猫须草的组织培养及扦插繁殖试验初报

李 纲 张振乾

（湖南农业大学 湖南长沙 410125）

通过采用扦插繁殖和组织培养两种技术在永州市对猫须草进行繁殖试验，对猫须草的无性扦插繁殖和组培快繁技术进行初步研究，能为以后猫须草在永州市的大批量栽培种植和迅速推广打好技术基础。湖南有着广泛的“药食两用”市场需要，对猫须草的开发研究不仅可以丰富永州中药材种植品种，大面积推广和生产药食两用作物，同时还为天然植物基因资源库的开发利用找到一条新的途径[1-2]。猫须草的种子繁殖技术问题解决后，又可促进农民致富，助推农村劳动力就业。

1 材料与方法

1.1 实验材料和仪器

萘乙酸（国药集团化学试剂有限公司）、吲哚丁酸（木木生物技术有限公司）均为分析纯，此外还有酒精（75%）（广州市化学试剂厂）、氯化汞（河南焦作市中站区橡胶助剂厂）、新洁尔灭、枝剪、黄砂壤、活性炭、香蕉、MS 培养基、N6 培养基。

1.2 实验方法

1.2.1 组织培养

（1）外植体的选取及清洗。取猫须草茎尖5 cm 左右，放置于玻璃瓶中用清水冲洗10 min，然后用新洁尔灭洗涤，再用清水冲洗20 min。洗净后迅速放入接种室，用75%酒精或者0.1%氯化汞清洗10 s，即可进行接种[3]。

（2）接种。在超净工作台接种时，切除灭菌后氧化的黑色部位，留下茎尖和较嫩的腋芽约1 cm，按照表1所设置的4 种培养基进行培养，每种接20 瓶，每瓶放置4 个～6 个芽点。接种后放入培养室，温度控制在 21.0 ℃～23.5 ℃，光照度为2 000 lx，光照时间为12 h，进行分化处理，并进行观察。

表1 四种培养基处理方式

1.2.2 扦插繁育

1.2.2.1 猫须草的春季扦插试验

（1）配制生根水。分别称取萘乙酸、吲哚丁酸各1 g，用0.1%NaOH 溶液溶解，定容至100 mL 容量瓶中配制成母液。使用时按照表2用蒸馏水稀释，配制所需浓度即可。

表2 春季四种生根水处理方式

（2）剪穗和扦插。取5月的猫须草新发嫩芽中茎秆较为粗壮、无病害的嫩枝条进行扦插实验。修剪枝条以3 节为宜，取长度5 cm～7 cm。下部1 节～2 节的叶片从叶柄基部倾斜向上剪去，将顶部的叶片剪去一半，以减少水分蒸腾蒸发。按50 根一捆将下部对齐，分别竖直放入生根水中浸泡，以浸渍下部2 cm 为宜，处理120 min 左右。扦插时，要注意不能倒插，扦插苗入土要插入1/3 左右，倾斜70°～75°[4]。扦插密度要求扦插苗剩余叶片不相互覆盖，并根据扦插苗的粗细不同进行分级管理。

（3）管理方法。扦插前用800 倍～1 000 倍多菌灵或高锰酸钾对土壤进行消毒。扦插后浇一次定根水，一定要浇透，使扦插苗可以与土壤充分接触，并保持苗床的湿度和温度。由于是在温室大棚内进行大棚地膜覆盖和大棚裸露的扦插对比实验，因此要求对裸露插床进行保湿管理，如果裸露插床比较干燥，就要及时进行补水。生根后，浇水次数要减少，以防止潮湿烂根。微量喷施叶面肥，以促进扦插苗生长健壮，出芽饱满。

1.2.2.2 猫须草的冬季扦插试验

（1）配制生根水。分别称取萘乙酸、吲哚丁酸各1 g，用0.1 %NaOH 溶液溶解，定容至100 mL 容量瓶中配制成母液。使用时按照表3用蒸馏水稀释，配制所需浓度即可。

表3 冬季四种生根水处理方式

（2）剪穗和扦插。取11月的猫须草新发嫩芽中茎秆较为粗壮、无病害的嫩枝条进行扦插实验。修剪枝条以3 节为宜，取长度5 cm～7 cm。下部1 节～2 节的叶片从叶柄基部倾斜向上剪去，叶片留2 片～3 片，按50 根～80 根一捆将下部对齐，分别竖直放入生根水中浸泡，处理240 min 左右。冬季扦插时，温度较低，浸泡时间需要增长，要注意不能倒插，扦插苗入土要插入1/3 左右，倾斜70°～75°。扦插密度要求扦插苗剩余叶片不相互覆盖，并根据扦插苗的粗细不同进行分级管理。

（3）管理方法。扦插前用800 倍～1 000 倍多菌灵或高锰酸钾对土壤进行消毒。扦插后浇一次定根水，一定要浇透，使扦插苗可以与土壤充分接触，并保持苗床的湿度和温度。由于是在永州市温室大棚内进行大棚地膜覆盖和大棚裸露的扦插对比实验，冬季大棚内温度较低而湿度较高，管理时视大棚内温度和湿度情况，可进行增温和排湿管理。生根后，浇水次数要减少，以防止潮湿烂根。由于冬季扦插试验大棚温度较低，生根时间较长，因此不用喷施任何肥料。

2 结果与分析

2.1 组织培养结果

如表4所示，从分化到生根期，表现最好的是MS 培养基+6-BA 1.0 mg/L+活性炭培养基。由于后期需要，将MS培养基+6-BA 1.0 mg/L+活性炭培养基培养的组培苗转入继代培养，10 d～12 d 就能进行一次扩繁，46 d 左右能够培育出一批组培苗。在以后的组培苗繁育中，可以根据该培养基进行激素方面的细微调节来达到最优目的。后期在继代培养中，MS 培养基+6-BA 1.0 mg/L+活性炭培养基所培养的猫须草组培苗比较强壮，感染、褐化、白化率都较低，因此该培养基非常适合做猫须草的培养基质。此外，在培养基中分别加入香蕉和活性炭成分，对比猫须草在加入这两种物质的培养基中的各个时期的表现。结果表明，加入活性炭的培养基要优于加入香蕉的培养基。

表4 猫须草组织培养结果

2.2 扦插繁育结果

如表5所示，0.01%萘乙酸和0.01%吲哚丁酸混合浸泡2 h 和大棚覆膜处理的扦插苗生根时间短、生根数量多、出苗时间短、成活率最高，最适合应用于猫须草扦插繁育。大棚覆膜和大棚裸露相比，成活率相差较大，因此，保持土壤和空气的湿润也是猫须草春季扦插的一个重要指标[5]。实验中发现，若大棚覆膜掀膜不及时，会出现烂根等现象，因此，在扦插苗生根后要及时掀膜。扦插繁育能够在12 d内培育出一批高质量的猫须草扦插苗，非常适合短期苗木的快速繁殖[6]。

表5 猫须草春季5月份扦插实验

由表6可知，冬季扦插猫须草，使用0.01%萘乙酸和0.01%吲哚丁酸混合浸泡2 h 和大棚覆膜处理的扦插苗生根时间短、生根数量多、出苗时间短、成活率最高，最适合应用于猫须草扦插繁育。大棚覆盖和大棚裸露相对比，大棚覆盖的成活率高很多，因此猫须草适合在湿度较高的环境下进行扦插繁殖。另外，在冬季进行猫须草扦插繁殖时一定要注意覆膜内的湿度，若湿度过高，覆膜内的扦插枝条容易腐烂、发霉，易出现烂根现象。注意要在适宜的条件下掀开覆膜透气。

表6 猫须草冬季11月份扦插试验

3 结论

使用MS 培养基+6-BA 1.0 mg/L+活性炭培养基，10 d～12 d 就能进行一次扩繁，46 d 左右能够培育出一批组培苗或者脱毒苗；对比猫须草在春季和冬季的扦插繁育，使用0.01%萘乙酸和0.01%吲哚丁酸混合浸泡2 h 和大棚覆膜处理的扦插苗，不管是在春季或者是冬季，都最适合进行猫须草扦插繁殖。猫须草适合在温度和湿度较高的环境下扦插繁殖。试验中，在春季用扦插方法进行猫须草繁殖，最快速且经济实用。但是由于在永州栽培时，猫须草春季萌芽的时间较晚，不利于猫须草的栽培技术推广。在冬季用扦插方法进行猫须草繁殖，时间较长，成活率较低，大棚覆膜和大棚裸露相比，成活率相差很大。扦插繁育能够在12 d内培育出一批高质量的猫须草扦插苗，非常适合用于短期苗木的快速繁殖[7-8]。

4 讨论

进行猫须草栽培试验，不仅可以丰富永州中药材种植品种，同时还为天然植物基因资源库的开发利用找到一条新的途径。猫须草的繁殖技术问题解决后，可促进农民致富，助推农村劳动力就业。虽然春季比较适合猫须草的扦插繁殖，但是因为春插时间较晚，不利于猫须草种苗的栽培与推广，而冬插正好弥补了春插时间较晚这个问题。后期通过试验，要做好猫须草的冬季扦插技术的改进，进一步完善猫须草的栽培管理技术，详细完整的栽培管理技术能够大幅提高猫须草的产量。