三种干粉消毒剂抑菌效果对比试验报告

刘怀瑾，宁玲忠，龙 娉，刘继根 ，曹 娜，迂 斌 ，颜运秋※

（1.湖南农业大学动物医学院，湖南长沙410128；2.长沙道勤生物科技有限公司，湖南长沙410125）

现代畜禽养殖业所面临的最大威胁是畜禽的疫病，而消毒是预防动物疫病最简单、廉价、有效、常用的技术措施，是保证猪场生物安全必不可少的重要手段之一。猪场定期消毒，净化饲养环境，保障健康养殖，对提高养殖经济效益具有重大意义。目前猪场消毒的方法主要有机械清理法、物理消毒法、化学消毒法、生物消毒法等[1,2]。当前消毒药品种繁多，按其性质可分为醇类、碘类、酸类、碱类、卤素类、酚类、氧化剂类、挥发性烷化剂类等，选择合适消毒剂，可以有效降低猪场用药成本，提高消杀效果。本试验通过对新开发的消毒剂开展对比实验，旨在为猪场改善养殖环境提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种：金色葡萄球菌、大肠杆菌（湖南农业大学动物医学院分离保存）

1.1.2 培养基：营养琼脂培养基，麦康凯琼脂培养基

1.1.3 受试产品：凹凸巴斯德(长沙道勤生物科技有限公司生产提供)，干粉消毒剂A（市售，某公司生产，以下称受试品A），干粉消毒剂B(市售，某公司生产,以下称受试品B)，

1.1.4 试验器材：光学生物显微镜、恒温鼓风干燥箱、超净工作台、生化培养箱、全自动蒸汽灭菌器、锥形瓶、烧杯、7.5cm 培养皿、无菌棉签、酒精灯，接种环、记号笔等。

1.2 方法

1.2.1 培养基及培养皿的准备

金色葡萄球菌、大肠杆菌分别采用营养琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基进行培养。营养琼脂培养基及麦康凯琼脂培养基按试剂说明进行配制，灭菌后倒皿备用。

1.2.2 菌种纯化和培养

超净工作台内，无菌操作将金色葡萄球菌、大肠杆菌分别接种营养琼脂培养基与麦康凯琼脂培养基平皿，生化培养箱37.4℃培养24 h。分别挑取培养基中金黄色与玫瑰红色单个菌落（经革兰染色镜检分别呈蓝紫色较大成对呈葡萄串状的球菌与红色中等大小短杆菌），再次分别接种营养琼脂培养基与麦康凯琼脂培养基，生化培养箱37.4℃培养24 h 备用。

1.2.3 受试品抑菌对比试验

抑菌试验采用2 个平行组进行，每组分别取培养好的金黄色葡萄球菌与大肠杆菌，分别用无菌生理盐水洗下菌苔，各自制成为0.5 麦氏单位（1.5×108 个/mL）细菌悬浊液400mL，摇匀备用。每个平行试验组用100mL 无菌锥形瓶4 个，分别标记好受试品名称，将受试菌悬浊液分别按100mL/瓶倒入4 个100mL 锥形瓶中，其中1 瓶为阳性（空白）对照瓶，受试凹凸巴斯德、受试品A 与受试品B 各1 瓶。阳性（空白）对照组锥形瓶不加任何受试品，另3 锥形瓶分别加入称量好的凹凸巴斯德、产品A、产品B 粉末15g，搅拌均匀后（表面会稍有液体分层）静置作用30 min 后摇匀，分别用无菌医用棉签蘸取瓶内液体划线接种营养琼脂培养基与麦康凯琼脂培养基，生化培养箱37.5℃培养24 h。观察抑菌结果。

2 结果

2.1 对金色葡萄球菌抑菌结果

金色葡萄球菌阳性(空白)对照中长满了菌（如图1），凹凸巴斯德试验组培养皿中无菌落生长，受试品A 组、受试品B 组培养皿中长满了淡黄色成片菌落，经涂片染色镜检呈G+菌体较大，少数成对、多数呈葡萄串状排列的球菌。说明凹凸巴斯德对金色葡萄球菌有非常好的抑菌杀菌效果，而受试品A 和受试品B 对金色葡萄球菌无抑制作用。

2.2 对大肠杆菌抑菌结果

大肠杆菌阳性(空白)对照组平皿长满了玫瑰红色菌落（如图2），凹凸巴斯德验组的麦康凯琼脂基培养皿中均无菌落生长，受试品A 组、受试品B 组培养皿中长满了玫瑰红色成片菌落，经涂片染色镜检呈G-中等大小短杆菌。说明受试凹凸巴斯德对大肠杆菌有非常好的抑菌杀菌效果，而受试品A 和受试品B 对大肠杆菌无抑制作用。

3 讨论

消毒是动物养殖生产过程中必不可少的一步。消毒通过物理、化学、生物的方法可以有效抑制动物生活环境中的微生物，切断疾病的传播途径，达到预防控制传染病的发生、传播和蔓延。目前市面有多种消毒剂，大部分为化学制剂，长期使用会导致致病菌产生耐药性，且在使用消毒剂时都是将其溶解在水中后再进行喷洒，含有消毒剂的药水易腐蚀栏舍和养殖器具，增加畜舍湿度，并刺激动物和饲养人员[3]。

干粉消毒剂的主要成分是蒙脱石[4]，碳酸钙[5]等天然矿物质，除传统消毒剂功能以外，还具有干燥、吸附空气中有害气体及水分的特点，因此被广泛使用。主要可用于仔猪涂抹、空气消毒等。有研究证明，在产房使用干粉消毒剂消毒，可有效地减少哺乳仔猪的发病率，对产房仔猪死亡率有一定的改善作用[6]。本实验结果表明，37.5℃下凹凸巴斯德对金色葡萄球菌与大肠杆菌均有很强的抑菌杀菌效果，而受试A 和受试品B 在该试验中对大肠杆菌和金色葡萄球菌无明显抑杀效果，这可能与各组消毒剂的浓度与作用时间有关[7,8]，也可能与市面上大部分干粉消毒剂对微生物的作用是吸附而非杀灭机制有关[9]。

理想的消毒剂，需要有较强的消毒能力及广谱杀菌抑菌能力[10],作为干粉消毒剂，抑杀细菌是其主要功能之一，而金色葡萄球菌和大肠杆菌则分别是G+菌、G-菌的代表，也是养殖场常在菌，本试验采用该两种菌进行抑菌实验，客观地验证了受试品的抑菌性能。本实验结果说明，在一定时间内，受试品凹凸巴斯德在对大肠杆菌和金色葡萄球菌的抑杀效果上，明显优于受试品A 和受试品B。 □