复合益生菌对4～6 月龄犊牛生长性能、养分表观消化率和血液生化指标的影响

孟竞尧，李晓刚，叶均安，徐宁宁，杨金勇

（浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058）

复合益生菌制剂作为新型绿色微生态制剂，可以显著提高畜禽的生长性能和饲料利用效率[1]。近几年复合益生菌在反刍动物生产应用中的研究不断深入，尤其在犊牛上的应用逐渐成为研究热点。饲料中添加复合益生菌可以显著改善犊牛肠道内环境，促进机体消化吸收，提高犊牛的生长性能[2]。赵会利等[3]研究发现，饲喂复合益生菌可以显著提高犊牛血清中免疫球蛋白（IgM）含量，增强机体免疫功能[4]。也有一些研究表明，复合益生菌制剂对犊牛的生长性能和血液理化性质[1]、体尺指数[5]、血清指标[8]无显著影响。Alugongo 等[1]研究发现，添加复合益生菌对犊牛血液指标无显著影响。符运勤[5]研究表明，添加益生菌对犊牛的体高和胸围无显著影响，各组之间血液生化指标差异不明显。因此，复合益生菌制剂在犊牛上的研究有待深入。本试验旨在研究地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和米曲霉组成的复合益生菌对4～6 月龄断奶犊牛生长性能、营养物质表观消化率和血液生化指标的影响，为复合益生菌制剂在断奶犊牛上的应用提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料 复合益生菌为杭州利牧源科技有限公司产品，含有地衣芽孢杆菌（活菌数≥2.0×109CFU/g）、枯草芽孢杆菌（活菌数≥2.0×109CFU/g）和米曲霉（活菌数≥2.0×104CFU/g），水分≤10%。

1.2 试验设计 选取（4.0±0.5）月龄、体重（152.1±1.5）kg和胎次（2.0±0.86）的32 头健康断奶后犊牛，随机分成4 组，每组8 头牛。断奶犊牛饲喂颗粒料和燕麦草，日粮组成和营养成分见表1、表2。4 个处理组分别饲喂含有0、1、2、3g/kg（干物质计算）复合益生菌的颗粒化全混合日粮（PTMR）日粮，其中0 g/kg 组为对照组。预试期添加量减半。

表1 颗粒料日粮组成和营养成分（干物质基础）

表2 燕麦营养成分（干物质基础）

1.3 饲养管理 饲养试验于2019 年7 月24 日—2019 年9 月25 日在浙江省金华市光明牧业有限公司开展。预试期7 d，正试期56 d。犊牛集体围栏饲养，每栏8 头，围栏面积为4 m×5 m，自由采食和饮水（每头犊牛饲料供应量为PTMR 5 kg/d、燕麦草1.5 kg/d）。每日分别于06:00、13:00 和18:00 喂料3 次。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 体重体尺 分别于试验第0、20、40、60 天晨饲前称量体重。测定每日每只犊牛剩料，计算犊牛采食量，通过后期实验室分析处理计算干物质采食量（DMI），总干物质采食量=采食颗粒化日粮干物质+采食燕麦草干物质。统计每日犊牛腹泻头数，计算腹泻发生情况。测定体斜长、体高、胸围和管围，计算体躯指数、体长指数和胸围指数，计算公式：

耗料增重比=标准饲料重/增重体躯指数=[胸围（cm）/体斜长（cm）]×100%体长指数=[体斜长（cm）/体高（cm）]×100%胸围指数=[胸围（cm）/体高（cm）]×100%

1.4.2 营养成分测定 颗粒化日粮、燕麦草和粪样的干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）参考张丽英[6]的方法测定，中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）以及钙（Ca）、磷（P）按照Van Soest等[7]的方法测定。

1.4.3 营养物质表观消化率 试验开始后，每天记录犊牛粪便形态，对粪便进行评分（表 3）。在试验初期和末期分别连续3 d 通过直肠采粪法收集粪样，利用内源指示剂法测定营养物质表观消化率，以酸不溶灰分（AIA）为指示剂。

表3 粪便评分标准

1.4.4 血清生化指标 每组选取8 头牛，试验结束当天尾静脉采血5 mL，3 000 r/min 离心15 min，取血清-20℃冻存待测。通过全自动生化仪测定血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、白球比（A/G）、碱性磷酸酶（ALB）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（CHOL）、血液尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）等生化指标，试剂盒为中山标佳生物科技有限公司产品。

1.5 统计分析 试验数据用Excel 2013 初步整理，应用SPSS 26 软件Proc mixed 模型进行方差分析和Tukey多重比较，分析主体间效应，成对比较。P＜0.05 表示差异显著，P＜0.01 表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 复合益生菌对犊牛生长性能的影响 从表4 可以看出，3 g/kg 复合菌组4～6 月龄犊牛的日增重高于对照组和1 g/kg 复合菌组（P＜0.05），3 g/kg 复合菌组颗粒料采食量高于其余各组（P＜0.05），燕麦草和总干物质采食量在各组间无显著差异。3 g/kg 复合菌组的耗料增重比低于其余3 组（P＜0.01）。因此，添加3 g/kg 复合益生菌可以显著提高犊牛的平均日增重、颗粒料采食量，降低耗料增重比，提高饲料利用率。由图1、2 可见，颗粒料与燕麦草采食量在30～40 d 有所降低，可能是试验过程中进行了调群和大采样，导致牛群整体产生应激反应，降低了采食量。

图1 复合益生菌对4～6 月龄犊牛颗粒料采食量的影响

表4 复合益生菌对4～6 月龄犊牛平均日增重、采食量和耗料增重比的影响

图2 复合益生菌对4～6 月龄犊牛燕麦草采食量的影响

由表5 可知，犊牛体斜长、胸围和管围等指数均随着犊牛月龄增加而增大，增长规律基本一致（P＞0.05）。随着月龄逐渐增加，体躯、体长指数也逐渐增加，但组间差异不显著。

表5 复合益生菌对4～6 月龄犊牛体尺相关指标的影响

2.2 复合益生菌对犊牛的营养物质表观消化率的影响 由表6 可知，对照组CP、ADF 的表观消化率低于3 g/kg复合菌组（P＜0.05）。由图3 可知，试验第2 周以后对照组粪便评分均高于试验组（P＞0.05）。

图3 复合益生菌对4～6 月龄犊牛粪便评分的影响

表6 复合益生菌对4～6 月龄犊牛营养物质表观消化率的影响 %

2..3 复合益生菌对犊牛血液生化指标的影响 由表7 可知，3 g/kg 复合菌组的ALB 高于其他3 组（P＜0.05），其他血液指标在3 组间均无显著差异。

表7 复合益生菌对4～6 月龄犊牛血清生化指标的影响

3 讨论

3.1 复合益生菌对犊牛生长性能的影响 幼龄时期是畜禽生长过程重要的阶段，直接关系到成年牛的生长、生产性能。体重是犊牛生长性能的重要指标之一，日增重越大，耗料增重比越低，犊牛的生长性能越好。研究表明，在饲料中添加酵母和米曲霉（有效活菌数分别为2×109、1.9×109CFU/g）可以显著提高犊牛的平均日增重[2,4]。赵会利等[3]研究发现，在基础日粮中添加0.1%的纳豆芽孢杆菌（有效活菌数为140 CFU/ng）可以提高30 日龄犊牛的平均日增重。杨春涛[9]研究发现，在开食料中添加热带假丝酵母与桑叶黄酮（活菌含量为5×109CFU/g）可以显著提高42～80 日龄犊牛平均日增重（3.13%和8.38%）。本试验结果显示，添加3 g/kg 复合益生菌可显著提高犊牛的日增重，但1 g/kg 和2 g/kg 复合菌组日增重与对照组无显著差异，说明复合益生菌添加量在3 g/kg 时对犊牛日增重有显著提高作用。

牛对草料有天然的喜食性[10]。Kawas 等[11]研究发现，在初生公羔羊日粮中添加酵母和乳酸杆菌培养物（2×109CFU/g）可以提高日增重，降低耗料增重比，但对DMI 无显著影响。本试验中，在定量饲喂犊牛PTMR 和燕麦草的情况下，PTMR 中添加3 g/kg 复合菌时，犊牛采食量显著提高，耗料增重比显著降低，说明复合益生菌可以促进犊牛采食颗粒料，提高DMI，并提高饲料转化效率。

犊牛粪便评分以及腹泻率等是衡量其生长性能、发育状况的重要指标[12]。在犊牛早期（1～21 d）基础日粮中添加布拉氏酵母（活菌数为1.38×1010CFU/g）0、1、3、5 g/（d·头），发现添加3 g/（d·头）布拉氏酵母能显著降低犊牛腹泻率[13]。从粪便评分图来看，试验组犊牛的腹泻情况好于对照组，且3 g/kg 复合菌组犊牛腹泻率最低，这可能因为添加复合益生菌促进了肠胃益生菌群的建立，降低了营养性腹泻疾病的发生概率[8,14-15]。因此，4～6 月龄犊牛饲料中添加复合益生菌可以降低腹泻率，在一定程度上改善犊牛的健康状况。

3.2 复合益生菌对犊牛体尺的影响 体尺指标不仅反映犊牛的生长状况，还可以判断其遗传基因水平以及未来发育状况，且体尺指标与体重的变化趋势有一定的相似性[17-19]。有研究表明，饲喂地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌（活菌数均为2×1010CFU/g）组0～6 周龄犊牛的体尺指数与对照组无显著差异[5]。本试验结果表明，添加复合益生菌未对犊牛体尺产生显著影响，说明添加复合益生菌可能不会对体尺相关指标产生显著影响，因为本试验中饲喂犊牛的复合益生菌可能对促进骨骼发育并无显著作用，也可能受到环境状况和犊牛自身状况的影响。

3.3 复合益生菌对犊牛营养物质表观消化率的影响 研究发现，微生物制剂、复合益生菌类物质及其代谢产物能够降解难以被犊牛肠胃吸收利用的大分子营养物质，从而提高营养物质消化率[21]。杨朋飞等[2]、梁金逢等[23]研究发现，育成牛TMR 日粮中添加5 g/ 头甘露寡糖和50 g/头复合益生菌剂可以显著提高CP、EE、DM等消化率。苏勇华等[16]研究发现，多浪羊饲粮中添加3.2×109CFU/g 枯草芽孢杆菌可以显著提高DM、CP、NDF、ADF 表观消化率。本试验中，3 g/kg 复合菌4～6月龄犊牛对CP、ADF 的消化能力显著提高，1、2 g/kg复合菌组与对照组差异不显著，这可能是由于复合益生菌剂量较低，未对犊牛消化率产生显著影响的结果。与前人研究结果相比，本试验中各组DM 的表观消化率无显著差异，这可能是由于犊牛饲养环境、饲喂益生菌种类、饲料种类、饲喂方式等的差异造成的[24]。

3.4 复合益生菌对犊牛血液生化指标的影响 血液生化指标反映动物机体内部代谢水平和健康状况。犊牛在出生之前，母体胎盘的特殊结构导致母体中重要的免疫球蛋白无法进入犊牛血液循环系统，出生后犊牛消化代谢机能不完善，免疫能力极低，此时若有病原菌入侵，犊牛极易患病[25]。益生菌是一种很好的免疫激活剂，可以提高动物机体的免疫能力[26-27]。梁金逢等[23]研究表明，日粮中添加甘露寡糖和复合益生菌剂可以提高育成牛机体的体液免疫应答能力和抗氧化能力。血清TP 由ALB 和GLB 组成，GLB 可以增强机体免疫力，ALB可以维持血液胶体渗透压。正常范围内，TP 可以提高牦牛幼崽代谢水平，增强免疫力，保证良好发育状态[28]。本研究中，3 g/kg 复合菌剂组中ALB 含量显著高于对照组，但添加复合益生菌对其他血液指标无显著影响，说明添加复合益生菌可以在一定程度上提高动物机体免疫力，可以维持机体内环境稳定，对营养物质（蛋白质、脂肪和糖类）代谢无不良影响。

4 结论

本研究结果表明，添加复合益生菌可以提高4～6月龄犊牛的平均日增重、颗粒料采食量、营养物质表观消化率和饲料转化率，降低犊牛腹泻发生率，在一定程度上可提高犊牛免疫力。