时间:2024-05-30
刘晶 王大勇
摘要:本文是对兴安杜鹃的愈伤组织培养进行了初步研究。本实验选择MS基本分化培养基,经过数据的整理与分析找到适合兴安杜鹃生长的最佳培养基。结果表明:外植体消毒6分钟为最佳时间,最佳启动生长培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,接种苗生长正常,能产生分化。最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,形成部分愈伤组织。
关键词:兴安杜鹃;组织培养
中图分类号: S685.21 文献标识码: A DOI编号: 10.14025/j.cnki.jlny.2016.11.024
目前关于兴安杜鹃人工繁殖方面的研究报道较少,如果能成功的培育出大量的兴安杜鹃,将丰富国内园林植物的类型,解决纯正的优质杜鹃种苗在我国苗木市场上短缺的问题。
1研究地点
1.1 原料的取材地点和时间
4月中旬,对兴安杜鹃进行取材。选取4月份刚长出的生长良好、无病虫害、生长状况相近的嫩枝进行水培1~2周作为原材料。
1.2 进行组织培养工作的地点
在实验室里,按照一定的步骤和方法对兴安杜鹃进行组织培养。
2研究方法
在实验中采用的基本分化培养基为MS培养基,细胞分裂素选择6-BA,生长素选择NAA,首先准备1个不加任何植物激素的空白实验用以对照,再以不同浓度的6-BA和NAA分别配成5组浓度组合,每个组合再以不同的外植体消毒时间再分成3组,消毒4分钟、5分钟和6分钟的接种瓶数均为20瓶。接种完后放在培养室中培养,以7天为一个单位,每隔7天观察一次,查看并记录兴安杜鹃接种苗在培养基上的长势情况。最后通过数据的整理与分析比较,在15组培养基中,筛选出分化培养基中最佳植物激素浓度配比和最佳消毒时间。
2.1 数据的处理
观察外植体在不同消毒时间与植物激素不同浓度配比的培养基中的分化状态,其数据如下表:
由表1,2,3中记录的数据可以计算出分别消毒了4分钟,5分钟,6分钟的兴安杜鹃叶芽在不同植物激素浓度配比的培养基中的污染程度、分化程度、生长状态等情况。污染率=。
2.2兴安杜鹃的增殖培养
将培养出的兴安杜鹃无菌苗进行增殖培养,1~5组培养基分别为MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L。将无菌苗严格按照无菌操作接种到增殖培养基上,增殖情况见表4。
通过以7天为一个周期,共进行为期30天的观察,挑选出已染菌的接种苗,并及时对接种苗的生长状态、分化状态、是否褐化等状态进行详细的记录并拍照,归纳并整理数据,得出相应的结论并对得到的结论进行合理的分析。
3 主要结果
3.1 最佳植物激素的不同浓度配比
由表5中所记录的数据进行整理归纳与分析,并通过对接
种苗生长、分化状态的观察与对比分析,得到以下结果:长势最好的是MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L ;其次是MS+6-BA
1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,长势最不好的是MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA0.1mg/L 。
3.2结论
通过实验和对实验数据整理与分析,结果表明:外植体消毒6分钟,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L的为最佳培养基,接种苗生长正常,形成少量的愈伤组织;培养基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L的组合效果最差,接种苗几乎全部慢慢褐化死亡。
作者简介:刘晶,本科学历,乾安县森防站,工程师,研究方向:森林病虫害防治。
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