早产儿蛋白质代谢中质谱-色谱技术的应用及其临床意义分析

朱小敏 陈玉芳 朱恬玲

[摘要] 目的 探讨质谱-色谱技术在产儿蛋白质代谢中的应用效果及其临床意义。方法 方便选择2016年5月—2018年5月广东省珠海市中西医结合医院早产儿50例作为对象，设为观察组;选择同期分娩的足月儿50例，设为对照组。两组胎儿娩出后均完成尿液标本的采集，采用尿素酶预处理-气相色谱-质谱法（UP-GC-MS）完成两组尿液中的赖氨酸、苯丙氨酸、鸟氨酸、组氨酸、延延胡索酸及苹果酸的水平测定。结果 观察组早产儿质谱-色谱技术测定后赖氨酸含量为0.20 mg/mL、苯丙乙酸含量为0.02 mg/mL、组氨酸含量为1.23 mg/mL，明显低于对照组足月儿（P<0.05）;观察组早产儿检验尿液鸟氨酸平均秩次为29.49显著低于对照组的平均秩次45.57（t=-4.887）;观察组延胡索酸平均值為29.39，显著低于对照组的平均值45.57（t=8.524）;观察组苹果酸平均值为29.98，显著低于对照组平均值45.57（t=-2.720），差异有统计学意义（P<0.05）。结论 早产儿的蛋白质分解代谢水平较低，而足月儿的蛋白质分解代谢水平较高。尿代谢物的测定可用于评估临床工作中新生儿的代谢状态，以进一步指导临床实施理性营养支持计划。

[关键词] 质谱-色谱技术;早产儿;应用效果;临床意义

[Abstract] Objective To explore the application effect and clinical significance of mass spectrometry-chromatography in protein metabolism of infants. Methods From May 2016 to May 2018， 50 cases of premature infants in Zhuhai Integrated Hospital of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine in Guangdong Province were convenient selected as the observation group; 50 cases of term infants who delivered at the same time were selected as the control group. Uterine samples were collected after the fetuses were delivered in both groups. Urinease pretreatment-gas chromatography-mass spectrometry （UP-GC-MS） was used to complete the lysine， phenylalanine， and ornithine in the two groups， histidine， fumaric acid and malic acid. Results The lysine content of preterm infants in the observation group was 0.20 mg/mL， the content of phenylpropionic acid was 0.02 mg/mL， and the histidine content was 1.23 mg/mL（P<0.05）; the average rank of urine ornithine in the observation group of preterm infants was 29.49， which was significantly lower than the average rank of the control group， 45.57（t=-4.887）; The average value was 45.57（t=8.524）; the average malic acid in the observation group was 29.98， which was significantly lower than the average 45.57 in the control group（t=-2.720）. The difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The level of protein catabolism in preterm infants is low， while the level of protein catabolism in term infants is high. The determination of urinary metabolites can be used to evaluate the metabolic status of newborns in clinical work to further guide the clinical implementation of rational nutrition support programs.

[Key words] Mass spectrometry-chromatography; Premature infants; Application effect; Clinical significance

在胎龄前37周出生的活产称为早产或未成熟儿。随着我国医疗技术的不断发展，早产儿的存活率也有所提高。但是，存活的早产儿常伴有多种并发症[1]。部分患儿营养干预后容易增加心血管系统疾病、糖尿病及肥胖症等并发症。因此，加强早产儿三大代谢物质的精确评估，对指导临床营养干预具有重要的意义[2]。该文以2016年5月—2018年5月广东省珠海市中西医结合医院早产儿50例作为对象，探讨质谱-色谱技术在产儿蛋白质代谢中的应用效果，以及在临床中的意义，现报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选取广东省珠海市中西医结合医院50例早产儿作为对象，设为观察组，男26例、 女24例;胎龄28～36周，平均（30.50±2.15）周;Apgar评分6～8分，平均（7.12±0.53）分。选择同期分娩的足月儿50名，设为对照组，男27名、女23 名;胎龄在37～41周，平均（32.12±2.03）周;Apgar评分8～10分，平均（7.32±0.55）分，无合并症，血气分析pH和乳酸值在正常范围内。该研究经过伦理委员会批准，患者及家属知情同意，且前述知情同意书。

1.2  方法

①仪器和设备。气相色谱-质谱联用仪（日本，Q1000型），试管浓缩器（VAIX-SMART技术有限公司，型号：TC-8F）、试管浓缩氮吹仪（型号：L-129A）、色谱柱（日本Ultra Alloy+5UA5-30M-0.25F）、离心机（型号：5417C）。②标本采集。观察组与对照组入院后完善有关检查，均在出生后24 h内采集尿液标本3 mL，标本采集时详细记录患儿的住院号，出生体重，胎龄以及诊断标本收集的时间等，然后用干净的尿袋收集大约2 mL左右的清洁尿液，并接尿液将放置于普通干燥的实验管之内，或者是浸透在专用尿液收集的滤纸片之后用油性记进行标记，需要标记研究对象的编号和姓名，接着将尿液放置于负20℃的冰箱里进行冷藏，然后，在1 周内用气相色谱-质谱联用仪检测尿代谢物，并对尿代谢物进行分析，检测相应水平的尿代谢物，主要指标包括赖氨酸，苯丙氨酸，组氨酸以及鸟氨酸等。

1.3  观察指标

①两组的赖氨酸，苯丙乙酸以及组氨酸水平。比较两组研究对象的两组的赖氨酸，苯丙乙酸以及组氨酸水平（正常值得倍率）。②尿液鸟氨酸的平均秩次。比较两组研究对象尿液鸟氨酸的平均秩次，包括延延胡索酸以及苹果酸的平均秩次（正常值得倍率）。

1.4  统计方法

采用SPSS 18.0统计学软件处理数据，计数资料采用[n（%）]表示，行χ2检验;计量资料采用（x±s）表示，行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  赖氨酸、苯丙酸和组氨酸水平

观察组早产儿质谱-色谱技术测定后赖氨酸、苯丙乙酸以及组氨酸水平，均低于对照组足月儿，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2  尿液鸟氨酸、延胡索酸与苹果酸平均秩次

早产儿尿液中鸟氨酸，延胡索酸和苹果酸的含量明显低于足月儿，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3  讨论

质谱-色谱技术作为一种临床医学上研究代谢组学的重要方法，同时也是一种能够高通量化学分析和多维统计的全新的分析方法。根据相关的国内外的研究表明[3-4]，该项技术应用于新生儿能够为早期诊断以及监测新生儿疾病的重要生物标志物提供非常重大线索[5]。

该次研究当中观察组早产儿质谱-色谱技术测定后赖氨酸含量为0.20 mg/mL、苯丙乙酸含量为0.02 mg/mL、组氨酸含量为1.23 mg/mL，明显低于对照组足月儿（P<0.05）。相关研究者[6]等在《质谱-色谱技术在早产儿蛋白质代谢中的应用研究》中对质谱-色谱技术在产儿蛋白质代谢中的应用效果及其临床意义研究结果显示，早产儿组的尿液中赖氨酸、苯丙氨酸、组氨酸水平明显低于足月兒组，该研究中结果和有关研究结果相差无几。说明对于早产儿来说，其体内的赖氨酸，苯丙氨酸以及组氨酸的水平都明显的高于足月儿，产生的主要的原因是由于早产儿的胎龄小，而新生儿体内的原始氨基酸的储备量则主要来源于妊娠晚期的太热时期[7-8]。苹果酸在人体中属于三羧酸循环的中间产物，具有护肝的作用，能够有效改患人体的脑组织的能量代谢。早产儿在出生后的营养供给的主要来源是肠道外营养，因此，在临床上选择一种适合早产儿的氨基酸制剂是十分重要。该研究观察组早产儿检验尿液鸟氨酸平均秩次为29.49显著低于对照组的平均秩次45.57;观察组延胡索酸平均值为29.39，显著低于对照组的平均值45.57;观察组苹果酸平均值为29.98，显著低于对照组平均值45.57，差异有统计学意义（P<0.05），相关研究者[6]在《质谱-色谱技术在早产儿蛋白质代谢中的应用研究》中研究结果显示，观察组尿鸟氨酸平均值为29.5，富马酸平均值为29.4，苹果酸平均值为30.01，其结果与该次研究结果差别不大，说明利用质谱-色谱技术对于早产儿蛋白质代谢产物的筛查具有很好的效果，检验有效度较高。

综上所述，质谱-色谱技术用于早产儿蛋白质检测中能了解其分解代谢情况，早产儿的蛋白质分解代谢水平较低，而足月儿的蛋白质分解代谢水平较高，从而进一步指导临床实施合理的营养支持计划。

[参考文献]

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[4]  李亮，陈笑艳，钟大放. 液相色谱-质谱联用技术在药物代谢产物鉴定中的应用[J]. 质谱学报，2017，38（4）：375-387.

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[6]  Liu Yan，Ouyang Diqing，Ye Yufeng，et al. Simultaneous determination of thiamethoxam，clothianidin，spirotetramat and its metabolite residues in tomato by QuEChERS combined with ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J].Journal of Instrumental Analysis，2017，36（12）：1431-1438.

[7]  杜苑琪，肖小华，李攻科.原位衍生化技术在液相色谱和液相色谱-质谱联用分析中的应用[J].色谱，2018，36（7）：13-21.

[8]  魏云计，朱臻怡，冯民，等. 高效液相色谱-串联质谱快速测定饲料中硝基咪唑类药物及其代谢物残留[J]. 分析测试学报，2017，36（3）：377-381.

（收稿日期：2020-02-09）