针刺及人参煎剂对疲劳模型大鼠抗疲劳作用实验研究

时间：2024-06-19

马斯，陈以国

(辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110032)

马斯，陈以国

(辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110032)

目的：研究针刺及人参煎剂的抗疲劳作用，为针药并用的治疗效果提供理论基础和实验依据。方法：将大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、中药组及针药组5组，每组10只，建立大鼠疲劳模型，分别给予相应药物或针刺处理，观察比较各组大鼠血中乳酸(BLA)、乳酸脱氢酶(LDH)、肝糖原(LG)、肌糖原、血尿素氮(BUN)及ATP等各指标情况。结果：与模型组比较，针药、针刺、药物组大鼠血中BLA、BUN含量显著降低，差异具有统计学意义(P<0.01)；LDH活力明显升高，LG、ATP含量显著增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：针刺及人参煎剂均具有抗疲劳作用，且针药结合使用抗疲劳作用最强。

针药结合；电针；人参皂苷；抗疲劳作用

疲劳是一种主观不适的感觉，为机体长期过度劳累，体力及脑力劳动强度达到一定程度所产生的生理现象，可导致机体运动能力下降、工作效率降低、差错率升高等[1]。若疲劳症状得不到及时缓解，日积月累便会导致“过劳”情况的发生，最终导致慢性疲劳综合征。疲劳产生的原因包括能源物质缺乏，如肌糖原、肝糖原、ATP过度消耗；乳酸、丙酮酸等致疲劳物质积累；大脑保护性运动抑制作用，使机体运动能力下降，产生疲劳感，从而保护机体因过度运动而造成身体伤害[2]。为此，笔者采用血清乳酸及乳酸脱氢酶活性、血清尿素氮、肝(肌)糖原、ATP含等作为考察指标，研究针刺和人参煎剂的抗疲劳作用，现报道如下。

1 材料与试剂

1.1 动物

清洁级Wistar大鼠，室温(27.0±2.0)℃，采用紫外线定期消毒空气，垫料高压灭菌。动物自由饮水和摄食，饮冷开水，食用每日新鲜蒸热的标准混合饲料。

1.2 试剂及仪器

乳酸试剂盒、乳酸脱氢酶、血清尿素氮试剂、肝(肌)糖原试剂盒、ATP酶试剂盒。

HH-2型数显恒温水浴锅、V-1200紫外可见分光光度计、C4-12离心机、游泳缸(110cm×60cm×70cm)、温度计、秒表及电子称等。

2 方法

2.1 动物分组及疲劳模型建立

将40只清洁级Wistar大鼠适应性喂养3天后随机分为5组，即空白组、模型组、针刺组、中药组及针药组，每组8只。除空白组外，其余各组大鼠分别置于(21.0±2.0)℃游泳箱中游泳，水深40cm，每次于大鼠力竭即其头部完全没入水中10s不露出水面时将其捞起，捞起后将其腹部朝上而不能自行翻转，可见大鼠呼吸深快、反应迟钝，头朝上握持时双下肢及尾部自然下垂。用布擦拭，风筒吹干，每日1次，连续15天，造模期间饮食减半，饮水正常。

2.2 处理方法

造模5天后，针刺组、中药组及针药组大鼠同时施加处理因素，以10天为1个疗程。针刺组大鼠选取疲劳相关背腧穴及心俞、脾俞、肾俞，选用日本“KB短针”(0.12mm×7mm)，顺经30°角斜刺，刺入皮下2mm，接6805-A型电针仪，施以疏密波，频率为2Hz，强度以大鼠背部微微颤动为宜，留针20min，每日1次，连续10次。以上穴位选取参照全国针灸学会实验针灸研究会制定的《实验动物针灸穴位图谱》取穴。按照人与鼠的剂量换算方法，每只大鼠人参煎剂的灌胃剂量为0.15mL/天，每日1次，连续进行10次。针药组大鼠同时施加以上两种处理因素，药物组大鼠仅灌胃人参煎液，模型组、空白组大鼠可灌胃等量生理盐水或捆绑固定以保持外界因素一致。

2.3 生化指标测定

将四组大鼠置于(21.0±2.0)℃游泳箱中不负重游泳1h，休息30min后，腹静脉采血，离心，抽取血清备用；同时立即摘取肝脏，采用生理盐水漂洗，滤纸拭干备用。采用相应的试剂盒检测肝糖原、肌糖原、血乳酸、乳酸脱氢酶、血尿素氮及ATP含量。

2.4 统计学方法

3 结果

3.1 针刺及人参煎剂对各组大鼠肝(肌)糖原、ATP含量影响

与空白组比较，模型组大鼠运动后肝糖原、肌糖原及ATP含量均明显下降，差异具有统计学意义(P<0.01)，说明大鼠运动后糖原及ATP均有不同程度的消耗。与模型组比较，中药组、针刺组及针药组大鼠肝糖原、肌糖原及ATP含量均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。说明针刺及人参煎剂灌胃均可通过提高大鼠糖原及ATP含量而达到抗疲劳作用，且针药组改善疲劳作用最明显。见表1。

表1 各组大鼠肝糖原、肌糖原、ATP含量比较 ±s)

注：与空白组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P<0.01；与针药组比较，△P<0.01。

3.2 针刺及人参煎剂对各组大鼠血尿素氮、血乳酸及乳酸脱氢酶的影响

与空白组比较，模型组大鼠运动后血尿素氮及乳酸含量明显升高，乳酸脱氢酶活性明显降低，差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较，针刺组、中药组和针药组大鼠BUN及BLA含量降低显著，而LDH活性明显升高，其中针刺组、针药组大鼠血乳酸及尿素氮含量较模型组下降更为明显(P<0.01)。针药组大鼠血乳酸含量与空白组比较差异不具有统计学意义(P>0.05)，针刺组、中药组及针药组大鼠乳酸脱氢酶含量均显著高于模型组，差异具有统计学意义(P<0.01)，表明针刺及人参煎剂均可提高机体对乳酸的清除能力。见表2。

组别例数(n)BUN(nmol·L-1)LDH(U·mL-1)IL-BLA(mmol·L-1)空白组823.39±2.753.95±370.103.03±0.73模型组838.09±2.70*1.42±583.55*5.51±1.04*中药组831.14±2.25*#△2.54±268.16*#△4.40±1.09*#△针刺组830.92±1.78*#△2.66±389.22*#△4.21±0.95*#△针药组826.93±3.48*#3.10±478.70*#3.18±0.42*#

注：与空白组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P<0.01；与针药组比较，△P<0.01。

4 讨论

本研究结果表明，与模型组比较，针刺组、中药组及针药组大鼠血乳酸、血尿素氮及ATP含量均明显降低，乳酸脱氢酶及肝糖原、肌糖原含量明显升高，表明针刺和人参煎剂均具有一定的抗疲劳作用。糖原作为重要的运动能量来源，以肝糖原和肌糖原的形式储存在人体内，糖原储备量对机体的耐力和运动能力具有直接影响。当机体高强度运动2h后，组织中肌糖原含量急剧下降，疲劳感几乎与肌糖原消耗殆尽同时出现。因此，糖原存储越多，机体运动能力及耐受力越强[3]，越不容易产生疲劳。当机体持久或剧烈运动时，肌糖原被大量消耗，为保证运动消耗能量的供给，此时血糖转化为肌糖原，为维持体内血糖浓度平衡，肝糖原被大量分解入血转化为血糖[4]。随着糖原等能量物质逐渐衰减，机体开始分解脂肪及蛋白质以保证能量供给，蛋白质分解产能所形成的产物即为BUN。在运动过程中，ATP在磷酸肌酸的作用下合成并释放能量，以供肌肉做收缩运动，其是肌肉中存储的除糖原、蛋白质及脂肪外的又一种能源物质[5]。

本实验结果表明，针刺背腧穴及灌胃人参煎剂均可增加运动后大鼠糖原及ATP含量，促进能源物质合成及存储，为机体提供所需能量而发挥抗疲劳作用，同时可通过降低血尿素氮含量而增强机体对运动负荷的耐受性。在剧烈运动过程中，糖酵解速度过快而使乳酸代谢产物堆积是造成疲劳的因素之一。LDH是一种糖酵解酶，存在于组织细胞质中，其可催化乳酸脱氢，对乳酸起到清除作用，因此LDH活性的高低对疲劳的消除也起到关键作用[6]。实验结果显示，与模型组比较，其余三组大鼠乳酸含量均明显下降，且乳酸脱氢酶含量明显升高，说明针刺背腧穴及人参煎剂可能是通过增强LDH活性、消除肌组织中多余的乳酸且减少BLA生成而发挥抗疲劳作用的。

祖国医学认为疲劳与五脏关系密切，尤以心、脾、肾为甚。《素问·疹论》曰：“心主身之血脉”，心之阳气旺盛、阴血充盈，使脏腑肌肉、四肢百骸得到气血的充分濡养而不产生疾病，且心主神志的功能得到心血的滋养而正常发挥主宰脏腑组织各项功能的作用，此时机体表现为精力充沛、思维清晰、反应灵敏、饮食睡眠正常、七情调和等。脾为后天之本，主运化水谷精微，是精、气、血、津液化生来源，脾气旺盛则精神充沛、肢体强壮有力。《素问·本神》曰：“脾气虚则四肢不用”，脾气亏虚则气血生化不足，四肢得不到气血滋养而痿废不用。肾具有封藏精气的功能，主司人体生长发育与生殖。《灵枢·海论》曰：“髓海不足，则脑转耳鸣，胫酸眩冒，目无所见，懈怠安卧。” 肾藏精，主骨生髓，髓海不足，则眩晕、耳鸣、行走无力、视物昏花、倦怠嗜卧。背俞穴是五脏之气直接输注于背腰部的腧穴，与脏腑病理生理息息相关，针刺之可调节脏腑功能，调畅脏腑气机，使因疲劳所致的脏腑气机紊乱、气血运行失调及阴阳失衡恢复正常，机体得到气血濡养而疲劳得解。因此，笔者选取与心、脾、肾三脏相对应的背腧穴进行针刺。人参的抗疲劳作用已被公认，其能提高糖原利用度、增加组织对葡萄糖的摄取、防止乳酸堆积、增强机体对氧气的摄取并减缓耗氧速度，显著提高机体的缺氧耐受力[7]。其还可保护因脑缺氧所致的神经细胞损伤，调节中枢神经系统而发挥抗疲劳作用[8]。但目前对人参抗疲劳的研究仅限于单味药，本实验对针药结合的治疗方法进行了研究，为疲劳的治疗提供了新思路。

综上所述，针刺与人参煎剂灌胃结合的抗疲劳作用优于单一治疗方法，针药结合治疗已成一种趋势并广泛应用于临床。针刺疗法无毒副作用，与中药配伍，可相辅相成、取长补短，发挥协同治疗作用。

[1] 张颖捷,杜万红.国内外抗疲劳研究进展[J].实用预防医学,2012,19(7):1112-1116.

[2] 谈智武,秦丹,抗疲劳功能成分研究进展[J].中国食物与营养,2009,15(5):55.

[3] 夏勇,赵硕,傅剑,等.云灵芝粉抗疲劳作用的实验研究[J].中国临床康复,2002,6(17):2618.

[4] 碧波,张琨,周忠凯,等.绞股蓝提取物对小鼠血清CK、LDH和肝糖原、肌糖原含量的影响[J].海南师范大学学报,2008,21(3):334.

[5] 文领,薛文通,程永强,等.复合中药制剂对小鼠抗运动疲劳能力影响的实验研究[J].食品科学,2005,26(z1):77-79.

[6] 邓树勋,王健,乔德才.运动生理学[M].第2版.北京:高等教育出版社,2010:237.

[7] 王筠默.人参药理研究的进展[J].人参研究,2001,13(3):2.

[8] 张前进.人参的化学成分和药理活性[J].光明中医,2011,26(2):368-369.

(责任编辑：尹晨茹)

2014-12-12

马斯(1987-)，女，辽宁中医药大学硕士研究生，研究方向为针刺机理。