非洲猪瘟的研究进展

刘杉杉，孙伟，杨慧

（1.铜仁职业技术学院农学院贵州铜仁 554300；2.民族中兽药分离纯化技术国家地方联合工程研究中心贵州铜仁 554300）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起猪的一种急性、高度致死性的传染病[1,2]。ASF 最早于1921年发现于非洲地区的肯尼亚，之后在欧洲、拉美和亚洲等60 个国家均有发现[3]，给世界经济造成了严重的损失。该病于2018年8 月在我国辽宁沈阳报道了第一例之后，在其他多个省份陆续也有报道，严重危害我国的养猪业[4]。目前，尚未有防控ASF的有效疫苗，这对ASF 的防控提出了更加严峻的要求。本文将从ASF 病原学、流行病学、诊断与具体的防控措施等方面进行综述。

1 病原学

ASFV 是一种呈二十面体对称的囊膜病毒，其病毒粒子直径约为200nm，属于非洲猪瘟病毒科，非洲猪瘟病毒属[5]。ASFV基因组长度约为170～190kbp，双股线状DNA，共编码150～200 种蛋白质。ASFV主要在感染猪体内免疫细胞（单核细胞、巨噬细胞及网状内皮细胞）的细胞质中增殖，但细胞核也是病毒DNA 早期合成的位点之一[6,7]。ASFV 还可在某些软蜱体内复制。目前，ASFV 已适应在多种传代细胞系中生长增殖，包括PK15、Vero、BHK21等。

ASFV 结构复杂，其中抗原变异主要发生在结构蛋白P150、P14、P12 等；P72为主要衣壳蛋白，具有高度保守性，常将此蛋白作为血清学检测的抗原，另根据P72编码基因具有较高的同源性的特点，将ASFV 分为24 个与地域相关的基因型[8,9]；P54 主要作用于病毒的吸附、入侵、内化等，在病毒感染过程中发挥重要作用，可作为血清学抗体检测抗原。

ASFV 对pH 变化和干燥的抵抗力强，普通消毒药物对其无效，但可被乙醚、氯仿等脂溶剂以及次氯酸盐有效杀灭。在60℃经10min 或55℃经30min 的条件下，均可使病毒灭活。ASFV 对外界环境抵抗力强，室温条件下感染猪的排泄物、血清或血液中病毒可存活一年以上。冷冻保存的感染猪肉及其制品中，病毒可存活数月，在土壤中可存活3 个月。由于该病毒在猪体内、猪肉及其制品和环境中存在时间均较长，因此易于扩散传播，尤其是污染的圈舍、未熟的猪肉、腌肉、运输生猪的装备和车辆、生猪屠宰场、泔水等都可传染。

2 流行病学

ASF 不传染人，感染猪后病死率可达100%。ASFV 感染猪后，其临床症状和病理变化与经典猪瘟非常相似，极易将两种病混淆。主要表现为高热（猪体温一般高达40.5～42℃），皮肤发绀有出血点，甚至出现大量无症状死亡的猪只，其中脾脏异常肿大为其典型症状。猪是ASFV 自然感染的唯一家畜，野猪也易感，野猪感染后的临床症状和病理变化与家猪类似。钝缘蜱是ASFV 的自然宿主。被ASFV 污染的猪肉制品（如火腿、腌肉、风干肉等）、饲料、水源、运输车、餐食剩余垃圾等制成的泔水，发病猪，带毒猪等都是ASFV 的传染源。ASFV 可通过消化道和呼吸道进行传播。健康家猪通过与感染ASFV 的病猪或感染ASFV 的野猪直接接触，食用被ASFV 污染的食物，接触被ASFV 污染的空气等，均可被感染。

1921 年非洲地区东部的肯尼亚发现了第一例ASF 以来，ASF一直在撒哈拉以南的非洲中、南部国家流行，随后本病开始于1957 年传入葡萄牙等欧洲地区国家，20 世纪70 年代开始传入古巴、西班牙、意大利、马耳他岛、巴西和多美尼亚共和国等国家，给世界养猪业带来了毁灭性的打击。其中塞内加尔、喀麦隆、安哥拉、刚果等非洲国家和西班牙、法国、荷兰、意大利等欧洲国家以及巴西、古巴、海地等拉美国家是该疫病的常发国家。本世纪初，ASF 再次开始在世界上多个国家，例如德国、捷克、赞比亚、美国、俄罗斯联邦、乌干达等国家密集出现，使得ASF 的防控显得尤其严峻。2017 年传播至俄罗斯远东地区伊尔库茨克[10]。2018 年，全球ASF疫情明显重于往年，新增疫情国家数同比上升30%，疫情数同比增加10.7%，部分国家甚至呈现大暴发、大流行态势。2018 年8 月ASF 传入我国，首先于辽宁沈阳暴发，基因型测定结果为基因II型，与2017 年传入俄罗斯远东地区的基因型一致[11]。之后的几个月，席卷了大半个中国。截至2019 年7 月3 日，我国共发生ASF疫情143 起，116 万余头生猪被扑杀，其中25 个省（区、市）的疫区已经全部解除封锁。目前，世界上仅有13 个国家实现了ASF 的根除。对于我国而言，ASF 疫情虽然给我国养猪业带来了沉重打击，但是目前已经明显可控，养猪业的复养也在慢慢恢复。

3 诊断

ASF 的临床症状和病理变化与猪的许多其他出血性疾病，尤其是猪瘟病毒很难区分，死亡率一般为100%，且没有有效的疫苗对其进行防控，因此需要快速准确的检测方法对ASF 进行检测。ASF 病原学检测方法主要包括聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）、实时荧光定量PCR（real-time PCR）、红细胞吸附试验（hemadsorption，HAD）、荧光抗体试验（flurescent treponemal antibody absorption，FTA）、环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）等[12,13]。ASFV 的P72 基因比较保守，因此针对P72 基因建立了多种抗原检测方法，其中以普通PCR 和real-time PCR 方法居多，这也是临床上检测ASF 病原最常用的两种快速检测方法[14-16]。HAD 试验原理是感染ASFV 的巨噬细胞或单核细胞能够被猪的红细胞吸附，形成玫瑰花环样或桑葚状形态，这种方法比较耗时，且现研究发现部分毒株感染的巨噬细胞并不能被红细胞吸附。因此该方法也逐渐被淘汰，或者更多时候是作为检测ASF 的补充方法[17]。FTA 可以用于检测ASFV 可疑猪组织，或者HAD 阴性的巨噬细胞或单核细胞，敏感性和准确性均较高，对急性期感染的ASF 具有较好的检测效果，但需要专业的技术人员，对试验设备也有较高的要求，因此也只是作为ASF 检测的辅助手段之一。

血清学检测方法主要包括酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）和间接免疫荧光试验（indirect fluorescent antibody assay，IFA）等[12]。ELISA 方法最为常用，作为包被抗原的既有基于全病毒的包被物，也有基于P72 蛋白、P54蛋白等作为抗原包被物的阻断ELISA，目前也已经有很多商品化的试剂盒。通过检测感染猪体内的ASF 抗体水平，可以了解其感染情况，但如果是亚急性或慢性感染的猪体内ASF 抗体不易检出[18]。同样，虽然IFA 具有更高的准确性和敏感性，但涉及到专业的技术人员和较高的设备要求，往往仅限于实验室使用。

4 防控

目前，全世界尚未有有效的药物和疫苗可以防控ASF 的感染[19]。对于尚无该疫情的地区，要加强防控，建立ASF 监测体系，完善ASF 净化措施，将ASF 疫情隔离在外。一旦发现ASF 疫情，要尽快隔离病猪，扑杀患病猪群，销毁死亡猪只，对运输猪只的来往车辆、接触病猪的相关人员以及圈舍都要进行严格的消毒处理，对废弃物及时采取无害化处理措施；同时，对患病区周围的猪群尽快采用血清学等方法进行疫情监测。

对于规模化猪场，要建立三道屏障[20]。第一道屏障为物理性屏障，即建立围挡。在猪场周围架设铁网和篱笆等，将猪舍与外界进行隔离。围挡高度要大于1.5m，无常开式出入门，能够有效阻挡啮齿类动物进入，并严禁一切猪源产品和猪肉制品的进入。同时应当保证有专人巡察围挡的有效性，做到至少一周一次。第二道屏障为生物安全屏障。对于养猪场的负责人，要主动认识到建立生物安全隔离区的重要性，能够保证区域屏障的形成。禁止一切外源猪、猪源制品、泔水、猪肉产品等进入养殖场；对引进仔猪和授精精液进行检测，确保无ASFV 携带；对猪场周围的隔离带可采取喷洒消毒液、烧荒等措施；猪场实行严格的消毒制度，不仅要对猪场内所有可能被污染的区域，而且要尤其注意进入猪场的车辆、人员要严格消毒，人员要严格执行隔离期制度，在隔离期内禁止与生猪产品接触；猪场内禁养一切宠物，包括犬、猫、鸟等，保证卫生，做好灭鼠杀虫等工作；对猪场内的病死猪、粪便等及时销毁焚烧，做好无害化处理；猪场负责人要以身作则，带头执行，严格执行生物安全措施。第三道屏障为意识屏障。养殖场要紧绷生物安全神经，尤其是对出入的人员、车辆和进出的食品等做好消毒工作，建立严格的管理制度，流动车辆要注意做到先清洗后消毒，不能单纯只进行消毒而忽略清洗；车辆驾驶人员、流动人员进入场区要执行严格的消毒制度；消毒液的配置、使用和管理等以及消毒的环节均要设置专人负责，尤其确保消毒液配置的准确性，并做到消毒无遗漏。

对于养殖户，要执行严格的饲养管理制度和生物安全措施。在调运生猪及其产品前要向有关检疫部门申报、备案，严禁从发生疫情的省份地区调运生猪、仔猪和引种等；新引进猪要保证全进全出，隔离饲养，避免接触野猪；严禁饲喂猪源饲料制品和泔水等；对猪场进出的人员和车辆实行严格的消毒制度，猪场无关人员和无关车辆严禁进入；一旦发现ASF 可疑病例，立即隔离可疑猪群，限制可疑猪群的移动，并及时通知上报兽医相关部门，对猪场各个环节进行消毒，积极配合做好猪群的移动监管等工作。

5 小结

ASF 一直是我国重点防范的外来疫病，其病原结构和流行病学复杂，目前尚无有效的疫苗和治疗方法，因此对该病的防控就显得尤为重要。ASF 已经传入我国，且目前正在流行，要求不仅要对已经发生的疫情进行控制，而且需要加强宣传，提高民众的防控意识，各级部门、养殖人员和普通民众等各司其职，制定和严格执行ASF 的综合防控策略。