猪口蹄疫快速检测卡在免疫监控中的应用

徐建平（新疆生产建设兵团库尔勒第二师畜牧兽医工作站 841023）

猪口蹄疫快速检测卡在免疫监控中的应用

徐建平（新疆生产建设兵团库尔勒第二师畜牧兽医工作站 841023）

通过猪口蹄疫快速监控技术在养殖场进行母源抗体、抗体消长状况、免疫程序建立，使养殖户能够在不需繁琐的实验室条件下，快速了解自己养殖场的防疫状况，以便及时预防，达到防病抗病的目的。

猪口蹄疫；快速检测卡；监控技术；免疫应用

1 猪口蹄疫快速检测卡简介

1.1 监测卡的原理

检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是，以微孔滤膜为载体，包被已知抗原，加入待检标本后，经滤膜的毛细管作用，标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合，再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式，即为金标试纸条。判定标准：口蹄疫抗体阳性≥1：32（5log2），口蹄疫抗体阴性＜1：32（5log2）。

1.2 特点

操作简便、特异性好、快捷迅速、易于判断。

1.3 检测卡使用说明

1.3.1 使用

检测卡在夏天、冬天都可使用，但为加快监测速度，建议使用4000转的简易离心机快速析出血清，使整个监测过程在5～10min完成。

1.3.2 说明

只用于防疫的监督检查、检疫的监督检查，不作为免疫抗体结果的最终结论。

2 在免疫中的应用

2.1 试剂

所用疫苗：猪口蹄疫苗呼和浩特金宇保灵生物有限公司，批号3136028。疫苗使用方法：口蹄疫2～4ml。

2.2 采用检测卡（金标法）

在农牧团场，选取免疫效价合格的母猪所产的仔猪为试验对象。随机抽检在21日龄断奶的6窝仔猪，每窝仔猪抽检采血4～6头，共31头仔猪。以刚出生没有吃上初乳为0日龄，第2d为1日龄，以次类推。可以看出幼畜在未吃初乳前，体内基本没有抗体，吃过初乳后，抗体迅速上升，随着日龄的增加，抗体效价呈明显的线性下降之势。

2.3 口蹄疫母源抗体

仔猪O型口蹄疫母源抗体合格率，在0日龄为零，在10日龄达到最高，到35日龄是还在合格水平，40日龄降到合格以下，所以在40日龄就可以作为猪口蹄疫首免日龄，见图1。

图1 仔猪口蹄疫母源抗体消长动态

2.4 结论

猪抗体消亡时间，也就是免疫时间。仔猪口蹄疫在40日龄为首免日期。

3 猪口蹄疫检测卡检测免疫效价

（1）在农牧团场猪场，采用检测卡对仔猪进行O型口蹄疫的免疫，采用检测卡查看首免、二免、三免测定抗体效价。

（2）单独注射口蹄疫疫苗，每次注射间隔15d，检测43头仔猪，免疫 15d后采血样，平均抗体效价，首免为2.1log2、二免7.9log2、三免8.4log2。免疫合格率，在首免时效果不理想，二免效果较好，三免最好。但采用spss软件分析第2次和第3次差异也不显著，见图2。

图2 仔猪口蹄疫免疫效果

（3）结果：注射一次疫苗效果较差，免疫合格只在20～30%左右。2次免疫效果可以达到合格水平，3次免疫比2次效果好，但差异不显著。故一种疫苗至少免疫2次。

4 讨论

检测卡具有使用简单、快捷、准确、易于操作，夏天、冬天都可使用的特性，且在动物防疫工作中的免疫自查、检疫、监督工作上都可使用，其应用前景广阔，值得推广应用。

项目来源：新疆建设兵团第二师科技项目，项目编号：2013NYGG1。