高效液相色谱测定水中酚类化合物

褚 芸，张吉君

（1.苏州大学卫生与环境技术研究所，江苏苏州 215000；2.苏州市吴江区公安局交警大队平望中队，江苏苏州 215221）

高效液相色谱测定水中酚类化合物

褚 芸1，张吉君2

（1.苏州大学卫生与环境技术研究所，江苏苏州 215000；2.苏州市吴江区公安局交警大队平望中队，江苏苏州 215221）

高效液相色谱法在检测方面具有的优势使其在很多领域表现突出，下面简单介绍高效液相色谱法和高效液相色谱仪，并讨论高效液相色谱法检测水中化合物的步骤及检测结果的准确性。

高效液相色谱法；高效液相色谱仪；酚类化合物

酚类化合物会对环境造成污染，使水的气味和颜色变化，是致癌、致畸、致突变的具有潜在毒性的有机污染物。水中酚类物质的检测是对水质评价的重要方面。高效液相色谱法操作简便、精度高、重现性好使其在水中酚类物质检测中具有广泛应用。下面介绍高效液相色谱法的检测原理、检测仪器、检测方法的等内容。

1 高效液相色谱法与实验仪器

液相色谱法是以液体作为流动相的技术方法，高效液相色谱法是在液相色谱法的基础上引入气相色谱法的实践经验和原理改进的方法，具有高压、高速、高效、高灵敏度、应用范围广等特点。液相色谱法的基本原理是：不同组分的流动相在固定相中经过时与固定相发生吸附、亲和、排阻等作用，大小程度不同，流动相在固定相中的滞留时间不同，不同的样品分子得以分离[1]。目前高效液相色谱法已经广泛应用于生物学、医药、工业、化学、商检等领域物质的分离分析。

高效液相色谱仪主要分为高压输液系统，进样系统，分离系统，检测系统，辅助装置等。高效液相色谱仪的组成包括了流动相的溶剂、泵、进样器、色谱柱（固定相）、检测器、废液以及数据系统。贮器中流动相溶剂被泵吸入然后输出，经压力和流量测量后导入进样器。被分析样品由进样器注入，并随流动相一起以此进入色谱柱，被分离的物质进入检测器，经微处理机采集进行数据处理，或用积分仪记录色谱峰面积和色谱图。复杂的样品可以采用梯度淋洗操作，使样品各组分均得到最佳分离，节约时间。其中检测器常有紫外检测器、荧光检测器、示差荧光检测器、光电二极管阵检测等。美国waters公司生产出一系列高效液相色谱分析仪，如Delta prep 3000、Prep 500、Kilo Prep 250、Kilo Prep 1000、Kilo Prep 3000。

2 酚类化合物的检测过程

2.1 色谱条件的确定

第一步确定需要检测的酚类物质波长，常见酚类化合物的波长如下：苯酚（275nm）、3-甲基苯酚（275nm）、2，4-二基苯酚（295nm）、2，4，6-三氯苯酚（295nm）、五氯酚（305nm）。

第二步就是确定流动相和梯度洗脱条件，一般A为浓度在1%的醋酸甲醇溶液，B相取浓度为1% 的醋酸水溶液。

2.2 水样预处理

如果检测的水样为浑浊的水，则应该定量滤纸后再进行处理。如果水样存在余氯残留，用无水亚硫酸钠脱氯。一般是先选择15mL甲醇活化富集小柱，然后用15～30mL左右的纯水活化，接下来加适当浓度的硫酸溶液调节pH值在1.5～2.0之间。预处理之后的水样就可以以5～10mL/min的流速通过富集小柱。富集完的样品在N2或空气中干燥10～15min，吸附在柱子内壁的水分也要吹干。最后用甲醇或四氢呋喃洗脱小柱，收集液浓缩后装瓶待用。

2.3 常用实验仪器

常用的实验仪器大致有以下几种：高效液相色谱仪（2695）、紫外检测器（2475）、色谱柱（C8）、富集柱（Oasis-HLB）、Molelement超纯水机（1 820W）、科导超声波清洗器（1 820W）。

3 检测结果分析

采用外标法定量，对制作出的混合标准系列溶液和待测样品测定其色谱峰及峰面积，以标准系列溶液的浓度C与峰面积S的比值作线性回归方程S=bC+a，对比标准曲线，分析样品的相关系数r值大小。梁坚[2]研究水中酚的最佳色谱条件时得出的酚类化合物的回归方程：苯酚（2.64×102C+2.47×102，相关系数0.999 90）、4-硝基酚（5.01×102C+2.01×102，相关系数为0.999 74）、间苯酚（2.03×102C+4.43×102，相关系数为0.999 95）、2，4-二氯酚（1.62×102C+4.68×102，相关系数为0.999 99）、2，4，6-三氯苯酚（1.91×102C+5.82×102，相关系数为0.999 95）、五氯酚（1.04×102C+2.48×102，相关系数为0.999 99）。酚类物质的测定结果都很理想，相关性很高，说明用此种方法测定水中酚类物质可靠性较高。梁景华[3]在测定水中酚类物质时，对较低浓度的样品重复做测定，计算出的相对标准差小于3.2%，说明此方法精密度非常好。几种酚类化合物的回收效率也比较高。

4 结束语

高效液相色谱法具有高压、高速、高效、高灵敏度、应用范围广的优势，在生物学、医药、工业、化学、商检等领域应用广泛。高效液相色谱法的检测过程大致可分为色谱条件的确定、水样的预处理以及标准曲线的制作。检测出的结果相关性高，方法可靠，同时常见的几种酚类化合物回收效率也高。

[1]张旸，管春梅，陈文华，等.高效液相色谱法测定水中酚类化合物[J].中国卫生检验杂志，2003，（2）：196-197.

[2]薛凤丽，李岩，杨瑞强，等.SPME—HPLC法测定水中的酚类化合物[J].中国给水排水，2006，（16）：81-83.

High Performance Liquid Chromatography（HPLC）Determination of Phenolic Compounds in Water

Zhu Yun，Zhang Ji-jun

High performance liquid chromatography detection has advantages of its outstanding performance in many areas，following a brief performance liquid chromatography and high performance liquid chromatography，high performance liquid chromatography and discuss the steps to detect and test compounds in water accuracy of the results.

high performance liquid chromatography；high performance liquid chromatograph；phenolic compounds

X832

A

1003–6490（2016）04–0137–01

2016–04–10

褚芸（1989—），女，江苏苏州人，助理工程师，主要研究方向为环境检测。