T淋巴细胞亚群检测、锌剂治疗在病毒及细菌感染性腹泻中的应用*

许鑫松,朱焰,路攀

湖州市第一人民医院(湖州师范学院附属第一医院)儿科(浙江湖州 313000)

腹泻病是儿童消化系统 最常见的疾病。婴幼儿因消化系统发育不成熟、生长发育快消化道负担重、机体防御功能差、肠道菌群失调等原因易患病，且婴幼儿对缺水的耐受力差，更易发生脱水、电解质紊乱等症状加重病情，甚至危及生命。慢性、迁延性腹泻对婴幼儿生长发育及健康产生不利影响。在临床工作中以病毒及细菌感染性腹泻最为多见。免疫反应在感染性腹泻的发生发展过程中起着重要作用，外周血T淋巴细胞亚群可反映细胞免疫功能状态，在疾病的诊断及治疗方面有非常重要的作用[1]。锌是人体中重要的微量元素，缺锌可引起机体免疫功能下降，产生细胞免疫功能紊乱[2]。然而腹泻不但影响锌的吸收，而且可引起锌丢失，因此腹泻过程中易引起体内锌的缺乏，对机体的免疫功能产生影响，导致腹泻症状不易恢复[2-3]。本研究通过T淋巴细胞亚群分布情况，比较病毒及细菌感染性腹泻在细胞免疫方面的变化，并分析锌剂治疗在病毒及细菌感染性腹泻治疗中的疗效，以及对T淋巴细胞亚群的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年9月至2019年8月在湖州师范学院附属第一医院儿科住院的138例轻中度腹泻病例及60例健康儿童，分为病毒感染组(n=75)、细菌感染组(n=63)、健康对照组(n=60)。病毒感染组中男41例，女34例，年龄1个月至14周岁，细菌感染组中男33例，女30例，年龄1个月至14周岁，健康对照组中男32例，女28例，年龄1个月至14周岁。各组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。病毒感染组及细菌感染组中根据是否补锌治疗，分为补锌组及对照组；病毒感染组中，分为病毒补锌组(n=33)、病毒对照组(n=42)；细菌感染组中分为细菌补锌组(n=27)、细菌对照组(n=36)。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：腹泻病例有腹泻、发热、呕吐等症状，符合《儿童腹泻病诊断治疗原则的专家共识》的标准[4]；对照组选取无感染性症状的健康儿童。年龄1个月至14周岁；家长配合检测、治疗。排除标准：重症病例、有免疫功能障碍、有混合感染、有先天性基础疾病、家长不配合等。

1.3 治疗方法 腹泻病例均予补液，益生菌口服治疗，细菌感染组予敏感抗生素治疗，两组补锌组予赖氨葡锌颗粒(海南慧谷药业有限公司，国药准字H20083017)治疗，按含锌量，<6个月予10 mg/d口服治疗，>6个月予20 mg/d口服治疗。

1.4 检测方法 采用流式细胞仪检测(公司：碧迪医疗器械(上海)有限公司；型号：canto Ⅱ；试剂：淋巴细胞亚群检测试剂盒)所有患儿外周血T淋巴细胞亚群分布情况(CD4+比例、CD8+比例、CD4+/CD8+值)。部分1周内随访病例复查T淋巴细胞亚群。

1.5 观察指标 观察病毒感染组、细菌感染组各年龄段发病率，比较病毒感染组、细菌感染组及健康对照组CD4+比例、CD8+比例、CD4+/CD8+值的差别，并分析有无临床意义，观察治疗后，补锌组及对照组的有效率、症状恢复时间及治疗前后T淋巴细胞亚群分布情况。

1.6 疗效评价标准 (1)治愈：治疗 72 h 内症状恢复正常，全身症状消失。(2)显效：治疗72 h后，腹泻症状、全身症状明显改善。(3)无效：正规治疗 72 h 后腹泻症状及全身症状均无好转，甚至加重[5]。其中，治愈、显效记为有效病例，用于计算治疗有效率，计算公式：有效率=(治愈病例+显效病例)/总病例×100%。

2 结果

2.1 病毒感染组及细菌感染组患儿发病年龄比较 病毒及细菌性腹泻病例均以1～12个月(婴儿期)、1～3岁(幼儿期)多见。见表1 。

表1 两组腹泻患儿发病年龄比较 例(%)

2.2 病毒感染组、细菌感染组及健康对照组T淋巴细胞亚群水平比较 病毒感染组及细菌感染组CD4+比例、CD4+/CD8+值均低于健康对照组(P<0.05)，CD8+比例均高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。病毒感染组与细菌感染组比较，各数值均差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 3组患儿T淋巴细胞亚群表达水平比较

2.3 病毒感染组及细菌感染组中锌剂疗效比较 病毒补锌组治疗效果优于病毒对照组(2=4.33，P<0.05)，恢复时间短于病毒对照组(t=2.19，P=0.035)；而细菌补锌组在有效率上与细菌对照组差异无统计学意义(2=0.97，P>0.05)，但在症状恢复时间上明显优于细菌对照组(t=2.11，P=0.042)。见表3。

表3 病毒感染组及细菌感染组中锌剂疗效比较 例(%)

2.4 复诊病例治疗前后外周血T淋巴细胞亚群表达水平情况 与治疗前比较，补锌治疗后CD4+比例、CD4+/CD8+值均有所升高(t=2.60、2.46，P=0.015、0.021)，CD8+比例明显下降(t=2.08、P=0.048)，与对照组比较数值变化更为明显(t=2.07、2.35、2.09，P=0.048、0.027、0.046)。见表4。

表4 补锌治疗前后T淋巴细胞亚群表达水平比较

3 讨论

腹泻病对儿童的营养及健康状况产生严重影响。本研究结果提示住院治疗的儿童感染性腹泻病例主要发生在婴幼儿阶段，考虑可能与低年龄儿童饮食习惯，免疫功能相对低下及对脱水耐受程度低等因素有关，致使该年龄段患儿易患腹泻病，且易出现症状相对较重的病例而需要住院治疗。

细胞免疫功能是机体免疫系统的重要组成部分，在感染性腹泻的发病过程中细胞免疫功能紊乱起着重要作用[6]。CD4+为辅助性T细胞，可促进 B细胞分泌及调节免疫细胞，CD8+为细胞毒性 T细胞及抑制性T细胞，对CD4+T细胞与 B细胞有抑制作用。因此，CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+值可以反映细胞免疫功能[7-9]。本文通过研究病毒、细菌感染性腹泻患儿与正常儿童T淋巴细胞亚群值的变化证实在病毒或细菌感染病例中存在细胞免疫功能紊乱，但病毒感染组与细菌感染组之间各数值上差别不显著，尚不能说明细胞免疫功能紊乱情况在肠道病毒和细菌感染中有明显区别。

锌缺乏在儿童中较易见，尤其是生长发育迅速的婴儿时期，而在腹泻过程中，由于锌的吸收障碍及丢失增加更易导致锌缺乏[10-11]。腹泻病诊断治疗指南[12]及近年多项研究[13-16]说明，锌剂治疗在儿童腹泻病的治疗中起重要作用。锌在腹泻过程中通过改善肠道黏膜的结构和完整性，促进肠上皮再生，改善肠道黏膜屏障功能；通过改善肠道对水和钠的吸收功能，并减少水和电解质的分泌，缓解腹泻症状；此外，通过增强肠道多种酶的水平及活性，改善机体免疫功能等方面的作用来改善病情[2,17]。本文通过对肠道病毒及细菌感染患儿锌剂治疗效果的分析，得出补锌在儿童腹泻病的治疗中确实能起到缓解症状、缩短病程及提高治疗有效率的作用。

锌对机体免疫功能方面的影响主要通过参与合成 DNA和 RNA聚合酶,调节胸腺嘧啶核苷酸激酶的活性[18]，影响免疫器官细胞DNA的合成及免疫细胞的增殖分化。吴嘉惠等[19]的研究说明缺锌可使免疫细胞 DNA复制障碍，抑制免疫器官细胞的增殖分化；缺锌可使人体外周血淋巴细胞总数下降，在T淋巴细胞亚群上表现为CD4+下降更为明显，CD8+比例升高，CD4+/CD8+值下降[20-21]。本文通过比较补锌治疗前后及对照组治疗后T淋巴细胞亚群值的变化情况印证了补锌治疗有助于改善机体细胞免疫功能紊乱。

综上所述，腹泻病患儿易发生锌缺乏，而缺锌可使机体免疫功能下降，本文通过对T淋巴细胞亚群的分析，说明病毒及细菌感染性腹泻患儿确实存在细胞免疫功能障碍，而补锌治疗有助于细胞免疫功能的恢复，有助于腹泻症状的恢复。感染性腹泻患儿宜早期进行补锌治疗。