丹参合参附注射液对重症胰腺炎相关肺损伤保护作用的实验研究※

丁宪群杨胜波牛 刚张 建梅小才

丹参合参附注射液对重症胰腺炎相关肺损伤保护作用的实验研究※

丁宪群1杨胜波2牛 刚1张 建1梅小才1

目的探讨丹参合参附注射液对重症胰腺炎（SAP）的防治作用。方法SD大鼠72只，随机分为对照组（A组）、胰腺炎组（B组）和丹参合参附组（C组）。5%牛磺胆酸钠胰腺被膜下均匀注射制作SAP模型。放免法检测肺组织肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-10（IL-10）含量，测定肺组织湿/干比值，并光镜下观察胰腺、肺组织病理变化。结果与A组比较，B组各时相肺组织TNF-α含量明显升高（P＜0.05），IL-10含量明显降低（P＜0.05），肺组织湿/干比值明显增高（P＜0.05），胰腺、肺组织炎症明显。与B组比较，C组各时相肺组织TNF-α含量明显降低（P＜0.05），IL-10含量明显升高（P＜0.05），肺组织湿/干比值明显降低（P＜0.05），胰腺、肺组织明显炎症减轻。结论丹参合参附注射液对SAP肺损伤有防治作用，其中改善微循环，调节肺组织内炎性因子TNF-α、IL-10含量是其作用机制之一。

重症胰腺炎；肺损伤；丹参合参附注射液

重症急性胰腺炎（SAP）病情凶险，容易导致全身炎症反应综合征（SIRS）和多器官功能不全综合征（MODS），病死率高。急性肺损伤是SAP最常见的并发症，也是其重要的致死因素之一，可迅速恶化演变为急性呼吸窘迫综合征（ARDS），成为SAP早期死亡的主要原因[1]。考虑可能以多种促炎因子（TNF-α、IL-1、IL-10、PAF）介导的全身炎症反应综合征（SIRS）有关临床表明丹参和参附注射液治疗胰腺炎有明确疗效，本实验通过观察丹参和参附注射液对SAP肺损伤的防治作用并探讨其作用机制，报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物分组与处理SD大鼠72只，体重200～250g，雌雄不限，随机分为对照组（A组）、胰腺炎组（B组）、丹参合参附组（C组）。各组又按模型制备后6、9、12h 分为三组，每组8只。

1.2 药品和试剂丹参注射液（正大青春宝公司）、参附注射液（雅安三九药业有限公司）、牛黄胆酸钠（Sigma公司）、TNF-α、IL-10放射免疫试剂盒（ebioscience公司）

1.3 方法动物实验前12h禁食不禁饮。术前使用1%戊巴比妥钠0.3ml/100g腹腔注射麻醉。B组与C组采用胰腺被膜下均匀注射法制作模型[2]，开腹后自胰尾至胰头方向被膜下均匀注射 5%牛磺胆酸钠1ml，A组操作同前，但仅胰腺被膜下注射等量生理盐水。C组制模后立即股静脉分支缓慢注射 20%丹参合参附注射液各0.12ml/100g，A组及B 组则注射等量生理盐水。

1.4 检测指标各组动物分别于模型成功后6、9、12h经心尖采血处死，开胸取右肺用于肺组织湿/干比值[3]，取左肺组织300mg左右，加入生理盐水2ml，使用分散均质机制成肺组织均浆，用离心机离心3000r/min，15min，取上清液-20℃保存，放免法测定TNF-α、IL-10含量。取部分右肺和胰腺组织，HE染色后光镜观察其病理变化。1.5 统计学处理利用SPSS 17.0统计软件进行统计分析，计量资料均以均数±标准差（±s）表示，各组间比较采用单因素方差分析，取α=0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组肺组织湿/干比值变化，见表1。

表1 各组肺组织湿/干比值变化[(±s),n=8]

表1 各组肺组织湿/干比值变化[(±s),n=8]

注：与A组比较△P＜0.05，△△P＜0.01；与B组比较▲P＜0.05

组别 6h 9h 12h A组 3.24±0.21 3.31±0.24 3.35±0.27 B组 4.66±0.48△5.92±0.51△△6.94±0.92△△C组3.81±0.26▲△4.14±0.38▲△4.96±0.65▲△

2.2 各组大鼠肺组织TNF-α和IL-10含量的变化，见表2。

表2 各组大鼠不同时段肺组织TNF-α和IL-10含量的变化[(±s),n=8,ng/mg]

表2 各组大鼠不同时段肺组织TNF-α和IL-10含量的变化[(±s),n=8,ng/mg]

注：与A组比较 △P＜0.05，△△P＜0.01；与B组比较 ▲P＜0.05

组别 6h 9h 12h 6h 9 h 12h TNF-α IL-10B组 0.94±0.06 1.02±0.26 1.08±0.31 21.55±3.54 20.96±3.91 122.94±0.06 A组 2.94±0.24△△ 3.84±0.62△△ 4.51±0.46△△ 14.94±2.96△△ 12.11±2.46△ 10.81±2.35△△C组 1.45±0.22▲△ 1.98±046▲△ 2.11±0.40▲△ 20.54±3.26▲△ 17.55±4.78▲△ 16.78±4.26▲△

2.3 各组大鼠胰腺及肺组织病理学改变肺：A组大鼠肺脏各时相点未见明显变化，B组及C组6h后肺组织充血明显，9h后白细胞增多，与血管内皮黏附，部分间质白细胞浸润，肺泡间隔水肿增厚，并随时间延长而加重，C组病理变化较B组轻。胰腺：A组胰腺结构清晰，腺泡细胞无水肿，无炎症细胞浸润，无坏死及出血灶，B组腺泡肿胀坏死，融合成大片状，间质有充血水肿，中性粒细胞及单核细胞浸润明显，C组较B组腺泡破坏较轻，炎症细胞浸润减少，出血渗出明显减轻。

3 讨论

重症急性胰腺炎是临床常见危重疾病，病情重，死亡率高，是临床治疗的重点及难点。在所有的严重急性胰腺炎当中，最快收到牵连的器官是肺脏，近年来，在该方面虽有很多新方法不断涌现，来治疗肺损伤，但是关于SAP肺损伤仍是早期最关键和并发症和主要的死亡原因。

本研究表明，与B组比较，C组各时相肺组织湿/干比值均明显降低，证实经丹参合参附注射液处理后能明显减轻肺部组织充血水肿程度，也证实了丹参和参附注射液能有效改善微循环，从而减少急性胰腺炎时肺损伤。实验证明，与A组比较，B组各时相胰腺及肺组织损伤均较重，TNF-α含量明显增高，而IL-10含量明显降低；与B组比较，C组各时相胰腺及肺组织，损伤均减轻，TNF-α含量明显降低，而IL-10含量明显升高，由此证明，丹参和参附注射液能在一定程度上改善SAP肺损伤时肺组织内TNF-α、IL-10含量，可通过炎性介质因子的调节起到对SAP肺损伤保护作用。

综上所述，本研究显示，丹参合参附注射液联合用药对重症SAP所致的大鼠急性肺损伤具有保护作用，机制也可能改善微循环，调节炎性介质因子作用有关。

[1] 卢建喜,杨涛.丙泊酚对重症急性胰腺炎相关肺损伤保护作用的实验研究[J].浙江创伤外科,2012,17(3):312.

[2] Xue JG,Wang Y,Xu WD. An improved model of acute h emorrhagic necrotizing pancreatitis in roots[J].Chin J Exp Surg,1994, 11:313.

[3] 王刚,孙备,孟庆辉,等.血小板活化因子胰腺水解酶对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的影响[J].中华实验外科杂志,2006,23:3435.

R576

A

1673-5846(2014)01-0205-02

1 贵阳中医学院第二附属医院肝胆外科，贵州贵阳 550000

2 贵阳中医学院临床二系，贵州贵阳 550000

贵州省科学技术联合基金项目（黔科合中药字【2010】LKZ7003）

丁宪群（1963-1），女，本科，学士，肝胆外科主任，主任医师。研究方向：中医学结合肝胆胰脾疾病。