赛鸽感染新城疫的诊断及抗体水平检测*

李婷婷，刘华栋，陆冰洋，唐娟，王彩先，丁树荣，詹丽娥

（山西省农业科学院畜牧兽医研究所 太原 030032）

鸽新城疫又称鸽I型副粘病毒病或鸽瘟，是由鸽I型副粘病毒（Pigeon Paramyxovirus 1，PPMV-I）引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。鸽新城疫与鸡新城疫的病原和临床症状十分相似，PPMV-I传播迅速，主要通过呼吸道和消化道传播，一年四季均可发生，不同年龄、品种的鸽都易感，发病率100%，死亡率80%以上。主要临床表现为胃肠道出血、严重腹泻和神经症状。鸽群一旦感染PPMV-I后，其神经症状将严重影响赛鸽的飞行功能，使赛鸽失去比赛的资格。鸽新城疫对养鸽业造成巨大威胁和损失，是养鸽业重点防控的传染病之一。

2018年7月下旬，山西省忻州市某赛鸽公棚从一养殖户处收340羽赛鸽，其中部分赛鸽陆续出现精神不振、采食量减少、饮水量增加、拉黄绿色水样稀粪、扭颈、斜翅等症状，5d开始出现死亡，养殖户紧急前来就诊。为了及时查明该病发生的原因，减少对养殖户的损失，经过流行病学、临床症状、病理剖检、PCR鉴定和抗体检测等综合诊断，确诊为感染鸽新城疫。

1 发病情况

发病初期病鸽精神不振、羽毛蓬乱无光泽、食欲减退、饮水增加，部分病鸽呼噜、咳嗽、呼吸困难，排黄绿色水样稀便。后期个别鸽呈现神经症状，头颈向背后扭曲、不能站立、双翅下垂。

表1 鸽新城疫抗体效价统计表

剖检病变主要集中在消化道，腺胃乳头肿胀、出血，腺胃与肌胃交界处出血；十二指肠黏膜出血、水肿，盲肠扁桃体肿大、出血。呼吸道有卡他性炎症，喉头、气管中有浆液性或卡他性渗出物，气管出血。

2 实验室诊断

2.1 抗体检测

鸽群中随机采集21份血液进行抗体检测，按照《新城疫诊断技术》(GB/T16550—2008)规定方法进行血凝抑制试验（HI），检测待检赛鸽血清的新城疫抗体效价。HI抗体效价≥5log2时免疫效果良好，判定为合格。检测结果由表1可知，该赛鸽公棚的新城疫抗体效价水平低且离散度大，21份被检样品中仅有11份样品HI抗体效价≥5log2，免疫合格率仅为52.4%。

2.2 RT-PCR鉴定

根据该赛鸽公棚鸽群疫病流行特征，结合发病情况、剖检病变及血清抗体检测结果，采集病死鸽的肺脏、脾脏组织，使用购自北京世纪元亨生物技术有限公司的“新城疫病毒通用型RT-PCR检测试剂盒”检测PPMV-I。

2.2.1 病毒RNA的提取 取肺脏、脾脏组织各1g，剪碎混匀后取0.05g混合物，加入1.5mL生理盐水进行研磨。8,000rpm离心2min后，取上清液100μL于新的离心管中，按照试剂盒使用说明书，经过裂解、吸附、洗涤、洗脱后得到模板RNA备用。

2.2.2 RT-PCR扩增及电泳 取无菌的PCR反应管，根据反应配置体系，分别加入RT-PCR反应液、酶混合液和模板RNA，混合均匀成20μL体系，置于荧光PCR仪中。PCR扩增程序为：42℃ 45min，94℃ 3min；循环94℃ 30s，55℃30s，72℃ 30s，共35次；最后72℃延伸7min。PCR扩增产物在110V电压下使用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测，结果见图1。

由图1可见，阳性对照出现362bp扩增带。被检测样品1与阳性对照一致，在362bp出现扩增带，可判定为鸽I型副粘病毒阳性。

3 结果与诊断

通过PCR鉴定，结合临床症状、病理剖检变化和抗体水平检测得出，该赛鸽公棚感染鸽新城疫。

4 防治措施

4.1 赛鸽公棚采取的紧急措施

针对试验结果，迅速将发病鸽群进行隔离饲养，淘汰出现神经症状的重病鸽，无害化处理所有病死鸽、淘汰鸽及其粪便和饲料。并应用1/100浓度的百毒杀和1/25浓度的碘伏两种消毒剂，每天轮流对养殖环境和养殖工具进行全面彻底的喷洒消毒，用以杀灭细菌，抑制病毒增殖，防治疫情扩散和蔓延。待病情控制后，改为1周消毒1次。

同时，全棚赛鸽紧急接种新城疫克隆C30株疫苗2倍剂量点眼。发病鸽群饲料中添加丁胺卡那霉素，饮水中交替添加黄芪多糖及电解多维，以提高鸽群免疫力，预防继发感染，使用至疫情得到控制为止。

经过该方案治疗5d后，鸽群没有再出现死亡现象，临床症状较轻的赛鸽症状也逐渐减轻。11d后全群采食正常，精神状态良好，疫情得到控制，鸽群基本痊愈。

4.2 平日预防工作

赛鸽公棚要做好平时卫生防疫工作。定期对鸽舍、饲养场地和饲养用具开展消毒。新收赛鸽应作好检疫工作，并隔离观察2周以上。饲养人员进出鸽场必须严格消毒，饲料和饮水也应定期检测。

建立合理的免疫程序和免疫监测制度。选择正确的疫苗，并定期检测鸽群的新城疫抗体水平，对于抗体水平较低或者抗体水平参差不齐的情况要及时补种。

5 讨论

随着我国养鸽业不断扩展，鸽I型副粘病毒病在全国多地都有流行发生，肉鸽、信鸽和赛鸽等各类鸽子均可感染发病，不同年龄的鸽都有感染性，而乳鸽的易感性最高，其发病率和死亡率都很高。新城疫在世界上曾有过四次大流行，其中第三次大流行始于20世纪70年代末的中东地区，后迅速传播到欧洲并造成20世纪80年代初的大流行，主要为嗜神经型，而这次流行正是由种鸽传播引起的。鸽Ⅰ型副粘病毒被认为是经典新城疫病毒的变异株，最近几年，该病毒在全世界范围内很多国家分离到，说明自从20世纪80年代以来该病毒已经在全世界范围内长期存在和流行[1]。因此，鸽Ⅰ型副粘病毒的流行对养鸽业甚至养禽业都有巨大的威胁和损失，成为危害禽类的一种最主要的疾病。

赛鸽公棚的养殖模式与种鸽或肉鸽场不同，每年春季或秋季会从不同养殖户收购幼鸽，集中饲养、训练后参加秋季或春季的比赛。多数赛鸽养殖户养殖的种鸽或幼鸽免疫工作不到位，抗体水平参差不齐，造成鸽新城疫潜伏感染严重。本试验中该赛鸽公棚不关注免疫效果，在收购幼鸽后用LaSota灭活疫苗免疫鸽群后未检测抗体效价，从而造成免疫失败，未能起到有效的保护作用。因此，赛鸽公棚需严格执行合理的免疫程序和免疫监测制度，定期检测鸽群的新城疫抗体水平。

图1 新城疫RT-PCR检测结果

目前，鸽新城疫的防治主要依靠免疫接种疫苗，但是在实际应用中，大量养殖户用鸡新城疫疫苗免疫鸽群。虽然，鸽副粘病毒病和鸡新城疫病毒存在着很高的交叉反应，但是有研究表明，现有的鸡新城疫疫苗株并不能有效的保护鸽群免受PPMV-I的感染。因此，实际应用中亟待研发专用的鸽新城疫疫苗，有效防治鸽新城疫感染。■