噁虫酮原药高效液相色谱分析方法研究

冯彦妮，姜宜飞，郭海霞，吴进龙*

(1.山东省农药科学研究院，山东 济南 250100；2.农业农村部农药检定所，北京，100125)

1 前言

噁虫酮英文通用名称：Metoxadiazone，CAS号：60589-06-2，分子式：C10H10N2O4，相对分子质量：222.2，化学名称：5-甲氧基-3-(邻甲氧基苯基)-1,3,4-二唑-2-(3H)-酮，结构式(图1)。[1]

图1 噁虫酮结构式

噁虫酮具有良好的杀螨杀虫活性，杀虫谱广，能够将昆虫快速击倒。其作用机理是抑制乙酰胆碱酯酶和对神经轴索作用，对防治对拟除虫菊酯类产生抗性的家蝇、蟑螂等害虫具有很好的效果。对刺吸式口器害虫、同翅目害虫如蚜虫、飞虱、叶蝉等农业害虫都具有优异的杀虫活性。它在植物体内的持久期比较短而在叶面和土壤中的持效时间相对较长。[2]

目前国内有关噁虫酮原药的分析方法未见公开报道。本文采用高效液相色谱法，对噁虫酮原药进行定量分析，该方法操作简便、快速，准确度和精密度均能达到定量分析的要求，可以作为企业生产过程质量控制和质检机构分析检测的参考方法。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液 甲醇(色谱纯)；超纯水(电阻率18.2MΩ·cm，25℃)；磷酸(分析纯)；噁虫酮标样，已知质量分数99.9%(由农业农村部农药检定所提供)；噁虫酮原药(由某公司提供)。

2.2 仪器 高效液相色谱仪：Agilent 1200，具有二极管阵列检测器和自动进样器，定量环：100μL；Agilent色谱工作站；Millipore超纯水制备系统；色谱柱：250mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAX SB-C185.0μm填充物。

2.3 液相色谱操作条件 流动相：ψ(甲醇:0.1%磷酸水溶液)=50:50；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：280nm；进样体积：5μL；保留时间：噁虫酮约6.7min。

噁虫酮标样和原药的高效液相色谱图(图2、3)。

图2 噁虫酮标样高效液相色谱图

图3 噁虫酮原药高效液相色谱图

2.4 测定步骤

2.4.1 标样溶液的配制 称取噁虫酮标样0.02g(精确至0.000 2g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.4.2 试样溶液的配制 称取含噁虫酮0.02g的试样(精确至0.000 2g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.4.3 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液的响应值相对变化<1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.4.4 计算 将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中噁虫酮峰面积分别进行平均。试样中噁虫酮的质量分数ω(%)，按式(1)计算：

(1)

式中：

A1──标样溶液中噁虫酮峰面积的平均值；

A2──试样溶液中噁虫酮峰面积的平均值；

m1──标样的质量，g；

m2──试样的质量，g；

P──标样中噁虫酮的质量分数，%。

3 结果与讨论

3.1 色谱条件的选择 通过Agilent 1200高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，获得噁虫酮的紫外波长扫描图(图4)。从图中可以看到噁虫酮最大吸收波长在220nm处，在280nm处也有较大的吸收，为了尽量减少溶剂的干扰，将检测波长定为280nm。

图4 噁虫酮紫外吸收谱图

色谱柱选择常规的ZORBAX SB-C18反相柱。依据噁虫酮物化性质，用甲醇作为溶剂溶解样品，并选择甲醇和水作为流动相，为了得到更好的分离效果和峰形，将流动相按不同比例在色谱柱上进行试验，最终确定流动相为ψ(甲醇:0.1%磷酸水溶液)=50:50，在流速1.0mL/min时，有效成分与杂质能得到很好的分离，峰形对称，基线平稳，能在短时间能得到满意的分析结果，提高了工作效率。

3.2 分析方法的线性相关性试验 在0～1.0g/L范围内，配制0.05、0.1、0.45、0.7、1.0g/L的1组噁虫酮标准溶液，按上述色谱操作条件进行分析，测定噁虫酮的峰面积，取2次测定的平均结果，以噁虫酮的质量浓度(x，g/L)为横坐标，峰面积(y)为纵坐标，绘制标准校正曲线。拟合噁虫酮线性方程为y=4.034 3x-0.415 8，相关系数为0.999 9。结果表明噁虫酮在测试的质量浓度范围内线性关系良好。

3.3 分析方法的精密度试验 从同一产品中准确称取5个试样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得噁虫酮的标准偏差为0.16%，变异系数为0.16%(表1)。

表1 分析方法的精密度试验结果

3.4 分析方法的准确度试验 从已知质量分数的噁虫酮(99.62%)中称取5个试样，分别加入一定量的噁虫酮标样(99.9%)，在上述色谱操作条件下进行分析，测得噁虫酮的平均回收率为99.98%(表2)。

表2 分析方法的准确度试验结果

4 结论

试验建立了高效液相色谱法检测噁虫酮中有效成分的分析方法。试验结果表明，噁虫酮在测试浓度范围内线性关系良好，方法准确度和精密度较高，具有操作简便、快速的特点，是产品质量控制和应用研究中较为理想的分析方法。