甲型肝炎疫苗研究进展

蒙 洋 蒋红云

(国家知识产权局专利局专利审查协作天津中心 医药化学发明审查部，天津 300304)

1.1 甲肝流行病学

甲型肝炎(甲肝)是由甲肝病毒(hepatitis A virus，HAV)引起的一种以肝脏损害为主的肠道传染病，主要发生在亚洲、非洲等发展中国家，我国是甲肝的高发流行区[1-2]。甲肝流行情况与当地的卫生状况密切相关，有明显的季节性，常呈周期性爆发流行，传染源是急性期病人和亚临床感染者[3]。大量实践证明，接种甲肝疫苗扔是控制HAV感染的最有效的途径。截止至2007年，包括中国和美国在内的27个国家已将甲肝疫苗纳入国家免疫规划，随着甲肝防御性疫苗的应用，我国甲肝的感染率和发病率呈现逐年下降的良好趋势[2，4]。

甲肝病毒是1973年由Feinstone等应用免疫电镜在急性肝炎患者粪便中发现的，1992年，美国Robertson等提出了HAV基因分型的概念，将HAV病毒分为7个基因型，人类HAV各基因型之间核苷酸异源性为15-25%[5]。尽管各型HAV之间存在不同的基因变异，但是，大量实验证明，来源不同的HAV具有一定的抗原稳定性和保守性，且只有一个血清型，因此，不同毒株制备的甲肝疫苗可以在全世界范围内通用，这为发展疫苗预防甲肝提供了理论依据[1、5]。

1.2 甲肝疫苗使用现状

甲肝疫苗主要分为甲肝减毒活疫苗和甲肝灭活疫苗。其中，减毒活疫苗主要在中国和印度等国家使用，灭活疫苗则在全球范围内广泛使用。

1.2.1 减毒活疫苗

甲肝减毒活疫苗是用遗传稳定且对人安全的疫苗株接种于人二倍体细胞后，经培养收获病毒液并加适宜的保护剂制成。甲肝减毒活疫苗主要在中国研制和使用。目前，我国使用的甲肝减毒活疫苗的减毒株有L-A-1株和H2株[1，2，5]。HAV L-A-1株由上海市卫生防疫站于1980年分离获得，随后由上海市卫生防疫站与长春生物制品研究所合作，经传代获得HAV L-A-1减毒株[1]。HAV H2株由毛江森等于1982年分离获得，经传代减毒制成，现该毒株的拥有者为浙江普康生物技术股份有限公司[1]。L-A-1和H2减毒株活疫苗的平均保护率均高于97%，具有良好的免疫效果。目前，HAV H2株甲肝减毒活疫苗除了在中国销售外，还出口印度、泰国、菲律宾、危地马拉和孟加拉共和国等国家[6]。

甲肝减毒活疫苗主要有两种剂型：液体型和冻干型。液体疫苗以<-20℃冷链运输，且有效期仅为5个月，不利于大规模应用；而冻干剂型通过使用疫苗稳定剂可将疫苗置于2-8℃保藏18个月或者-20℃保藏28个月[1]。目前，长春生物制品研究所研制的冻干剂型减毒活疫苗已经上市17年，已经有大于4千万人接种，安全性和有效性均良好[1]。

1.2.2 灭活疫苗

目前，广泛使用的甲肝灭活疫苗包括默沙东(Merk Sharp & Dohme，MSD)公司的Vaqta、史克必成(SmithKline Beecham，SKB)，已经被葛兰素史克(GSK)公司收购的贺福立适(Havrix)和赛诺菲巴斯德有限公司(Sanofi Pasteour)生产的巴维信(AVAMIX)[1、2]。史克必成公司的Havrix于1991年研制成功，并在欧洲上市，并于1995年进入国际市场[1]，其是以美国卫生和人类服务部分离得到的HM-175强毒株为抗原制备获取的，且以福尔马林灭活，以氢氧化铝作为佐剂。由于氢氧化铝佐剂容易引起疲劳、疼痛和注射部位肿块等不良反应，瑞士博尔纳生物技术有限公司(Berna Biotech AG)采用先进的类病毒IRIVs专利技术制备产生了新一代甲肝灭活疫苗。它以RG-SB甲肝病毒株经甲醛灭活后，结合到IRIVs上，可增强甲肝病毒抗原免疫应答反应时间，同时还降低了铝佐剂疫苗的局部不良反应。且其不含防腐剂和抗生素，可完全生物降解[7]。

国内使用较广泛的国产甲肝灭活疫苗主要为北京科兴生物制品有限公司以TZ84制备获得的拥有自主知识产权的孩尔来福和中国医学科院医学生物学研究所(昆明所)以铝8株制备获得的维塞瑞安。

1.2.3 减毒活疫苗与灭活疫苗的对比

大量研究证明，甲肝减毒活疫苗和甲肝灭活疫苗在接种后都能取得较好的免疫保护效果。减毒活疫苗可在宿主体内短时间复制，因此，具有较长的免疫时间；灭活疫苗一般由强毒株制备获得，可较好的引起免疫反应，且由于病毒被灭活，也有着较好的安全性。目前，减毒活疫苗和灭活疫苗一般都为两次接种，部分减毒活疫苗则可以只进行一次接种就能取得较好的免疫效果[8]。

1.3 新型甲肝疫苗的研究

随着生物技术的快速发展，科研人员又开始了新型甲肝疫苗的研制，如联合疫苗和基因工程疫苗等。

1.3.1 联合疫苗

联合疫苗是指含有两个或者多个活的或者灭活的生物体或者提纯的抗原，由生产者联合配制而成，用于预防多种疾病的疫苗。联合疫苗能简化免疫接种程序，减少接种次数，降低接种费用。目前甲、乙型肝炎联合疫苗已成功上市，使用较多的甲、乙型肝炎联合疫苗为葛兰素史克公司的Twinrix、Twinrix Pediatric和Ambirix，联合疫苗诱生的抗体持久性长于单一疫苗[1，8，9]。正在研发可与甲肝疫苗联合的疫苗有甲肝-腮腺炎联合疫苗、甲肝-水痘联合疫苗及甲肝-麻疹-水痘联合疫苗等。

1.3.2 基因工程疫苗

基因工程疫苗是使用DNA重组生物技术，把天然或人工合成的遗传物质定向插入宿主中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。其中基于病毒样颗粒的基因工程疫苗是最理想的制备疫苗的方式。因为病毒样颗粒的结构与野生型病毒相同或相似，含有与野生型病毒相同或相似的抗原决定簇。但由于HAV抗原高度依赖空间结构，合成的病毒样颗粒抗原存在立体构象的依赖性，限定其抗原性弱于传统疫苗。所以传统甲肝减毒活疫苗和甲肝灭活疫苗仍是目前预防甲肝的首选疫苗。