不同醇溶剂对油茶籽粕中茶皂素提取率对比

◎ 肖 涵，陈海燕

（1.吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林 长春 130118；2.长春科技学院，吉林 长春 130600）

茶皂素是山茶科山茶属植物中皂素的统称，广泛存在于各种茶类植物的根、茎、叶、花和果实中[1]，具有皂苷的一般通性，味苦、辛辣、发泡力强，易溶于含水甲醇、含水乙醇、丁醇、戊醇、冰醋酸和醋酸等[2]。茶皂素具有抗渗消炎、杀菌抗病毒、溶血活性、解酒毒、抗氧化、降血脂以及促进植物生长等作用，作为一种天然非离子型表面活性剂，具有洗涤、去污、发泡和乳化等用途。味苦有毒的茶籽饼粕，主要用于肥料、燃料、清塘剂等，资源未能得到有效利用[3]，茶籽果实提取完茶油之后的茶皂素含量可以达到12%。本文利用茶皂素可溶于醇的性质，运用醇提法进行油茶籽粕中茶皂素的提取，并对比不同醇溶剂、不同醇浓度对于茶皂素提取率的影响，以期为油茶籽粕的醇提技术提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

油茶籽粕，购于广东省梅州市平远县；茶皂素标准品，购自成都曼斯特生物科技有限公司；AB-8大孔吸附树脂，购自山东东鸿化工有限公司；甲醇、乙醇、正丁醇、正戊醇、冰乙酸和高氯酸（天津市大茂化学试剂厂，分析纯）。

1.2 仪器与设备

KQ-250DE型数控超声波清洗器，购自昆山市超声仪器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）型循环水真空泵、HH-4型数显恒温水浴锅，购自邦西仪器科技有限公司；101-0BS型电热恒温鼓风干燥箱，购自湖南力辰仪器科技有限公司；UVmini-1280紫外可见分光光度计，购自岛津仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 茶皂素的提取

油茶籽榨完油后的残渣，烘干粉碎，过20目筛，准确称取油茶籽粕粉末4份，各5.00 g，置于100 mL锥形瓶中，分别加入75 mL不同浓度的甲醇、乙醇、正丁醇和正戊醇，超声辅助提取30 min，抽滤，滤渣重复提取步骤同上，共提取3次合并滤液[4]。滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，洗脱，收集洗脱液进行浓缩干燥，得茶皂素样品。

1.3.2 茶皂素的含量测定

（1）标准曲线和回归方程的建立。准确称取茶皂素标准品0.015 0 g，溶于甲醇并定容至50 mL，备用。准确称量香草醛0.506 1 g，溶于冰醋酸并定容至10 mL，备用[5]。精密量取茶皂素标准液0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL和1.0 mL于6支比色管中，水浴蒸干，再向每支比色管加0.8 mL高氯酸、0.2 mL已配好的香草醛-冰醋酸溶液，70 ℃水浴30 min，然后冰浴5 min后向各比色管加入5 mL冰醋酸，550 nm处测定吸光值[6-8]。以吸光度为纵坐标（y），标准溶液质量浓度为横坐标（x），绘制标准曲线。

（2）茶皂素含量测定。准确称取茶皂素样品0.015 0 g，溶于甲醇并定容至50 mL为样液，备用。按上述标准曲线的建立条件进行样液的吸光度测定，将吸光度代入回归方程得样品中茶皂素的含量。根据公式（1）计算茶皂素的提取率。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的绘制

在吸收波长550 nm处经香草醛-冰醋酸显色，测定不同浓度的茶皂素标准品反应液的吸光度。以茶皂素标准液浓度（mg/mL）为横坐标，吸光度为纵坐标，制作标准曲线，得到回归方程y=3.019x+0.008 9，R2=0.998 4。

2.2 不同浓度醇类对提取率的影响

检测所用的4种醇类在浓度40%～90%时对提取率的影响，将提取液纯化干燥后得到茶皂素样品，测定吸光度代入标准曲线方程得到提取量，结果见表1。

表1 不同浓度醇溶剂的提取率表

结果表明：同浓度下乙醇提取率最高，其次为甲醇、正戊醇，正丁醇最低，各醇类的提取率随浓度的升高而增大为基本趋势，甲醇和乙醇在浓度达到60%以后提取率变化不明显，达到90%时呈现下降趋势；正戊醇在40%～80%时，提取率随浓度增加而升高，浓度达到90%时呈现下降趋势；正丁醇在40%～90%时，提取率随浓度增加而升高，不同于其他三者在浓度为90%时，提取率均下降的趋势。在浓度达到90%时，各醇类对提取率影响差距最小，提取率趋近一致。

3 结论

通过试验对比甲醇、乙醇、正丁醇和正戊醇在不同浓度下对油茶籽粕中茶皂素提取率的结果，得出结论：提取剂浓度相同时，乙醇的提取率最高，其次为甲醇、正戊醇、正丁醇；不同浓度醇提时，甲醇和乙醇在浓度达到60%以后提取率变化不大，本着节约成本原则以60%为最佳提取浓度；正戊醇最佳提取浓度为80%；正丁醇最佳提取浓度90%。本研究结果表明，实验的4种醇中，同浓度下乙醇的提取率最高，正丁醇的提取率最低。以最佳经济效益为指标，选择最佳提取醇类为乙醇且浓度60%，此条件下验证试验提取率为4.52%。