涎腺腺样囊性癌组织中神经生长因子表达及其临床病理特征的Meta分析

陈 伟，董 震，苏 寒，曹 罡，孟昭业，张森林

0 引 言

SACC是口腔颌面部常见的涎腺恶性肿瘤。国内统计 SACC 占涎腺肿瘤的 9.95%［1］，国外统计SACC占涎腺肿瘤的7.5%［2］，是最具特征性的涎腺恶性肿瘤之一，其主要表现为侵袭性强，局部易复发;易远处转移，以肺转移多见，转移率高达40%;有典型嗜神经性，早期即可沿神经侵袭和转移，导致面瘫、麻木、疼痛等神经受损症状，给临床治疗带来很大的困难，预后差［3］。PNI是SACC最典型的生物学行为之一，术中甚至术前准确判断患者是否发生PNI以及PNI的具体范围已成为影响SACC患者预后和生存质量的重要因素［4］。SACC发生PNI的详细机制尚不清楚，但已有研究表明与一些基因有密切联系，其中NGF在SACC的PNI过程中起到重要作用。

随着研究的深入，国内外学者针对NGF表达与SACC及其不同临床病理特征、尤其是与PNI之间的关系进行了大量的研究，但结论不尽相同。较多研究显示NGF的表达与SACC病理分型有关，实性型 NGF 的表达高于腺样/管状型［5－15］;而另一些研究则表明NGF的表达与SACC病理分型无关［16－18］。有研究表明 NGF的表达与 SACC不同TNM 临床分期相关［13，15］，而另有研究认为 NGF 的表达与SACC临床分期无关［17－18］。而对于NGF的表达与SACC PNI之间的关系，研究结论基本一致，均认为发生PNI的SACC组织中，NGF的表达水平相对较高［5－19］。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 纳入标准 ①研究设计及研究对象:国内、外公开发表的、并提供原始数据的包含NGF表达与SACC及其临床病理特征关系的病例对照研究;

②所有病例均有完整的临床病理资料，取材前均未经放疗或化疗。对照可为因其他原因行涎腺切除的正常涎腺组织，也可选择为已知NGF阳性切片。病例与对照均不受性别、年龄、种族限制;③各文献所研究的问题以及研究方法相似;④NGF的检测方法为链菌素亲生物素-过氧化物酶免疫组化法(SP法)，评定标准采用半定量记分法，阳性细胞数及染色强度两项计分相乘≥3分为阳性;⑤对于重复发表或资料雷同的研究只保留其中质量最好的研究。

1.1.2 排除标准 ①组织来源非涎腺或腺样囊性癌;②检测的为NGF受体;③NGF的检测方法为非SP法，及阳性判断标准不一致者;④重复报告、资料雷同、质量较差等无法利用的文献;⑤综述和摘要等。

1.2 资料检索 计算机检索 Cochrane Library、PubMedline、CBMdisc、CNKI、VIP、万方数据库，并辅以文献追溯的方法，收集国内公开发表的所有关于NGF表达与腺样囊性癌及其临床病理特征关系的病例对照研究。检索词包括NGF、nerve growth factor、神经生长因子和腺样囊性癌。

1.3 质量评价标准 参考 Lichtenstein等［20］的病例对照研究评价指南，对各独立研究从以下几方面进行质量评估，以考察各个研究是否存在偏倚及其影响程度:①实验设计是否科学;②研究对象的纳入标准及其基本构成特征是否明确;③处理因素及其方法是否准确;④统计方法是否恰当;⑤是否就本研究存在的偏倚进行了讨论。以上5项，每满足一项为1分，总分≥3分者，质量可靠。

1.4 文献筛选及资料提取 阅读文题和摘要进行初筛，并从排除的文献中随机抽取20%进行全文阅读，检查一致率，结果为100%。阅读全文进行二次筛选，最终根据纳入与排除标准决定文献是否被纳入。从纳入文献中提取的信息包括:编号、文题、作者、发表年限、原始文献出处、样本大小、腺样囊性癌其组织病理分型、有无PNI和临床分期等。

1.5 统计学分析 分析采用RevMan5.0软件，计算优势比(odds ratio，OR)及其95%可信区间(confidenceinterval，CI)作为效应量表示结果。首先对纳入的原始文献进行异质性检验，根据异质性检验结果选择固定效应模型或随机效应模型求其效应合并值。如果异质性检验P＞0.1，认为各研究间是非异质性，选用固定效应模型分析，效应分析以P＜0.05为有统计学意义。如果异质性检验P＜0.1，I2＞50%时，则分析异质性的来源，并进行亚组分析和随机效应模型分析，如果异质性过大，则不进行合并分析。

2 结 果

2.1 文献筛选流程 最终纳入6篇病例对照研究［8－13］。见图 1。

图1 文献筛选流程图及结果Figure 1 Flowchart of literature selection and results

2.2 纳入研究的基本特征和质量评价 纳入的6个研究［8－13］共包括 267个病例。其中有 3个研究［9，12，17］未报告正常涎腺对照组的例数，不纳入SACC组和正常涎腺对照组NGF表达情况的Meta分析;6个研究［8－13］均完整报告了SACC不同病理组织类型及有无PNI分组中NGF的表达;仅1个研究［17］完整报告了SACC不同临床TNM分期中的NGF的表达，故未行相应临床病理特征的Meta分析。见表1。

表1 纳入文献的基本特征和质量评价Table 1 Basic features and quality evaluation of the selected literature

2.3 NGF表达分析结果

2.3.1 SACC与正常腮腺对照组中NGF表达 有3 篇文献［8，10，15］报告了 SACC 组和正常腮腺对照组的NGF表达情况，其中SACC组267例、正常涎腺对照组44例。因NGF在正常涎腺导管细胞均有弱阳性表达，故比较SACC与正常腮腺腺泡细胞中的NGF表达水平。因各研究间有统计学异质性(P=0.09，I2=58%)，故采用随机效应模型进行Meta分析。结果显示，2组NGF表达差异有统计学意义［OR=46.70，95%CI(3.30，661.71)，P=0.004］。见图2。

2.3.2 NGF在SACC不同病理组织分型中的表达共纳入6篇文献［8－13］。SACC 腺样/管状型与实性型的例数分别为199、68例。因各研究间无统计学异质性(P=0.33，I2=13%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示2组NGF表达差异有统计学意义［OR=0.41，95%CI(0.20，0.86)，P=0.02］。见图3。

2.3.3 NGF在SACC有无PNI分组中的表达共纳入6篇文献［8－13］。SACC临床PNI组与临床未侵袭神经组例数分别为137、130例。各研究间无统计学异质性(P=0.99，I2=0%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示2组间NGF表达差异有统计学意义［OR=7.14，95%CI(3.49，14.60)，P ＜0.00001］。见图4。

图2 正常腺泡与SACC中NGF表达的Meta分析Figure 2 Relationship of NGF experssion with SACC

图3 SACC不同病理组织分型中NGF表达的Meta分析Figure 3 NGF expression in different pathological tissue types

图4 SACC有无嗜神经侵袭分组中NGF表达的Meta分析Figure 4 NGF expression in the PNI and non-PNI groups of SACC

3 讨 论

PNI是SACC的一种重要生物学特性，是指肿瘤细胞充填于神经周围间隙，呈连续的同心圆鞘样包绕神经并沿着神经浸润［21］。涎腺组织中富含神经决定了SACC容易发生神经浸润，这也构成了SACC易于发生PNI的解剖结构基础。既往研究表明，NGF能调控中枢和周围神经系统多种神经细胞的生长、发育和再生，并可以影响肿瘤细胞的增生、分化及凋亡［22－23］。有学者发现前列腺癌等具有嗜神经性的恶性肿瘤中存在NGF过表达现象，提示肿瘤的PNI可能与NGF有关［24］。随着研究深入，NGF的其他作用陆续被发现。Sortino等［25］在前列腺癌细胞株LNCaP中加入NGF，结果提示NGF可促进癌细胞增殖;张玉波等［26］用Wistar大鼠实验证实NGF能促进毛细血管的生成。越来越多的资料显示，NGF表达与SACC及其临床病理特征、尤其是与PNI现象间存在关联。

目前国内、外资料均显示，NGF在SACC组织中高表达，在正常涎腺导管细胞中均有弱阳性表达，而在正常涎腺腺泡细胞中均不表达。本Meta分析亦提示SACC组中NGF表达显著高于正常涎腺腺泡细胞组［OR=46.70，95%CI(3.30，661.71)，P=0.004］。NGF表达水平与SACC不同病理组织分型的关系尚不明确。多数研究认为，NGF表达水平与SACC病理分型有关，实性型NGF的表达高于腺样/管状型［5－15］，但尚德浩［16］、骆树榆［17－18］报道不同病理分型中NGF表达水平无显著性差异。本文研究结果说明SACC腺样/管状型中NGF表达水平低于实性型［OR=0.41，95%CI(0.20，0.86)，P=0.02］。目前研究均认为NGF表达与SACC PNI行为间有联系，发生PNI行为的SACC组织中NGF表达水平显著高于未发生PNI者［5－19］。本Meta分析结果显示，NGF表达水平在SACC有、无PNI分组中存在显著性差异［OR=7.14，95%CI(3.49，14.60)，P ＜0.00001］，提示 NGF 过表达对 SACC PNI行为的促进作用。

本研究也存在一定的局限性:纳入研究以中文文献为主且数量偏少，缺乏灰色文献(如专题讨论会记录、未发表的资料、政府研究报告和其它非传统文献来源的证据)，可能会漏掉阴性结果的研究而产生发表偏倚。因此，需要开展更多设计严谨的高质量流行病学研究来进一步证实NGF的表达与SACC之间的关联，以期为该肿瘤的治疗和预后干预提供更强的循证医学证据。

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