刺山柑的提取工艺考察

时间：2024-07-28

程立华张卫东

（新疆克拉玛依市中心医院药剂科新疆克拉玛依市 834000）

刺山柑的提取工艺考察

程立华张卫东

（新疆克拉玛依市中心医院药剂科新疆克拉玛依市 834000）

目的考察刺山柑乳膏中刺山柑的最佳提取工艺。方法采用单因素实验，以盐酸水苏碱含量和醇浸出物得率为指标综合评价，对影响提取效率的主要因素-乙醇浓度、提取温度、加醇量、提取时间、提取次数进行考察。在单因素的基础上进行正交实验，优选出最佳提取工艺。结果刺山柑提取工艺条件在80℃水浴中，加10倍量95%乙醇提取2次，每次0.5h为最佳组合条件。结论此方法提取刺山柑简单易行，产率较好，符合生产要求。

刺山柑盐酸水苏碱含量醇浸出物得率提取工艺

本试验采用单因素实验[3]，以盐酸水苏碱含量和醇浸出物得率为指标综合评价，对影响提取效率的主要因素-乙醇浓度、提取温度、加醇量、提取时间、提取次数进行考察。在单因素的基础上进行正交实验，优选出最佳提取工艺。

1 仪器、设备与材料

UV-2501PC型紫外分光光度计（日本岛津制造所）；Sartorius电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；SZ-93自动双重纯水蒸馏器（巩义市英峪予华仪器厂）；KQ-100DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；101A-2型数显电热鼓风干燥箱（上海锦屏仪器仪表有限公司通州分公司）；DZKW-S-6电热恒温水浴锅（北京永光明医疗仪器厂）；KDM型调温电热套（山东省鄄城永兴仪器厂）。盐酸水苏碱对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号分别为712-200105、110712-200508；硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白凡士林、甘油、十二烷基硫酸钠、月桂氮卓酮、对羟基苯甲酸乙酯均为药用规格。水为超纯水，乙醇为药用级；其余试剂均为国产试剂AR级。

表1 因素水平表

表2 L9(34)正交试验表

表3 方差分析表

2 方法

2.1 对照品溶液的制备

精密称取干燥至恒重的盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含220μg的溶液，即得。

2.2 供试品溶液的制备

取醇/水提取液，滤纸过滤，精密量取续滤液25mL，置蒸发皿中，水浴蒸干，精密加入0.1mol/L盐酸10mL使溶解，加活性碳0.5g，置水浴中加热半分钟，搅拌滤过，滤液置25mL量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液分次洗涤，备用。

2.3 测定法

精密量取对照品及供试品各10mL，置25mL容量瓶中，另取0.1mol/L盐酸溶液20mL，置25mL容量瓶中，在对照品溶液、供试品溶液及0.1mol/L盐酸溶液中，各精密加入新制的2%雷氏盐溶液3mL，摇匀，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，置冰浴中放置1h，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以0.1mol/L盐酸溶液为空白，照分光光度法，在520nm波长处分别测吸收度，用空白试剂的吸收度分别减去对照品与供试品的吸收度，计算，即得。

2.4 单因素试验

(1)乙醇浓度：称取刺山柑30g5份，分别加10倍量95%乙醇、75%乙醇、55%乙醇、35%乙醇、水提取3次，每次1h，滤液合并，定容至1000mL，考察总生物碱含量和浸出物得率，得出：乙醇浓度为95%时提取刺山柑达到最高。（2）加醇量考察：称取刺山柑30g5份，分别加6倍、8倍、10倍、12倍、14倍量95%乙醇提取3次，每次1小时，滤液合并，定容至1000mL，考察总生物碱含量和醇浸出物得率，得出：加14倍量95%乙醇时提取的刺山柑量达到最大。（3）提取时间考察：称取刺山柑30g5份，加10倍量95%乙醇提取3次，每次提取不同的时间(15min、30min、45min、60min、90min），滤液合并，定容至1000mL，考察总生物碱含量和醇浸出物得率，得出：60min为提取刺山柑的最佳时间。（4）提取温度考察：称取刺山柑30g5份，分别加10倍量95%乙醇提取3次，每次30min，用不同的温度提取(50℃、60℃、70℃、80℃、90℃)，滤液合并,定容至1000mL，考察总生物碱含量和醇浸出物得率，得出：刺山柑提取温度选择为80℃。(5）提取次数考察：称取刺山柑30g4份，分别加10倍量95%乙醇提取不同的次数(1、2、3、4次），每次30min，用80℃提取，滤液合并，定容至1000mL，考察总生物碱含量和醇浸出物得率，得出：提取次数为2次最合适。

由以上结果可见，刺山柑醇浓度，提取时间，加醇量对综合指标影响较大，故固定提取温度为80℃，提取次数为2次，对醇浓度，提取时间，加醇量3个因素进行正交试验，综合考察各因素对综合指标的影响。

2.5 正交试验

通过单因素试验结果，初步确定了各因素各水平的大致用量范围，在此基础上，固定生药粒度为饮片，采用L9（34）正交实验考察溶剂量、提取时间、提取次数三个因素对盐酸水苏碱含量和醇浸出物得率的影响，试验安排见表1，结果见表2，方差分析结果见表3。

由表1可知，各因素对综合评分的影响大小顺序为：A（醇浓度）>C（加醇量）>B（提取时间）；每个因素3个水平之间的趋势为A3>A2>A1，B1>B3>B2，C3>C1>C2，直观分析得提取工艺为A3B1C3，即加14倍量95%乙醇提取2次，每次0.5h。根据表7方差分析结果表明：A因素的影响有显著性（P<0.05），B和C因素的影响均无显著性（P>0.05），从大工业生产和节能降耗等全面综合考察，以A3B1C1组合为佳。