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影响兽医生物制品灭活作用的因素

时间:2024-05-28

季伟

(辽宁省凌海市余积动物卫生监督所121206)

影响兽医生物制品灭活作用的因素

季伟

(辽宁省凌海市余积动物卫生监督所121206)

兽医生物制品生产中的灭活,是指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性,但尽可能不影响其免疫原性,被灭活的微生物主要用于生产灭活疫苗;或指破坏诊断血清或待检血清中的补体活性,以避免补体对诊断试验的干扰作用。灭活的对象不同,采用的方法也不尽相同。灭活的主要方法有两类,即物理方法和化学方法。灭活方法不同,化学灭活剂的种类又很多,作用机理也不同,因此,灭活效果受多种因素影响。

1 灭活剂特异性

某些灭活剂只对一部分微生物有明显的灭活作用,而对另一些微生物则效力很差。如酚类能抑制和杀灭大部分细菌的繁殖体,5%石碳酸溶液于数小时内能杀死细菌的芽孢。真菌和病毒对酚类不太敏感。阳离子表面活性剂抗菌谱广,效力快,对组织无刺激性,能杀死多种革兰氏阳性菌和阴性菌,但对绿脓杆菌和细菌芽孢作用弱,其水溶液不能杀死结核杆菌。因此在选择灭活剂时,应考虑其特异性,即应考虑其对微生物的作用范围。

2 微生物种类与特性

不同种类的微生物如细菌、病毒、真菌以及革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌对各类灭活剂的敏感性并不完全相同;细菌的繁殖体及其芽孢对化学药物的抵抗力不同;生长期和静止期的细菌对灭活剂的敏感程度亦有差别。此外,细菌的浓度也会影响灭活的效果。微生物或毒素的总氮量和氨基氮含量对灭活也有一定影响。一般含氮量越高,甲醛等灭活剂的消耗量就越大,灭活脱毒速度越慢。

3 灭活剂浓度

以甲醛为例,甲醛浓度越高,灭活脱毒越快,但抗原损失量亦较大。有人证明,加0.5%甲醛溶液脱毒的类毒素,其结合力仅相当于0.2%甲醛溶液脱毒类毒素结合力2/3。有时可以采用分次加入甲醛溶液进行灭活、脱毒比较缓和的方法。即将甲醛溶液分数次加入,加量由小至大,pH由低而高,温度由室温开始,逐步提高到允许的最高温度,这样对于保护抗原的免疫原性有一定好处。

4 灭活温度

通常情况下,灭活作用随灭活温度上升而加速。在低温时,温度每上升10℃,细菌死亡率可成倍增加。每升高10℃,金属盐类的灭活作用增加2~5倍,石碳酸的杀菌作用增加5~8倍。但是,如果温度超过40℃或更高,对微生物的抗原性将有不利影响。

5 灭活时间

灭活时间与灭活剂浓度和作用温度密切相关。一般随着灭活剂浓度及作用温度升高,灭活时间则缩短。在生物制品生产中,应以保证制品安全和效力,采用低灭活剂剂量、低作用温度和短时间处理为最佳。

6 酸碱度

在微酸性时灭活速度慢,抗原性保持较好,在碱性时灭活速度快,但抗原性易受破坏。灭活初期损失较快,以后逐渐减慢,尤其甲醛溶液浓度高时,在碱性溶液中抗原性损失更大。pH对细菌的灭活作用有较大影响。pH改变时,细菌的电荷也发生改变,在碱性溶液中,细菌带阴电荷较多,阳离子表面活性剂的杀菌作用较大。在酸性溶液中,则阴离子的杀菌作用较强。同时,pH也影响灭活剂的电离度。未电离的分子一般较易通过细菌细胞膜,灭活效果较好。

7 有机物的存在

被灭活的病毒或细菌液中,如果含有血清或其它有机物质,会影响灭活剂的灭活能力。因为有机物能吸附于灭活剂的表面或者与灭活剂的化学基团相结合。受此影响最大的为苯胺类染料、汞制剂和阳离子去污剂。一旦汞制剂与含硫氢基化合物相遇或季铵盐类与脂类结合,则明显降低这些灭活剂的灭活作用。

总之,了解影响灭活作用的因素,在兽医实际生产中适当避免不正确的操作,使兽医生物制品发挥最大的作用,给养殖业带来最高的经济效益。

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