对奶牛布鲁氏杆菌病检测相关问题的思考

时间：2024-05-28

张梦鸽

（山西省运城市畜牧兽医发展中心 044000）

布鲁氏杆菌病又被称为布氏杆菌病，是一种由布氏杆菌引起的慢性人畜共患传染病，世界动物卫生组织将其称作B 类动物疫病，很大程度上阻碍奶牛业的发展[1]。而且需要注意的是，奶牛布鲁氏杆菌病同样可以传染人类，进而对人类健康造成威胁，同样需要引起广泛重视。

1 奶牛布鲁氏杆菌病的基本分析

1.1 布鲁氏杆菌病病因分析

布鲁氏杆菌病（Brucellosis）是由布鲁氏杆菌（Brucella）引起的具有传染性人畜共患病。普通家畜均为其易感动物。在我国流行的菌株中主要以牛种、羊种布鲁氏菌为主，其中牛种布鲁氏菌病对奶牛业危害最为严重。该病具有极高致病性，通常呈现地方流行性。布鲁氏杆菌病的传染源主要在于患病奶牛及其他带菌动物，敏感性强，但对温度十分敏感，沸水即可杀死布鲁氏杆菌。同时，布鲁氏杆菌病转移性极强。布鲁氏杆菌病主要通过消化道进行传播，当奶牛接触患病奶牛或被其污染的饲料、乳汁、分泌物甚至地面土壤后均可能会造成一定的程度感染。而人类如果缺乏必要的消毒防护措施，贸然接触患病奶牛或相关动物源性食品，布鲁氏杆菌会透过人类皮肤黏膜侵入呼吸道及结膜等，促使人类感染布鲁氏杆菌病[2]。对于奶牛而言，布鲁氏杆菌病的主要特征在于母牛流产，产出死胎或脆弱犊牛。

1.2 布鲁氏杆菌病临床表现

布鲁氏菌病主要侵害奶牛自身生殖系统，引发一系列繁殖障碍等疾病。怀孕母畜经常以发生流产现象为主，引起关节炎、子宫炎、腹膜炎等炎症，甚至可能会造成奶牛不孕等情况。对于感染布鲁氏杆菌病奶牛所出现流产问题，可能会出现在其中任何环节，孕育奶牛流产前期便会出现无法正常休息、食欲不振等情况；新生犊牛一般可以见到肺炎病灶；公牛也可被感染，公牛感染后会出现睾丸炎等情况，一般不易被发现。人类如果感染上布鲁氏杆菌病一般表现为浑身无力、低烧、生殖系统障碍等疾病，严重者可终身丧失劳动力甚至死亡，需要引起重视，及时预防。

2 奶牛布鲁氏杆菌病的诊断方法

2.1 细菌学诊断

通过分离布鲁氏杆菌培养、涂片染色进行诊断的试验方法。其中标本采集是重中之重。选取适宜的抗生素在合适的部位按照相关试验要求完成采集工作，采样结束接种于培养基培养。对比所形成的菌落与布鲁氏杆菌的生物特性进行鉴别；涂片染色通常是将血液等组织制作成涂片，采取沙黄、亚甲蓝鉴别法进行染色，显微镜下观察染色情况，如果被染成红色，那么证明检验的细菌为布鲁氏杆菌，如果呈现蓝色，则证明所检验细菌为其他细菌。细菌学诊断准确性高，但存在潜在的感染风险，因此，要求相关人员有一定的专业基础。

2.2 虎红平板凝聚试验

虎红平板凝聚试验（RBPT）又被称为班氏孟加拉红平板凝集试验，是一种较为简单便捷的检测方式，常常应用于阳性牛的初步筛选[3]。检测布鲁氏杆菌病所使用的抗原是经过虎红染料染色后悬浮于乳酸缓冲液中制备而成，所以呈现粉红色。通过血清对照进行判断，如果受检血清在4min 内出现肉眼可见凝集现象则判为阳性；如果无凝集现象，呈均匀粉红色则判为阴性。虎红平板凝聚试验虽然会出现假阴性等缺点，但有灵敏性高、操作简单、成本低的优势，是布鲁氏杆菌病常用的监测手段之一。

2.3 试管凝集反应

试管凝集反应主要适用于实验室操作，是一种较为快速的诊断方法。试管凝集反应经常用于定量试验。通过将抗原与受稀释的奶牛待测血清混合放置，观察凝集现象，以此来确定血清中是否存在该抗体和该抗体的含量。该方法易受外界因素的影响，容易出现假阳性和假阴性的结果。

2.4 奶牛布病快速诊断试纸条

奶牛布病快速诊断试纸条又被称为胶体金法快速诊断试纸，是当前我国用于检测布鲁氏杆菌病的一种新型诊断方法。经常用于奶牛场随时初次检验，奶牛场防疫工作人员可以通过奶牛布病快速诊断试纸条对牛群布鲁氏杆菌病患病情况进行初步检验，简单快速，而且试管凝聚方法的符合率很高，是现阶段进行布鲁氏杆菌病检测的常用方法。

2.5 ELISA 反应法

ELISA 反应法通常采用固相载体表面抗原与抗体的特异结合，在酶的作用下底物发生颜色变化。测定对象可以是抗体也可以是抗原。ELISA 反应法包括间接法、双抗体夹心法、双抗原夹心法、竞争法、阻断法等。ELISA 反应法的优势在于其准确率高，出错率低且判定简单。

2.6 实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR 技术是在分子水平上对病原进行鉴定，具有特异性强、灵敏度高的特点，较细菌学、血清学相比有更高的安全性，可以同时对大批样品进行检测。随着非洲猪瘟的流行，分子病原学检测技术已普及到县（市、区）级兽医实验室，在未来实验室监测会成为主流监测手段。

3 奶牛布鲁氏杆菌病的防控措施

3.1 确保卫生，定期消毒检查

需要明确的是，奶牛布鲁氏杆菌病病因复杂，近年来，发病率也在逐渐上升，对畜牧业造成极大威胁，而人类一旦患病，严重时可危及生命，对畜牧业和公共卫生安全造成不可估量的经济损失，所以必须引起重视。当前对布鲁氏杆菌病缺乏切实有效的药物，主要以预防为主。卫生是第一大关，保证养殖场环境安全卫生才能保证奶牛健康成长，避免因环境问题加剧布鲁氏杆菌病。

对于奶牛养殖场而言，应设立独立的消毒通道，确定无菌空间。工作人员进出奶牛场需进行消毒；对奶牛场养殖环境定期消毒；应科学合理的喂食奶牛饲料提高奶牛自身免疫力；每天清理奶牛粪便，如果需要积累肥料，也应做好粪便无害化处理，搞好卫生消毒，提供安全的奶牛生活环境。

3.2 管理严格，避免交叉感染

在保证奶牛安全的生活环境基础上，应对奶牛进行定期免疫，同时进行血清学监测监督奶牛抗体水平，抗体不达标时应注意加强免疫等工作。定期进行布鲁氏杆菌病检测工作，避免染病奶牛进入奶牛养殖场。布鲁氏杆菌病对奶牛自身伤害极大，而且具有极强污染性，所以应定期进行分子病原学检测，确保没有布鲁氏杆菌病原。对已感染布鲁氏杆菌病的奶牛，由于很容易进行传染，必须采取扑杀方式，并进行消毒处理，确保净化可靠，只有保证安全无菌的奶牛生活环境，严格管控奶牛养殖场，才能避免患病奶牛发生交叉感染情况，将布鲁氏杆菌病进一步扩大。

奶牛养殖场工作人员应确保自身健康，定期进行体检，布鲁氏杆菌病不仅能传染动物，也能传染人类，所以在整个奶牛养殖过程必须做好自身防护工作，奶牛养殖场应避免非工作人员进入奶牛养殖场。

3.3 强化根除，科学饲养奶牛

奶牛养殖场工作人员确保卫生消毒，以及奶牛养殖场环境确保定期检查的基础上，奶牛养殖场应适当采取科学饲养方式，提高奶牛自身免疫力，同时避免引进外部奶牛，而是采取自繁自养，从源头处防控布鲁氏杆菌病。对奶牛进行科学合理的疫苗接种，一般奶牛在牛犊出生后6 个月就可以采取一次疫苗接种，18 个月可以进行二次接种疫苗，切实确保安全健康。