临床血液检验中两种不同细菌鉴定法的应用价值

胡锦霞

临床血液检验中两种不同细菌鉴定法的应用价值

胡锦霞

目的 探讨两种不同细菌鉴定法在临床血液检验中的应用价值。方法 同时使用常规药敏试验和直接药敏试验对620份阳性血液标本进行检测，然后对两种检测方法药敏结果的符合率及各细菌的鉴定结果进行分析。结果 两组检测方法在G+球菌敏感度、G-杆菌敏感度、耐药的符合率等方面差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 常规药敏试验和直接药敏试验的符合率较高，但直接药敏试验的检测操作更简单，且时间也比较短，可将其推广应用于细菌感染的临床血液检验中。

细菌；鉴定；常规试验；直接药敏试验

近年来，抗生素在临床上的应用已越来越广泛，这就使各种细菌的耐药性及对抗生素的敏感性发生了一定的变异，从而给临床检验工作带来了一定难度。研究发现，对临床细菌进行检测时，可通过血液细菌鉴定法对患者的血液样品进行检测，从而为相关疾病的诊断及治疗提供有效的依据[1]。本研究结合笔者的工作经验，主要就两种不同细菌鉴定法在临床血液检验中的应用进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 资料均选自我院2012年7月至2013

年9月收治的620例发热合并全身感染的患者，排除及纳入标准：无血液系统疾病；无凝血功能障碍；入院前48 h内未服用任何药物及未接受任何治疗。通过无菌操作在患者发热初期或高峰期采集620份阳性血液标本，每例患者采集20 ml静脉血，然后以冷藏方式对样本进行保存，并尽快送到检验科进行检验。

1.2 方法 同时使用常规药敏试验和直接药敏试验对每份样本进行检测，然后对两种检测方法各细菌鉴定结果及药敏结果的符合率进行分析。

1.2.1 常规药敏试验 将血液样本分别接种在巧克力平板、麦康凯平板及血平板上，在浓度为5%、温度为35 ℃的二氧化碳下孵育18～24 h后，取出菌落涂片，对其进行革兰染色镜检，并结合检测结果选择相应的触酶或进行氧化酶试验，使用URITEST-3000生物鉴定仪对其进行鉴定，并进行药敏试验[2]。

1.2.2 直接药敏试验 ①先将血液样本接种在URITEST-3000型生化血培养仪对其进行自动培养及检测，当检测出阳性样品后，通过无菌注射器抽取10 ml阳性样品，注入无菌试管，然后行以梯度方式对细菌进行离心分离以1 500 r/min（离心半径r＝10 cm），速度对全部阳性样品进行离心，5～10 min后收集上层清液，再以3 000 r/min进行离心，15～20 min后去除上清液，洗涤2次后通过磷酸缓冲液（PBS）进行重悬[3]。②另外取悬液涂片20 μl对阳性样品进行革兰染色，同时进行倒置并使用显微镜对其进行观察，如果是革兰阳性菌（G+），且形态为链状，则使用浓度为5%的羊血血平板+MH对其进行初级药敏试验，此外，结合试验结果选择合适的酶，菌液的浓度调整为6.2×108cfu/L后，将接种在药敏综合板（NC21）上，然后对其进行细菌鉴定及药敏试验；常规接种时，在MH平板上拭以1～2滴悬液进行药敏试验及细菌鉴定，并借助无菌拭子以均匀方式涂于平板上，然后贴上合适的药敏纸片，结合2005NCCLSI标准标准对阳性样品中度敏感、敏感性以及耐药进行判断[4]。

1.3 统计学分析 使用SPSS 10.0软件对相关数据资料进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

表1 两种检测方法抗生素敏感度检出符合率情况

根据表1可知，G－球菌和G+杆菌的中度敏感、敏感、耐药符合率分别为92.4%、95.1%、95.8%及94.5%、96.6%、96.9%，因此，两种方法的阳性样品药敏试验的符合率均较高，差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

相关调查显示，当患者受到多重耐药菌的感染后，很容易出现细菌性疾病，如败血症、全身感染等，这主要是因为患者机体内的细菌已产生一定的耐药性，若相关细菌的耐药性出现一定增强，会给患者病情的诊断及治疗带来一定影响，严重时还会威胁患者的生命安全[5]。在临床诊断过程中，应通过高效、快速的方法对细菌进行鉴定，并对其耐药性能进行检验，才能为临床治疗提供有效依据。本研究同时使用常规药敏试验和直接药敏试验对620份阳性血液标本进行检测，此外，还对样品中的G+杆菌、G－球菌进行了药敏试验与检测，根据结果可知，两种检测方法的阳性样品药敏试验的总符合率均较高，且检测结果差异无统计学意义。但是，与常规药敏试验相比，直接药敏试验的检测时间较短，且简单方便，因此可广泛应用于相关疾病的临床诊断中。

[1] 张茂海.两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用研究[J].湖南中医药大学学报,2011,31(12):101-102.

[2] 赵硕,朱以军,单小云,等.576株血液分离病原菌的分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2011,21(9):130-132.

[3] 张鸿.武汉市青山区血培养病原菌的分布及耐药性分析[J].实验与检验医学,2011,29(4):114-115.

[4] 曹敏华.2659份血培养中病原菌的分布及耐药性[J].海南医学, 2012,23(8):120-121.

[5] 李慧.两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用[J].现代预防医学,2011,38(9):190-191.

R446.5

A

1673-5846(2014)08-0177-02

信阳市第四人民医院，河南信阳 464006