因此，对其进行组织培养，获得大量驯化种苗，以满足市场需求，已成为当前研究的重点。笔者对长蕊丝石竹的组织培养及快速繁殖技术进行了研究。现将相关研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料为来自山东省烟台市昆嵛山脉的野生长蕊丝石竹。

1.2 试验方法

1.2.1 材料的选取与灭菌

选取具有腋芽的茎段，置于塑料网袋中，用流水冲洗2 h。然后在超净工作台上，将腋芽切成1 cm左右的小段。先用70%酒精浸泡1 min，然后用无菌水冲洗3～5次；再用0.5%次氯酸浸泡30 s，然后用无菌水冲洗3～5次，最后将灭菌后的材料放置在灭菌盘中备用。

1.2.2 不定芽的诱导培养

修整腋芽末端，露出新鲜的嫩茎后，将其接种于培养基中用于不定芽的诱导。不定芽诱导培养基分别为MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.3 mg/L。MS培养基中加蔗糖30 g/L、琼脂粉8 g/L，pH值调节在5.8～6.0之间。每处理诱导12瓶，每瓶放置2颗不定芽，培养条件为温度18～26 ℃、光照12 h、光照强度2 500 lx。

1.2.3 不定芽的增殖培养

待外植体诱导出不定芽后，将其切成单株，接种于不同培养基上，培养基浓度分别为MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.3 mg/L。MS培养基中加蔗糖30 g/L、琼脂粉8 g/L，pH值调节在5.8～6.0之间。每个处理12瓶，每瓶放置3颗不定芽，培养条件为温度18～26 ℃、光照12 h、光照强度2 500 lx。。

1.2.4 不定芽的生根培养

待增殖培养基中的不定芽长成具有1个茎节的茎段，将其接种到不同培养基上，进行不定根诱导，培养基浓度分别为MS、MS+IBA 0.1 mg/L、MS+IBA 0.2 mg/L，每个处理12瓶，每瓶放置3颗不定芽，培养条件为温度18～26℃、光照12 h、光照强度2 500 lx。

1.2.5 试管苗的移栽

将生根苗培养瓶的瓶塞打开，置于光照强度2 500 lx、20 ℃左右的条件下，炼苗1 d后取出，洗去基部培养基，移栽到铺有约16 cm厚的混合基质（泥炭∶珍珠岩为3∶1）的温苗床上，浇足水后铺上蛭石。然后每隔1 d用喷壶浇1次水，对组培苗进行初级驯化。栽后15 d，组培苗生长稳定后，每3 d浇1次水。栽后40 d观察幼苗生长情况。

2 结果与分析

2.1 不同培养基对不定芽诱导及增殖的影响

试验结果表明，选用相同激素浓度的培养基对不定芽进行诱导和增殖培养，培养10 d左右不定芽基部就产生大量愈伤组织，30 d后长出新嫩茎，60 d后嫩茎长出2个节段。在不定芽诱导培养基中，以MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L培养基的诱导效果为最佳，不定芽诱导率达100%（见表1）。

表1 不同培养基对长蕊丝石竹不定芽诱导及增殖的影响

在增殖培养中，接种新嫩茎到培养基后，不同培养基的表现也各不相同。以MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/ L培养基的增殖效果为最佳，增殖率达55.6%（见表1），不定芽呈丛生状态，高度为2.5 cm 左右。

2.2 不同培养基对不定芽生根的影响

由表2可知，以MS+IBA 0.1 mg/L培养基的生根效果最佳，生根率达91.7%，且叶色浓绿，叶片较大，株高达2.5 cm左右。

2.3 试管苗的驯化及移栽

试验结果表明，采用泥炭和珍珠岩按3∶1混合的移栽基质，组培苗的成活率高、长势好。本试验先后4次移栽组培苗，成活率均达95%以上，表明泥炭和珍珠岩按3∶1混合的基质配比是理想的训化基质。

试验期间观察发现，移栽40 d后，组培苗根系已基本长出，将其移栽到上海三齐野菜合作社，与野生的长蕊丝石竹相比，组培苗生长更旺盛，每年可采摘4～5次嫩茎，采收量比野生提高42%左右。

2016-03-15