30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂分析方法研究

张 钊，万娜娜，梁观凤，林培旺，谌 伟

(上海悦联生物科技有限公司，上海悦联化工有限公司，上海 201512)

丁氟螨酯[1]是由日本大冢化学公司开发的新型酰基乙腈类杀螨剂，属于非内吸性杀螨剂，与现有杀虫剂没有交互抗性，而且可以在水和土壤中迅速分解代谢。主要作用方式为触杀，其通过接触进入螨虫体内后，能够在螨虫体内通过代谢，产生极具活性作用的物质AB-1，AB-1对二点叶螨线粒体复合体Ⅱ具有强烈的抑制作用，抑制螨虫的呼吸作用，主要用于柑橘红蜘蛛，对小菜蛾、斜纹夜蛾、二化螟、稻飞虱、桃蚜等害虫亦有良好防治作用。

乙螨唑[1]是由日本住友化学株式会社研发的一种全新具特殊结构的杀螨剂，属于非内吸性杀螨剂，具有触杀和胃毒作用，与大部分杀螨剂无交互抗性，有较强的渗透作用。作用方式主要是抑制几丁质的合成，抑制螨卵的胚胎形成以及从幼螨到成螨的蜕皮过程。主要防治苹果、柑橘的红蜘蛛，对棉花、花卉、蔬菜等作物的叶螨、始叶螨、全爪螨、二斑叶螨、朱砂叶螨等螨类也有卓越防效。

将丁氟螨酯和乙螨唑以适当比例混配成制剂，可显著提高药效，扩大防治范围，延缓抗药性，乙螨唑对卵及幼螨有效，而丁氟螨酯对螨虫各个生长阶段有很高的活性，二者的复配可有效拓宽防治期。

有关丁氟螨酯的分析方法[2-3]和乙螨唑的分析方法[4-5]已有相关报道，但两者混配悬浮剂的分析方法还未见报道，本文采用反相高效液相色谱法，对30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂(25%+5%)中有效成分丁氟螨酯和乙螨唑同柱分析和定量，经过实验验证，此方法操作快速、简便，精密度和准确度均能满足定量分析要求，能适用于产品质量控制和相关分析的研究。

1 材料仪器

1.1 样品和试剂 乙腈：色谱纯；水：二次重蒸蒸馏水；丁氟螨酯标样：已知丁氟螨酯含量98.0%；乙螨唑标样：已知乙螨唑含量99.0%，流动相：乙腈∶水=80∶20，经0.45 μm孔径的滤膜，并在超声波浴槽中脱气10 min。

1.2 仪器 高效液相色谱仪：具紫外可变波长检测器；色谱柱：Kromasil C18/5 μmΦ4.6 mm×150 mm不锈钢柱。

1.3 高效液相色谱操作条件 流量：1.0 mL/min；柱温：室温(温差变化≤2℃)；检测波长：210 nm；进样体积：10 μL；保留时间：丁氟螨酯约5.6 min，乙螨唑约7.9 min。

上述操作条件是典型的，可根据仪器的特点对操作参数做适当调整，以期获得最佳效果，典型的丁氟螨酯(乙螨唑)高效液相色谱图(图1)。

注：1—丁氟螨酯，2—乙螨唑图1 30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂高效液相色谱图

2 试验方法

2.1 标准溶液配制 称取乙螨唑标样0.05 g和丁氟螨酯标样0.05 g(精确到0.000 2 g)分别置于2个50 mL容量瓶中，乙螨唑标样用乙腈稀释至刻度，超声振荡5 min使样品溶解，冷却至室温，摇匀；再用移液管准确吸取10 mL乙螨唑标样溶液到丁氟螨酯标样的容量瓶中，加乙腈稀释至刻度，超声振荡5 min使样品溶解，冷却至室温，摇匀；再移取混合标准溶液5 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀。

2.2 试样溶液配制 称取0.20 g样品(精确到0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，超声振荡5 min使试样溶解，冷却至室温，摇匀；再用移液管准确吸取5 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀、过滤。

2.3 试样的测定 在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，待相邻2针的响应值变化<1.5%后，按照标样溶液，试样溶液，试样溶液，标样溶液的顺序进行测定。

2.4 试样中有效含量的计算 将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中的峰面积分别进行平均，试样中丁氟螨酯(乙螨唑)的质量分数X(%)分别按式(1)计算：

(1)

式中：

A1—标样溶液中丁氟螨酯(乙螨唑)峰面积的平均值；

A2—试样溶液中丁氟螨酯(乙螨唑)峰面积的平均值；

m1—丁氟螨酯(乙螨唑)标样的质量，g；

m2—试样的质量，g；

f—稀释因子，丁氟螨酯f=1，乙螨唑f=5；

P—标样中丁氟螨酯(乙螨唑)的质量分数，%。

3 结果与讨论

3.1 溶剂的选择 根据2种待测物质的溶解度性质，选择乙腈作为溶剂。

3.2 流动相和检测波长选择 通过二极管阵列检测器对丁氟螨酯标样和乙螨唑标样进行190～400 nm范围内的吸收光谱扫描(图2～3)，由光谱信息(图2～3)并结合分析中助剂杂质干扰因素(图4)，选定检测波长为210 nm。在乙腈、水中调节比例，将丁氟螨酯和乙螨唑进行有效分离，同时避免助剂和杂质干扰，最后确定为乙腈∶水=80∶20作为流动相，在此条件下对30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂中丁氟螨酯、乙螨唑峰纯度扫描，30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂中丁氟螨酯、乙螨唑的峰纯度均>99.9%，30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂中丁氟螨酯、乙螨唑有效成分出峰位置无明显物质干扰，符合定量分析要求。

图2 30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂中丁氟螨酯HPLC-DAD特异性扫描图

图3 30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂中乙螨唑HPLC-DAD特异性扫描图

图4 30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂制剂空白图

3.3 分析方法的线性相关试验 准确配制一系列不同浓度的丁氟螨酯和乙螨唑标样溶液，然后分别按本文中2.3测定步骤进行分析检测，分别以丁氟螨酯和乙螨唑的质量浓度为横坐标，丁氟螨酯和乙螨唑的峰面积为纵坐标，计算一元线性回归方程。线性相关性测定试验数据(表1，图5、6)。

表1 分析方法的线性试验结果

图5 丁氟螨酯线性关系图

图6 乙螨唑线性关系图

丁氟螨酯一元线性回归方程：y=34.031 53x+0.104 44，相关系数：R=0.998 88。

乙螨唑一元线性回归方程：y= 418.878 52x+ 0.264 95，相关系数：R=0.998 84。

3.4 分析方法的精密度相关试验 任取一批30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂，按本文中2.3测定步骤连续测定丁氟螨酯、乙螨唑质量分数10次，分别计算其平均值、标准偏差、变异系数。精密度测定试验数据(表2)。

表2 分析方法的精密度试验结果

从丁氟螨酯、乙螨唑精密度测定试验结果中可以看出，丁氟螨酯的标准偏差为0.011 7，变异系数为0.046 5%，

3.5 分析方法的准确度相关试验 选取已知含量的30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂样品，准确称取5份，并分别加入定量的丁氟螨酯、乙螨唑标样，然后按2.3测定步骤测定丁氟螨酯、乙螨唑标样的加入量，同理论值进行比较，计算回收率。准确度测定试验数据(表3)。

表3 分析方法的准确度试验结果

按照本标准规定的方法进行检测试验，丁氟螨酯回收率在99.61%～100.35%之间，平均回收率为99.95%，乙螨唑回收率在99.66%～100.24%之间，平均回收率为99.97%。

4 结论

实验结果表明，本文建立高效液相色谱分析方法能对30%丁氟螨酯·乙螨唑悬浮剂中有效成分进行分离测定，且具有良好的线性、精密度和准确度，操作简便，符合农药产品的质量分析要求，适用于产品的质量检测和控制，可以作为丁氟螨酯和乙螨唑混配制剂的分析方法。