饲料中添加氯化胆碱对大口黑鲈生长、饲料利用及形体指标的影响

时间：2024-06-19

周良星钟雷袁俊光陈宇航曹双俊刘建高江坤生

[1 新希望六和股份有限公司,四川成都 610063; 2 广东德宁水产科技有限公司,广东佛山 528300; 3 广东省水产高效健康养殖(德宁)工程技术研究中心,广东佛山 528300; 4 华南农业大学,广东广州 510642]

胆碱是水产动物生长必需的一种物质,其分子式为(CH3)3N(CH2)2OH。在饲料中,常用的胆碱添加形式是以玉米芯粉为载体的氯化胆碱粉剂,通常氯化胆碱含量(质量分数)为50%或60%。胆碱的生理功能主要包括:作为磷脂的组成成分,参与构成和维持细胞结构;作为副交感神经递质——乙酰胆碱的合成前体,参与机体神经传递活动;作为肝脏脂肪代谢必需物质,促进肝脏脂肪以脂蛋白的形式转运,防止脂肪在肝脏过度积聚,具有预防脂肪肝的重要生理功能;提供甲基,合成激素、蛋氨酸、核酸、肉碱等物质,参与机体代谢活动[1]。水产动物自身合成的胆碱有限,远远不能满足其生长的需求,而且会受到饲料中蛋氨酸、甜菜碱等甲基供体的影响,因此在实际生产中必须通过外源进行补充[2-3]。饲料中胆碱不足会导致水产动物的生长性能及其对饲料的利用效率下降,并伴随器官病变退化等症状,这在黄鳝[4]、草鱼[5]、斑点叉尾鱼回[6]、罗非鱼[7]等品种中已有相关发现。

近年来,由于商业配合饲料的全面使用,我国大口黑鲈(Micropterussalmoides)的养殖产量逐年攀升,在2020年已达61.9万t[8]。但大口黑鲈在饲喂配合饲料的过程中易患糖脂代谢综合征,具体表现为生长性能下降,饲料利用率下降,肝脏肿大,肝纤维化、坏死[9]。有研究表明,适量添加氯化胆碱可改善罗非鱼[10]、龙胆石斑[11]、军曹鱼[12]等鱼类的脂质代谢并提高其生长性能。目前,有关大口黑鲈配合饲料中胆碱添加水平的报道较少,且大多限于幼鱼阶段。为此,本研究以大口黑鲈成鱼为研究对象,探讨不同氯化胆碱添加量对大口黑鲈(体质量在40～160 g)生长性能、饲料利用率及形体指标的影响,以期为大口黑鲈饲料的配制提供依据。

1 材料和方法

1.1 试验设计与饲料

以秘鲁超级鱼粉、鸡肉粉、去皮豆粕、棉籽蛋白为蛋白源,罗非鱼油和大豆油为脂肪源,木薯淀粉为淀粉源,外源添加苏氨酸、DL-蛋氨酸、L-赖氨酸盐酸盐,配制基础饲料(原料全部购自广州希望饲料有限公司)。在基础饲料中分别添加0(对照组)、3 000、6 000 mg/kg的氯化胆碱(纯度50%,广州希望饲料有限公司)制成3组膨化饲料,具体饲料配方见表1。

表1 试验饲料配方及营养组成(干物质) 单位:%

所有饲料原料经粉碎后过80目筛(筛网孔径0.180 mm),充分混合均匀,经饲料膨化机用孔径3.0 mm模板制成膨化饲料,于95 ℃条件下烘干后,置于-18 ℃冰箱储藏备用。

1.2 试验鱼及养殖管理

试验在广东德宁水生生物研究中心杏坛养殖基地进行。试验用大口黑鲈购自养殖基地附近的苗种场,购买后在5.0 m×5.0 m×1.8 m(长×宽×高)的池塘网箱中暂养2周。养殖水源来自附近东海河,经处理后水中氨氮含量低于0.2 mg/L,亚硝酸盐含量低于0.1 mg/L,溶解氧高于5.0 mg/L,pH为7.5～8.3。暂养期间,每日于7:00和17:00各投喂1次对照组饲料(见表1),表观饱食投喂,待试验鱼适应养殖环境。

正式试验开始前,对试验鱼进行24 h饥饿处理,之后挑选健康活泼、规格均匀的大口黑鲈1 500尾,经称量,其初始体质量为(44.87±0.15)g,将试验鱼随机分成3组,每组设5个重复,每个重复100尾鱼。试验网箱的规格为2.0 m×2.0 m×1.8 m(长×宽×高)。

正式试验期间,根据表1的饲料配方,每日于7:00和17:30各投喂1次饲料(表观饱食投喂)。光照为自然光源,水温为28.6～32.4 ℃,水体氨氮含量为0.05～0.20 mg/L,亚硝酸盐含量为0.05～0.10 mg/L,溶解氧为4.54～8.41 mg/L,pH为8.0～8.4。观察并记录大口黑鲈摄食、健康及死亡情况,试验周期为60 d。

1.3 样品采集

试验结束后,对试验鱼进行停饲24 h处理,然后对全部网箱进行称重计数。每个网箱随机抽取3尾鱼,测定鱼的体长、体质量,将鱼解剖后取出其内脏团,称取内脏和肝脏质量,用于计算脏体比和肝体比,对分离的肝脏拍照并统计肝脏发白(白肝)的比例。

1.4 测定指标及方法

采用以下公式计算成活率(RS,%)、日摄食率(RDF,%/d)、增重率(RWG,%)、特定生长率(RSG,%/d)、饲料系数(CF)、肥满度(K,g/cm3)、脏体比(IV,%)、肝体比(IL,%)、白肝比例(RW,%)等指标。

RS=100×Nt/N0

(1)

RDF=Wd/(Wt+W0)×2/t×100

(2)

RWG=(Wt-W0)/W0×100

(3)

RSG=(lnWt-lnW0)/t×100

(4)

CF=Wd/(Wt-W0)

(5)

K=100×Wt/Lt3

(6)

IV=Wv/Wt×100

(7)

IL=WL/Wt×100

(8)

RW=NW/N×100

(9)

式(1)～(9)中,N0和Nt分别为试验鱼开始和结束时的数量,Wt和W0分别为试验终末和初始时鱼的平均体质量(g),t为试验时长(d),Wd为总投饲量(g),Lt为试验鱼的终末体长(cm),WL为试验鱼肝脏质量(g),WV为试验鱼内脏质量(g),NW为解剖发现有白肝的数量,N为解剖的肝数量。

1.5 数据分析

试验数据用(平均值±标准差)表示,采用SPSS 18.0软件对数据进行单因素方差分析(one-way ANOVA),若差异显著,采用Duncan’s多重比较法分析试验结果的差异显著性,设P<0.05为差异显著。

2 结果

由表2可见,各试验组间日摄食率和成活率均无显著差异(P>0.05),日摄食率随着氯化胆碱添加量的增加有下降趋势。在生长性能方面,随着氯化胆碱添加量的增加,大口黑鲈终末体质量、增重率和特定生长率升高,其中3 000 mg/kg组和6 000 mg/kg组的增重率和特定生长率与对照组相比均显著提高(P<0.05),6 000 mg/kg组的增重率和特定生长率较3 000 mg/kg组有所提高,但组间无显著差异(P>0.05)。在饲料利用方面,随着氯化胆碱添加量的增加,大口黑鲈的饲料系数有下降的趋势,但组间没有显著性差异(P>0.05)。

表2 氯化胆碱不同添加水平对大口黑鲈生长、饲料利用效率的影响

从表3可见,随着氯化胆碱添加量的增加,大口黑鲈的脏体比、肝体比和肥满度有下降趋势,但均无显著性差异(P>0.05),而3 000 mg/kg和6 000 mg/kg两个试验组之间也没有显著差异(P>0.05)。与对照组相比,两个氯化胆碱添加组的白肝比例均有所下降,但组间无明显差异(P>0.05)。

表3 氯化胆碱不同添加水平对大口黑鲈形体指标和肝脏颜色的影响

3 讨论

胆碱能够促进水产动物的生长,其主要机理被认为是胆碱在水产动物肝脏胆碱脱氢酶的作用下释放出活性甲基,参与机体的合成代谢[13]。在本研究中,对照组大口黑鲈的增重率和特定生长率均为最低,随着饲料中氯化胆碱添加量的增加,试验组大口黑鲈的增重率和特定生长率也随之提高,饲料系数随之降低,表明胆碱具有促进大口黑鲈生长的作用。这在对其他鱼类的研究中有相似的发现。例如,杨代勤等[4]发现,随着饲料中胆碱添加量的增加,黄鳝的增重率增加,饲料系数下降,并且在氯化胆碱添加量达0.8%时有显著差异(P<0.05);王广军等[14]的研究表明,在军曹鱼饲料中添加3 000 mg/kg的胆碱对于降低饲料系数、提高增重率和成活率效果显著(P<0.05);Jiang等[15]发现,团头鲂的增重率随着胆碱添加量的增加而显著提高(P<0.05)。本研究中,大口黑鲈的饲料配方中是以胆碱含量较高的鱼粉、鸡肉粉等作为主要蛋白源的。有研究表明,鱼粉、鸡肉粉中的胆碱含量分别高达2 953 mg/kg[16]、5 980 mg/kg[17],但因胆碱在饲料原料中为结合态的有机碱,其生物学效价只有87.42%[16]。这说明饲料原料中的胆碱不能完全被鱼类利用,天然胆碱的生物利用率值得被关注;同时,加工工艺也会导致饲料原料中胆碱含量的较大差异[15]。因此,配制饲料时,在计算饲料原料中胆碱含量的同时也应考虑原料中胆碱的生物学效价。

周越等[18]对大口黑鲈的研究表明,饲料中添加氯化胆碱(2 100 mg/kg)可显著提高大口黑鲈(体质量为20.14～93.71 g)的增重率和特定生长率(P<0.05)。本研究中,添加氯化胆碱(6 000 mg/kg)组大口黑鲈的生长表现和饲料利用率均为最优,但与周越等[18]研究中氯化胆碱的适宜添加量有所差异,分析其原因,可能是饲料营养组成的差异造成的。本研究中试验饲料的粗脂肪含量接近于商业饲料的粗脂肪含量(12.81%～13.55%),高于相关研究(9.81%～10.02%)[18],因此对于胆碱的需求也相应会增加。有研究表明,增加高脂饲料的胆碱能够明显提升武昌鱼的生长性能,而低脂饲料的提升效果则不明显[19]。此外,同一种鱼类在不同生长阶段,其自身的生长及代谢、合成能力等会有差异,从而导致对胆碱的需求量不同[13]。研究表明,罗非鱼幼鱼期(56.63～231.21 g)的最适胆碱需求量为625.42 mg/kg[20],而在成鱼期(220.25～512.87 g)的最适胆碱需求量为506.43 mg/kg[21]。因此,不同规格的大口黑鲈,其最适胆碱需求量亦有差异。

大口黑鲈在养殖过程中易出现因糖脂代谢障碍诱发的疾病,表现为肝脏发白(白肝)、代偿性肿大、肝体指数增加等[22-23]。胆碱可通过调节糖异生、糖氧化代谢、脂肪转运等途径改善动物的糖脂代谢[24-25]。相关研究表明,在饲料中添加适量的胆碱后,石斑鱼[26]、草鱼[27]、异育银鲫[28]的肝体比和脏体比下降,脂质代谢得到改善。本试验结果表明,在饲料中添加胆碱,大口黑鲈的白肝比例和肝体比均有一定的下降,这证实了在饲料中添加胆碱可改善大口黑鲈的糖脂代谢,并在一定程度上改善大口黑鲈肝脏的表观健康状况。