奶牛隐性乳房炎诊断方法的对比试验

文 / 周庆民 冯万宇 侯美如 徐 馨 秦 博 黄 健

（黑龙江省兽医科学研究所）

奶牛隐性乳房炎是奶牛生产中最常见、最多发的疾病之一，给牧场带来的经济损失巨大。奶牛发生隐性乳房炎时，从外观上不能诊断，但乳汁中体细胞数量增多，因此，检测牛乳中的体细胞数是判断奶牛隐性乳房炎发生的主要依据。本试验分别采用凝乳试验反应法和体细胞自动计数仪检测法对牛乳体细胞数量进行检测，并以体细胞自动计数仪检测的牛乳体细胞数为基准，用凝乳试验反应法检测的牛乳体细胞数与其对比，确定凝乳试验反应法检测牛乳体细胞数的准确性。

1 材料与方法

1.1 试验牛只

黑龙江省齐齐哈尔市郊区一大型奶牛场，选择496 头无乳房炎临床症状的中国荷斯坦泌乳牛，年龄、胎次、体重、泌乳月、产奶量等不限，时间为2010年8月23日。

1.2 诊断液及体细胞自动计数仪

凝乳试验反应法诊断液由本研究室研制。体细胞自动计数仪为FossMatic 5000。

1.3 日粮与饲养管理

一切按原生产管理方法和饲养方式进行。

1.4 试验设计与方法

取每头牛的混合奶样，同时用凝乳试验反应法和体细胞自动计数仪进行检测，然后统计、对比检测结果。

1.4.1 奶样的采集

擦洗乳房后，每个乳头弃去头二把奶，然后各挤出5 mL奶，混合均匀，每头牛的奶样为20 mL，检测之前低温保存。

1.4.2 凝乳试验反应法

取混合奶样2 mL放入检验盘中，加入2 mL诊断液（用定量加液器或刻度吸管），轻轻旋转检验盘，随着摇动进行判定（在奶与诊断液混合10～25 s内判定），记录判定结果。

判定标准如下：“－”，混合物呈液状，杯底无沉淀物可见；“±”，混合物呈液状，杯底可出现微量沉淀，继续摇晃即消失。“+”，杯底出现少量粘性沉淀，但不成胶状，流动性大，摇动时，沉淀物散布于杯底，并有一定的粘附性。“++”，杯底出现较多粘稠沉淀，呈胶状，倾斜检验杯时，沉淀物有明显粘附于杯底面，并难以流动，旋转检验盘时，胶状物有聚中心倾向。“+++”，混合物几乎完全形成胶状物，并粘附于杯底、旋转检验盘时难以散开。“++++”，混合物立即呈胶状物，牛奶尚未与诊断液完全混合就已凝成胶状，牛奶出现夹心现象。

1.4.3 体细胞自动计数仪检测法

按照FossMatic 5000体细胞自动计数仪检测方法分别对每份奶样进行体细胞数检测，记录检测结果。

2 结果与分析

2.1 FossMatic 5000检测情况

从表1可以看出，在检测的496 头奶牛中，体细胞数在50 万个/mL以上的有167 头，占33.67%。

2.2 凝乳试验反应法检测情况

从表2可以看出，在检测的496头奶牛中，体细胞数在“+”以上的176 头，占35.48%。

2.3 凝乳试验反应法检测与FossMatic 5000检测结果的比较

从表3可以看出，在FossMatic 5000检测体细胞数0～49 万个/mL的329 头奶牛中，凝乳试验反应法检测“-”或“±”的奶牛为317 头，相符率为96.35%；FossMatic 5000检测体细胞数在50 万个/mL以上的167 头奶牛中，凝乳试验反应法检测一个“+”以上的奶牛为161 头，相符率为96.41%。

从表4可以看出，体细胞数在29 万个/mL以上，凝乳试验无反应，可判断为“-”；体细胞数在30 万～49 万个/mL，凝乳试验略有变化，可判断为“±”；体细胞数在50 万～79 万个/mL，凝乳试验反应轻微，反应缓慢，可判断为“+”；体细胞数在80 万～149 万个/mL，凝乳试验反应明显，反应速度较快，可判断为“++”；体细胞数在150 万～499 万个/mL，凝乳试验反应较重，反应速度快，可判断为“+++”；体细胞数在500 万个/mL以上，凝乳试验反应严重，反应瞬间完成，可判断为“++++”。

表1 FossMatic 5000检测牛乳体细胞数情况

表2 凝乳试验反应法检测牛乳体细胞数情况

表3 凝乳试验反应法与FossMatic 5000检测结果对比

3 讨论与结论

3.1 牛奶中体细胞的主要成分是白细胞，健康乳腺奶中不同类型的体细胞百分比不同，其中巨噬细胞占60%，淋巴细胞占25%，嗜中性或多型核嗜中性白细胞占15%，国际上通常用每毫升奶中体细胞数（SCC/mL）来表示。奶牛的免疫系统通过释放中性粒细胞吞噬和破坏细菌，帮助修复由于感染而受损的乳腺分泌组织，乳房感染发炎后，大量白细胞进入乳腺，部分上皮细胞脱落，使乳汁中体细胞数显著升高，因此，在被感染的乳腺中体细胞的数量增多。本次试验中随着乳中体细胞数量的增加，凝乳试验反应程度增强，表明凝乳试验判断隐性乳房炎的可靠性、准确性和可行性。

3.2 正常情况下，牛奶中含体细胞数为2 万～20 万个/mL，国际上将每毫升50 万个体细胞数定为乳房炎的基准。根据本试验结果，采用FossMatic 5000检测法，得到的隐性乳房炎诊断率是33.67%，凝乳试验反应法诊断率是35.48 %，两种方法诊断率接近，差异不显著，而且体细胞数量的变化与凝乳试验反应法的奶样变化程度基本相符，都能准确地反映出奶牛隐性乳房炎的发病率。其数据的差异可能是凝乳试验反应法存在眼观判断误差造成的。

3.3 以FossMatic 5000检测的体细胞数为基准，凝乳试验反应法隐性乳房炎阴性诊断相符率为96.35%，隐性乳房炎阳性诊断相符率为96.41%，由此可以确定凝乳试验反应法诊断准确率在96%以上。