心舒丸中丹参酮ⅡA的含量测定方法改进

时间：2024-07-06

姚雪梅刁丽春覃信满

心舒丸中丹参酮ⅡA的含量测定方法改进

姚雪梅刁丽春覃信满

目的采用改进高效液相色谱法（HPLC）测定心舒丸中丹参酮ⅡA的含量。方法采用Kromasil-C18色谱柱，流动相为甲醇-水（80:20），流速为1.0ml·min-1。结果丹参酮ⅡA在0.10～0.60μg范围内线性关系良好（r=0.9994），回收率为100.10%，RSD为0.58%。改进方法测定丹参酮ⅡA的含量，出峰时间更快，丹参酮ⅡA主峰与其他峰分离度和拖尾因子均符合要求；两种方法测定三批心舒丸中丹参酮ⅡA含量无明显差异。结论改进HPLC法测定丹参药材中丹参酮ⅡA的含量，具有较好的方法重现性，结果准确，可作为丹参酮ⅡA含量测定的替代方法。

心舒丸；丹参酮ⅡA；改进HPLC法；含量测定

心舒丸主要由丹参、三七、冰片、藤合欢、木香和苏合香等成分组成，具有行气活血、通窍、解郁等功效，用于心脏病引起的胸闷气短、心绞痛的治疗[1]。于百青等[2]研究认为，采用高效液相色谱法测定心舒丸中丹参酮ⅡA的含量具有简便、灵敏、准确、专属及重复性好的特点。丹参酮ⅡA属于丹参中的主要脂溶性成分，《中国药典》2010年版1部采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA的含量，以甲醇-水（75:25）为流动相。本研究拟对高效液相色谱法中流动相含量配比进行改进，采用改进 HPLC法检测心舒丸中丹参酮ⅡA含量。

1 仪器与试剂

仪器选自Shimadzu LC20A型高效液相色谱仪，LC-20AT型溶液传输单元，SIL-20A自动进样器，SPD-M20A二极管阵列检测器，LC Solution色谱工作站；丹参酮ⅡA对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110766-200619）；丹参药材通过市场采购，甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其它试剂为分析纯。心舒丸（辽宁华鑫药业有限公司，批号分别为10050、100502、100503）。

1.2 方法

1.2.1 于百青[2]检测方法（简称为方法A）色谱柱为Kromsil-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水（73:27），检测波长为270nm，流速为1.0ml·min-1，柱温28℃，进样量为10µL。理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。

1.2.2 改进的测定方法（简称为方法B）在于白青等学者研究的基础上，将流动相改为甲醇-水（80:20），其余操作与于百青等学者测定方法相同。

1.2.3 对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品10.05mg，置50mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取1mL，置5mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1mL中含丹参酮ⅡA 40.20µg）。

1.2.4 供试品溶液的制备取质量差异项下的本品，剪碎，精密称定1.8g。置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25mL。密塞，称定质量，超声处理30min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

1.2.5 阴性对照品溶液按心舒丸处方和方法制备缺丹参的阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。

1.3 标准曲线以及线性关系考察精密吸取丹参酮ⅡA对照品约10.0mg，置50mL棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成 200µg·mL-1的对照品溶液，备用。取出0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL的200µg·mL-1的对照品溶液，分别置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样测定。在上述改进测定的色谱条件下进样10µL，测定峰面积，以对照品浓度为自变量（X），相应峰面积为因变量（Y），得回归方程分别Y=1.85×106X－3.49104（r=0.9994）。

1.4 仪器精密度试验取丹参酮ⅡA对照品溶液，重复进样6次，测定丹参酮ⅡA的峰面积，RSD为0.46%。

1.5 稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，每2小时进样1次，每次进样10µL，连续考察12h。结果峰面积的RSD=0.42%，表明供试品溶液在12h内稳定。

1.6 回收率诚验精密称取已知含量的心舒丸样品 6份，照供试品溶液制备方法制备溶液，取供试品1 mL，置1000mL的容量瓶中，加入丹参酮ⅡA对照品溶液（40～20μg·mL-1）2mL，用甲醇稀释至刻度，采用改进方法进行测定，并计算加样回收率，见表1。

表1 丹参酮ⅡA加样回收试验