化学原料药的分析方法验证、转移与确认

吴耿锋，金泉泉，龚 珊

（上虞京新药业有限公司，浙江杭州 312369）

中国是化学原料药的出口大国。对于我国的化学原料药来说，欧美国家是重要出口对象，在申请化学原料药出口、对出口注册文件进行呈报过程中，企业应结合自身实际情况进行化学原料药的分析方法验证，同时对有关文件进行证明并提供相应资料；化学原料药分析方法构建与重现及验证、转移、确认是重要构成部分。通过化学原料药分析方法的验证、转移与确认，可以对质量控制分析方法满足检验要求与否进行有效证明，可以对检验工作人员的操作能力进行有效证明。

1 化学原料药分析方法的定义与种类

根据有关指导性文件，化学原料药分析方法就是指进行分析的方式，需要对所有分析检测需要的步骤进行详细描述，如试剂的配制、样品、仪器的运用等。

化学原料药分析方法具体如下：

第一类，即为测试化学原料药主成分含量的分析方法；第二类，即为测试化学原料药杂质的分析方法；第三类，即为测试化学原料药化学性能的分析方法；第四类，即为化学原料药的鉴别实验。

2 化学原料药分析方法的验证

2.1 系统适用性

系统适用性，就是指综合多种不同的分析方法，系统性评估被分析的样品组成、实验操作规程、分析设备、仪器等，以对整个分析系统的可靠性、可适用性进行确定。一般情况下，系统适用性实验，主要包括分离度、拖尾因子、重复性等参数。

2.2 专属性

专属性，就是指当辅料、降解产物、杂质等成分可能存在时，精准、可靠测定被分析物的能力。在完成其他验证项目以后，方可进行专属性验证项目。针对专属性研究，还涉及分析典型样品，应选用较为灵敏的分析方法，同时能够准确定位杂质。假如无法获取杂质，可以选择其他替代品取代杂质进行相关研究。在色谱条件下，可以对相应的混合溶液进行合理配制，以对可识别程度进行检验。其中，在编制研究报告时，应将不同方法的综合鉴别、获得的结论、鉴别等记录在内。针对在色谱条件下所进行的含量测定、纯度检查，需要将色谱图相关信息进行详细说明，包括已知杂质的分离度、杂质的出峰顺序、杂质的定位等。

2.3 回收精密度、范围、线性、准确性

（1）线性

线性，就是指样品内的被测物与检测结果在规定范围中呈正比。在线性测量指定杂质、药品主要成分含量时，应选用对照品或者标准品。在进行线性测试时，不得低于5个不同的浓度水平，且每个浓度水平均应配制3份。在配制不同浓度水平的溶液时，可以选用储备溶液再稀释的配制方法。一般情况下，在进行配制时，会选用一个批号的可靠样品，为避免出现误差，需要根据溶液来选用相同批号的样品，然后对所有测试结果与回收率进行计算。

（2）回收精密度

回收精密度，就是指在评估回收率、线性的过程，可以选用每个浓度水平回收率的相对标准偏差，以进行计算。

（3）准确性

准确性，就是指利用本方法所得到的测定结果，其与实际情况比较近似的程度，大多数情况下主要通过回收率与线性而取得准确性。

（4）范围

范围，就是指可以达到一定的线性、准确性、精密度。大多数情况下，通过回收精密度、回收率、线性来获取范围。

2.4 精密度

第一，精密度，就是指在指定测试条件下，针对同一个样品，在对其进行多次取样后而获取的不同测定结果之间的接近程度。大多数情况下，精密度的表示方法包括相对标准偏差、标准偏差、一般偏差。

第二，测试精密度，就是指在较短时间间隔与同一操作条件下的精密度。例如，在各种实验条件不变的条件下与较短时间下，重复分析测定来自于样品中抽取的若干个供试品。

第三，方法精密度，就是指同一个分析工作者利用相同样品来对6份样品溶液进行分别配制与测试。

第四，中间精密度，就是指利用相同样品，两位分析工作者对6份样品溶液进行分别配制，为对平时检测中可能会产生的区别进行有效模拟，对各种不同的试剂、仪器进行使用，同时在不同时间条件下进行有关测试。假如并不存在我们所关心的样品成分，在这种情况下，可以在样品中加入相应不存在的成本，以获取相应值。

2.5 定量限与检测限

定量限，就是指可以被常规定量的、具有一定精准度、精密度的样品的最低浓度。信噪比、各种色谱柱之间与各种仪器之间等各种方法条件均会影响定量限。

检测限的检测，能够稀释分析物，直至无法检测本浓度下的分析物。

2.6 耐用性

耐用性，就是指故意稍微改动实验参数时，不会对检测结果造成影响的可靠性。假如各种分析条件会影响检测结果，在这种情况下需要验证分析条件。一般情况下，在实验过程中，需要研究敏感度比较高的参数。其中，Ⅰ类耐用性的可接受标准为≤士1%，Ⅱ类耐用性的可接受标准为≤士0.2%，Ⅲ类耐用性的可接受标准为≤士3%。

3 化学原料药分析方法的确认

针对化学原料药分析方法的确认，美国药典并未对其进行详细说明，仅提出了一些指导性建议。第一，通过进行系统适用性实验，以对检验系统满足方法要求、实验室的实际操作水平进行有效证明；第二，对分析方法的复杂程度进行判断；第三，对检验结果具有一定影响的重要方法参数、分析方法的重要操作步骤进行合理确定；第四，将分析方法的复杂程度作为主要依据，选取非常重要的一些分析方法学参数来进行相关观察。综上所述，不难发现，对于化学原料药分析方法的确认来说，系统适用性实验是重要内容，通过进行系统适用性实验，能够对检验系统满足方法要求、实验室的实际操作水平进行有效证明，不过只是开展系统适用性实验，并不能完全达到分析方法确认的要求，还需要选用其他一些比较重要的方法学参数，各种检测方法对应不同的确认内容。

4 化学原料药分析方法的转移

化学原料药分析方法转移，就是指对符合标准的实验室选用的操作过程或者分析测试方法进行转移。通过进行化学原料药分析方法的转移，能够对检验结果的质量进行有效保证，确保各种实验室之间能够获取可靠、精准、一致的检测结果。

迄今为止，针对化学原料药分析方法的转移，美国药典中记录的有关化学药品分析方法转移是当前仅有的指导性文件。由生产企业的研发实验室转移至质控实验室，这是一种常见的分析方法转移现象。作为质控实验室，应对本实验室能够对研发实验室制定的分析方法的成功操作进行有效证明。其中，比对性实验是最为简单的一种证明方法，即通过利用研发实验室制定的分析方法，质控实验室比对研发实验室测定的结果与相同样品测定的结果，根据比对结果，达到转移之前所确定的接收标准，则表明化学原料药分析方法的转移获取成功。此外，针对方法建立实验室的分析方法，实验室能够对其成功使用，需要制定相应有效的文件系统，以对其进行有效证明。

5 结束语

首先对化学原料药分析方法的定义与种类进行详细论述，然后分别阐述了化学原料药分析方法的验证、转移与确认，有助于药品生产企业实验室质控工作质量的提高，能够有效指导药品的注册工作。作为化学药品生产企业，应全面验证化学原料药分析方法，同时根据GMP 要求，将具体规范化管理工作做好。