血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白对恶性妇科肿瘤诊断的临床检测

杨 春

兖矿集团公司总医院，山东邹城 273500

妇科肿瘤主要包括外阴肿瘤、阴道肿瘤、子宫肿瘤、卵巢肿瘤和输卵管肿瘤。其中子宫及卵巢肿瘤多见，外阴及输卵管肿瘤少见。随着分子生物学的进展，当前血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白是用于妇科肿瘤诊断的可行方法。Ⅰ类主要组织相容性复合体链相关蛋白A(MICA)，具有编码、表达和转录蛋白质功能。MICA蛋白的表达在正常组织较少，但在肠道上皮组织表达量稍高，但在多种肿瘤细胞，尤其是上皮源性的肿瘤均有不同程度的表达，并很可能与妇科肿瘤的发生、发展密切相关。C-反应蛋白（CRP）是一种急性时相蛋白，它由肝细胞产生，但其产生机制尚不清楚，可能与白细胞介素和前列腺素有关。正常人血清中C-反应蛋白含量极微，当机体处于验证或组织损伤状态时则C-反应蛋白会出现增高，而恶性肿瘤组织损伤严重，故会出现CRP升高的现象。α1-酸性糖蛋白（α1-AG）也是一种急性时相蛋白,在多种病理状态下该蛋白将会发生特征性变化,在急性感染、损伤以及癌症患者中,血清α1-AG含量呈不同程度升高。

本研究将构建受试者工作特征ROC曲线模型，综合评价血清Ⅰ类 MHC 链相关蛋白 A（MICA）、C-反应蛋白（CRP）、α1-酸性糖蛋白（α1-AG）三种方法诊断恶性妇科肿瘤的效果并进行对比分析，以期为我国恶性妇科肿瘤寻找最佳的实验诊断方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选用我院2010年2月～2011年10月47例恶性妇科肿瘤患者，年龄54～85岁，平均年龄（62.85±5.97）岁。同时选择同期的健康体检者20例作为健康对照组，年龄49～81岁，平均年龄（61.13±4.84）岁。实验组均经病理诊断确诊为恶性妇科肿瘤患者。排除标准①意识障碍、生命体征不稳定；②房颤等其他疾病；③严重精神疾病症状，临床不能配合的患者；④严重肝肾疾病患者及严重全身消耗性疾病患者；⑤入院1周前有重大手术史；⑥异型蛋白血症。所有入选者均签署知情同意书。

1.2 检测方法、仪器及试剂

ELISA法检测血清MICA水平，人类MICA-ELISA试剂盒，牛血清清蛋白(BSA)，NaCl，KCl，Tween-20、Na2HPO4、KH2PO4、H2SO4等均购自Sigma公司，全波长酶联仪购自美国Sunrise公司；采用免疫单纯扩散法检测血清CRP水平，抗CRP血清、单扩板、标准品均购自南京大学武进生化实验工厂；采用透射混浊法测定血清α1-AG水平,宝灵曼试剂盒,奥林巴斯640型全自动生化分析仪。以上检测均按操作说明进行。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 检验结果的描述性统计

实验组与对照组的MICA、CRP、α1-AG的描述性统计结果。见表1。

表1 实验组与对照组的MICA、CRP、α1-AG描述性统计（±s）

表1 实验组与对照组的MICA、CRP、α1-AG描述性统计（±s）

MICA（ng/mL）CRP（mg/L） α1-AG（mg/L）实验组对照组0.79±0.27 0.32±0.14 42.16+2.32 1.04±0.14 2130.13±650.24 625.91±180.72

2.2 对照组与实验组的平均值的显著性t检验

实验组与对照组的MICA、CRP、α1-AG的平均值的显著性t检验结果。见表2。

表2 实验组与对照组的MICA、CRP、α1-AG的显著性t检验

通过平均值的显著性t检验，可以看出在1%的显著性水平下，恶性妇科肿瘤患者的MICA、CRP、α1-AG指标均显著大于对照组的数值。

2.3 不同检测方法间的相关性

对MICA、CRP、α1-AG这些方法进行相关性检验，结果显示，这些方法间有一定的相关性。

表3 不同检测方法间的相关性

2.4 应用ROC曲线评价3种诊断方法的预测价值

根据ROC曲线法诊断切点的灵敏度和特异度，可以以灵敏度与特异度之和的最高值为诊断最优切点，不同检测方法诊断AR准确性以ROC曲线下面积（AUROC）表示：MICA监测AR灵敏度、特异度和AUROC为97.8%、76.2%、0.810；CRP为97.8%、57.1%、0.918；α1-AG 为 93.5%、95.2%、0.835（具体内容见表 4，表5，ROC曲线及 AUC见图 1）。

表4 ROC曲线的分析结果

表5 3种检测方法不同诊断界值筛查效果分析

图1 ROC分析结果

3 讨论

恶性妇科肿瘤的实验诊断尚缺乏“金标准”。理想的检测方法应具有良好的灵敏度和特异度。因此本研究选用MICA、CRP、α1-AG三种标志物作为观察指标，并利用ROC曲线法对诊断阈值的设定，对AR进行筛查，并对各种筛查方法进行灵敏度、特异度和准确性评价，进一步提高诊断效能。ROC曲线指受试者工作特征曲线 (receiver operating characteristic curve),是反映敏感性和特异性连续变量的综合指标,是用构图法揭示敏感性和特异性的相互关系，它通过将连续变量设定出多个不同的临界值，从而计算出一系列敏感性和特异性，再以敏感性为纵坐标、（1-特异性）为横坐标绘制成曲线，曲线下面积越大，诊断准确性越高。在ROC曲线上，最靠近坐标图左上方的点为敏感性和特异性均较高的临界值。本研究的结果显示：MICA>0.3338(ng/mL)、CRP>3.0254(mg/mL)或 α1-AG>428(mg/mL)的患者可认为存在AR。ROC曲线下面积反映诊断试验的准确性，实验结果提示AUROC：CRP>α1-AG>MICA。可以认为，相比于其他两种监测方法，CRP的诊断准确性最好，更有助于指导临床的恶性妇科肿瘤的诊断。

C-反应蛋白是1930年学者Tillett等在急性大叶性肺炎患者的血清中发现的。CRP是人类重要的急性期反应蛋白，在急性期其浓度可升高上千倍，循环中的CRP半衰期为19h，它作为一种急性时相蛋白已经广泛用于炎症疾病的诊断。CRP阳性，可见于多种疾病如：肾炎、肺炎、各类恶性肿瘤及各种急性感染、体外伤以及组织坏死、心肌梗死、心功能不全、多发性骨髓瘤、白血病、胆石症、肝炎、痢疾、风湿热等疾病。近年来国际上已经有较多文献报道建议把CRP作为诊断恶性肿瘤疾病的一个重要指标。此外据文献报道，CRP的临床测定值随着临床分期的增加而升高，因此在产科临床上可以通过动态监测CRP水平来了解患者病情的严重程度并作为判断疾病的预后情况，以达到妇科恶性肿瘤“早诊断、早治疗”原则的目的，并有望根据标志物检验值的改变，调整临床的治疗方案，提高恶性妇科肿瘤患者的存活率。

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