EM菌、乳酸菌的简易扩大培养

路庆鹏 金雪霞 荣志敏

(江苏绿科生物技术有限公司，江苏 高邮 225600)

绿科生物科技专栏

江苏绿科生物技术有限公司 协办

咨询热线：4008-1212-60/0514-84479000

EM菌和乳酸菌在水产养殖上的应用已有近20年的历史了，多年的实践证明，这些微生态制剂对于水产养殖水体环境的调控及水产生物机体内环境的调节均十分有效。水产微生态制剂已成为水产养殖的必备物品，然而在实际应用中养殖户发现，水产用EM菌等品种五花八门，应用范围基本相同、菌体含量参差不齐，价格相差极大，但作用效果并无天壤之别，这些因素限制了微生态制剂的进一步应用和发挥功效，打击了广大养殖户使用微生态制剂的热情。特别是微生态制剂是通过生物间的资源竞争和相互拮抗来发挥作用的，起效有一定的时间，需要定时、定量使用才有效果。优质高价的产品养殖户用不起，劣质低价的产品效果又不好。在这种情况下，养殖户自主扩培微生态制剂的现象越来越多，且取得了一定的效果，逐渐成为一种趋势。

一、目前EM菌、乳酸菌扩培中存在的主要问题

EM菌是有效微生物的一种统称，其为一种复合菌制剂。当前水产上所用的虽然都称为EM菌，但各厂家所生产的EM菌差别还是很大，有的以兼性厌氧性菌群为主，有的富含好氧性的菌群，而乳酸菌同样因保存条件、作用性能等也是多种菌种的复合产品。既然EM菌是多菌属、多菌种复合制剂，那么不同菌群的扩培条件肯定也存在差异，简单的操作不可能扩培出稳定的EM菌液。

1.缺乏专一化的扩培菌种 当前市场上生产用于EM菌、乳酸菌扩培的专一化菌种的厂家极少，多数是生产相应的培养基，再以市售的商品化EM菌、乳酸菌为菌种。市售的EM菌差异极大，较为经典的EM菌以兼性厌氧菌为主要菌群，而现有很多的EM菌中又加入了多种好氧菌，这样会造成有的扩培效果不错，有的则很差。即使使用同一种EM菌做菌种，有时扩培很好，有时又很差。乳酸菌同样如此。更值得注意的是，养殖户为了节省成本，将一次扩培后的菌液留做菌种，再次或3次扩培，导致扩培液越发不稳定。

2.缺乏专门化的培养工艺 很多养殖户认为扩培是十分简单的，不需要按严格的流程来进行，故在扩培中随意性很大，导致每批扩培产品差异大。容器、水源、培养基是否要消毒，是否密封，培养温度、培养时间是多少，如何判定是否达到要求等没有具体的可操作流程规定，造成扩培的菌液杂菌污染严重、有的甚至培养的就是不良杂菌菌液。这样虽然使用成本降低了，但使用效果不佳，有时甚至有害。

二、保证EM菌、乳酸菌扩培效果的技术要求

为使EM菌、乳酸菌扩培能达到成本降低、效果稳定、杂菌率低等要求，扩培必须按一定的技术要求进行。

1.采用专一性的扩培专用菌种 专用菌种在设计生产时已考虑到菌种配伍、对通用培养条件的适应性等问题，菌种活性高、效果稳定，如2020年江苏绿科生物推出的“EM发发乐”和“乳酸发发乐”。“EM发发乐”以兼性厌氧菌为主，含乳酸菌、酵母菌等多种菌种及其代谢产物、多种中微量元素；“乳酸发发乐”含植物乳杆菌、粪肠球菌等多种益生菌及其代谢产物、多种中微量元素。所用菌种经严格筛选，确保菌种活力高、抗逆性强、在环境和机体内定植力好、增殖迅速。采用国际先进的液态深层发酵工艺和低温干燥制剂工艺生产，且经独特的微囊包被处理，确保产品活性高、稳定性好、无杂菌污染。使用方便、成本低，500克/袋可扩培50千克菌液。需注意的是，每次扩培需按量使用相应的专用菌种。

2.培养容器 50～100千克容积的带盖塑料桶需经洗涤、用二氧化氯等消毒剂浸泡消毒(包括盖子)，清洗后备用。

3.水源及培养基 水源以自来水、井水为佳，也可使用养殖水源，使用前均经过沉淀、消毒、曝气处理；培养基可采用红糖、糖蜜，适当加入酵母浸粉或蛋白胨等，具体见菌种使用说明。

4.培养方法及判定 在50千克可密封塑料桶中加入一半的培养水源，加入培养基，搅拌(用经消毒的搅棒)均匀后加入“EM发发乐”或“乳酸发发乐”500克，然后加水至50千克，再次搅拌均匀，密闭培养。培养的适宜温度为25～35℃，时间3～5天，如气温低于25℃可将培养时间延长为5～10天。培养过程中会产生一定的气体，可在培养时每天松盖放气并摇动后再密封。是否培养成功可通过显微镜观察、测pH以及观察颜色和气味来实现。培养合格的产品pH在4.0以下，颜色由初始的深棕褐色变成浅棕褐色或黄褐色，味呈酸甜、香，显微镜下达108个/毫升数量级即可。