19种农药对食用菌菌丝生长的安全性评价

蒋 宁，骆 昕，曲绍轩，林金盛，侯立娟，李辉平，马 林

(江苏省农业科学院蔬菜研究所，江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室，江苏 南京 210014)

近年来，我国食用菌产业发展迅速，已经成为我国栽培业中的第六大产业[1]，占世界食用菌总产量的70%以上。在众多可栽培的食用菌品种中，以季节性栽培模式的木腐类食用菌为主要品种，这类食用菌由于其出菇环境潮湿、光线较暗、温度在20～25℃左右，适宜大多数病原微生物、腐食性昆虫、螨虫的生存，且出菇期需要大量通风，空间无法密闭，导致在栽培期容易出现真菌、细菌等病原菌[2-4]和菇蚊、螨虫等虫害[5-6]的为害，同时在未被硬化的栽培场所内外还容易生长杂草，影响食用菌的生长环境，因此，除草剂、杀菌剂、杀虫剂等各类农药会用于季节性栽培品种的生产过程中。

目前我国在食用菌上登记的农药产品共11个，其中杀菌剂9个(有效成分仅有3种)，杀虫剂1个，植物生长调节剂1个，但已报道的食用菌虫害种类有90余种[7]，常见病害种类有50多种[8]，现有的农药种类无法满足实际生产的需要。且在多次食用菌农残检测中出现了超标情况[9]，迫切需要增加用于食用菌的安全农药产品用于防治栽培期发生的病虫害。

一个合格的农药产品除了良好的防治效果和残留达标，还有一个关键的要求就是要对食用菌无药害、无抑制，而食用菌作为真菌的一大类，对农药的敏感性比植物更高，尤其是广谱性的杀菌剂，容易对食用菌的菌丝生长、子实体形成造成影响。基于对农药安全性的考量，本文选择了常见的19种均未在食用菌上登记使用的农药，包括除草剂、杀菌剂、杀虫剂三类，由于食用菌的栽培模式与植物差异较大，目前农药的推荐剂量不一定适用于食用菌，因此本试验希望测定较高浓度农药对香菇、黑木耳、平菇、毛木耳、茶树菇、秀珍菇等6个产量在国内位居前列的食用菌品种菌丝生长的影响，以期对食用菌上的可用农药进行安全性评价，确保其在推荐剂量下对食用菌生长无影响，为下一步开展农药登记提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试农药 所选农药均为常见农药种类及剂型，包括除草剂、杀菌剂及杀虫剂，均为未登记在食用菌上使用的农药，详细情况(表1)。

表1 供试农药种类

1.1.2 供试食用菌 黑木耳Auriculariaauricula、毛木耳Auriculariapolytricha、平菇Pleurotusostreatus、秀珍菇Pleurotusgeesteranus、香菇Lentinusedodes和茶树菇Agrocybeaegerita等6种常见季节性栽培食用菌品种的菌株均为江苏省农业科学院蔬菜研究所食用菌研究室保藏菌株。

1.2 试验方法 采用平皿菌丝生长速率法[10]测定不同农药对食用菌菌丝生长的影响。将19种供试药剂分别用无菌水按10、50和100倍3个倍数稀释，并将药剂稀释液分别与PDA培养基按体积比1:9的比例混合，使含药培养基中药剂的最终稀释倍数为100、500和1 000倍。待培养基凝固后，将直径7mm的6种食用菌菌饼分别接种于含药平板中央，菌丝面朝下，盖上皿盖，将平皿倒放于25℃恒温培养箱中静置黑暗培养。培养基中加入与药液等量的无菌水作为空白对照，每处理3次重复。

1.3 数据统计与分析 待空白对照的菌丝即将长满平皿时，用十字交叉法测量菌落直径，计算各处理对菌丝生长的抑菌率。利用Excel软件计算标准偏差(STDEV.P)，并分别绘制除草剂、杀菌剂和杀虫剂对食用菌菌丝抑制率的柱形图。

菌丝生长抑制率[11]=(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-菌饼直径)×100%。

2 结果与分析

2.1 2种除草剂对食用菌菌丝生长的影响 采用菌丝生长速率法测定了氯氟吡氧乙酸异辛酯和草铵膦两种除草剂对6种食用菌菌丝生长的影响，结果(图1)。2种除草剂稀释倍数为100倍时，对所有食用菌品种的菌丝均出现完全抑制的作用；稀释倍数为500倍时，除草铵膦对毛木耳菌丝的抑制率为74.12%±4.40%外，其他处理的抑制率均为100%；稀释倍数为1 000倍时，草铵膦对黑木耳和香菇菌丝依然表现完全的抑制作用，但对毛木耳菌丝的抑制作用最小，抑制率为14.51%±2.77%。

图1 2种除草剂对6种食用菌菌丝生长的影响

图2 8种杀菌剂对6种食用菌菌丝生长的影响

2.2 8种杀菌剂对食用菌菌丝生长的影响 8种杀菌剂对6种食用菌品种的菌丝生长具有不同的抑制作用。从(图2)中可以看出，三环唑、噻呋酰胺、四霉素和代森锰锌稀释至1 000倍时，依然完全抑制6种食用菌菌丝的生长；嘧菌酯稀释至1 000倍，对黑木耳和毛木耳的抑制率仍然是100%，对其他4种食用菌的抑制率也均在69%以上；噁霉灵对秀珍菇菌丝的抑制作用最强，稀释1 000倍仍然完全抑制，对平菇菌丝的抑制作用最小，稀释1 000倍抑制率为74.12%±1.66%；壬菌铜稀释至1 000倍时，对茶树菇菌丝的抑制率较小，抑制率为14.12%±1.66%，对另外5种食用菌菌丝的抑制率在50%以上；霜霉威盐酸盐是8种供试杀菌剂中对食用菌菌丝抑制作用最小的，随着稀释倍数的增大，对菌丝的抑制率明显降低，稀释至1 000倍时，对黑木耳和香菇菌丝无抑制作用。

2.3 9种杀虫剂对食用菌菌丝生长的影响 (图3)结果可以看出，杀虫剂对食用菌菌丝的抑制作用略低于除草剂和杀菌剂，但对不同食用菌品种的抑制作用差异较大。木耳类的黑木耳和毛木耳是对杀虫剂最敏感的品种，茚虫威、吡蚜酮、噻虫嗪和噻嗪酮均对其产生了较强的抑制作用，高效氯氟氰菊酯则表现出最低的抑制作用；侧耳类的平菇和秀珍菇对噻虫嗪表现出较高敏感性，高效氯氟氰菊酯和苦参碱对其菌丝的抑制作用较低，稀释100倍的抑制率均在50%以下；9种杀虫剂对香菇菌丝的抑制作用最高的是噻虫嗪，苦参碱、吡虫啉和噻嗪酮稀释1 000倍时对香菇菌丝无抑制作用；吡蚜酮对茶树菇菌丝的抑制作用最高，烯啶虫胺稀释1 000倍时对茶树菇菌丝无抑制作用。

图3 9种杀虫剂对6种食用菌菌丝生长的影响

3 结论与讨论

针对我国食用菌产业中出现的病虫害种类多而防治药剂登记少的问题，本试验选择了多种不同作用方式的除草剂、杀菌剂和杀虫剂开展了对常见食用菌品种菌丝生长的安全性评价。食用菌生产中除草剂的使用相对较少，主要用于出菇大棚周围环境的治理，减少病虫害以杂草为第二寄主越冬越夏。氯氟吡氧乙酸异辛酯属于有机杂环类选择性内吸传导型微毒除草剂[12]，草铵膦属于有机磷类灭生性低毒除草剂[13]，可用于防除禾本科草和阔叶草。两种除草剂对食用菌菌丝都有明显的抑制作用，应尽量避免将除草剂喷洒在菌袋上，尤其在黑木耳和香菇上避免使用草铵膦。

杀菌剂的防治对象主要为真菌和细菌类的微生物，而同属于真菌的食用菌极易受到杀菌剂的影响，因此在食用菌生产中杀菌剂的使用必须慎重。本试验选择的8种杀菌剂中，除三环唑为中等毒性外，其余杀菌剂均为低毒。三环唑、噻呋酰胺、四霉素和代森锰锌对食用菌菌丝生长的抑制作用最大，代森锰锌还对大球盖菇[14]和金针菇[15]菌丝有明显的抑制作用。霜霉威盐酸盐对于食用菌菌丝生长的抑制作用最小，是一种低毒的氨基甲酸脂类内吸性杀菌剂，具有保护和治疗作用[16]，对鞭毛菌亚门和半知菌亚门的真菌有较好防效[17]。

在杀虫剂的筛选中，对食用菌菌丝的药害相对较小，但对于不同食用菌品种的影响差异较大。本实验中噻虫嗪对6种食用菌菌丝均表现出了较高的抑制作用，而邱良妙等研究表明噻虫嗪对于双孢蘑菇菌丝的抑制作用较小[18]。同为烟碱类杀虫剂的吡虫啉则表现出较低的抑制作用，且对鸡腿菇菌丝的抑制作用也较低[19]。茚虫威对木耳类食用菌的菌丝抑制作用明显，赵晓娜等试验结果显示浓度降低到15mg/L时，对香菇和秀珍菇菌丝几乎无抑制作用[20]。拟除虫菊酯类杀虫剂是食用菌栽培中最为常用的一种杀虫剂，也是登记在食用菌上唯一一种杀虫剂的复配药剂之一[21]，本试验选择的高效氯氟氰菊酯对6种食用菌品种都表现出较低的抑制作用，且同类杀虫剂对茶树菇[22]、平菇[23]、鸡腿菇[24]、双孢蘑菇[25]等其他品种的抑制作用也较低。苦参碱作为9种杀虫剂中唯一的植物源杀虫剂，对食用菌品种的抑制作用较小。

同类农药的的长期大量使用，极易出现农残和抗药性的问题[26]，因此，除了规范栽培操作流程、改进设施设备和使用物理防控方法，从农药对食用菌菌丝生长和子实体形成的安全性、对病原菌和虫螨害的防治效果及产品使用后的残留量等方面综合考虑，尽快筛选并登记适宜在食用菌上使用的杀菌剂和杀虫剂，将在很大程度上降低病虫害对食用菌产业的影响，提高食用菌产品的安全。