时间:2024-07-28
田微微
(南通市疾病预防控制中心 江苏南通 226000)
近年来随着人们健康意识的增强,食品安全成为社会热点话题[1]。在食品加工生产中,若未能按照国家标准进行卫生管理,易造成微生物超标[2]。现阶段,在我国的食品安全监督管理中,会对抽检样品的菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌含量进行检验,平板菌落计数法、纸片法、TTC检验较为常用[3]。本文对平板菌落计数法在食品卫生微生物检验中的作用进行探讨,以期为相关研究提供参考。
研究时间为2021年2月—2021年5月,研究对象为我中心收到的120份食品样品,研究方法为平板菌落计数法。
在开始检验前先做好检验准备工作,按照培养基说明进行制备,在高压灭菌消毒后将其置入恒温水浴锅中(46℃),测试纸片需恢复常温后才能使用。
平板菌落计数法的食品样液均需要按照GB 4789.2-2016进行制备。准备质控样品,在无菌条件下,准备60 ml的灭菌后生理盐水,在1 min内开启冻干样品西林瓶盖,取4 ml样品进行水化;在其完全被溶解后吸出溶液至无菌锥形瓶内,用剩余的稀释液进行西林瓶内壁清洗,将清洗液置入无菌瓶,即待测样品原液(60 ml);将质控样品与食品样品样液进行10倍稀释,混匀后用1 ml的无菌吸管吸取;沿着管壁缓慢将其注入盛有9 ml稀释液的无菌试管内再次摇匀,制成100倍稀释溶液,按同样的方法稀释为1 000倍溶液。
平板菌落计数法:在无菌环境下进行操作,用1 ml的无菌吸管吸取制备好的稀释液,分别将其置于2个无菌平皿内(其中1个为对照组),同时在升温至46℃的平板计数琼脂中注入1 ml的无菌生理盐水,混匀,冷却后翻转平板在(36±1)℃下培养(48±2)h。
检查结果:以实验室检出结果为金标准,统计平板菌落计数法在不合格样品检出方面的差异。
数据计算统计软件:SPSS20.0;计数资料表示:(n,%),检验:χ2,统计学差异的判定标准:P<0.05。
在本次研究中,采用实验室综合法进行检查发现有16份样品不合格,运用平板计数法进行检测,检出不合格样品14例,与实验室检查相比较无明显差异,P>0.05,详见表1。
表1 2组检查结果比较比较(n,%)
食品安全与人们的日常生活息息相关,虽然相关机构比较关注该方面的管理与研究,但在实际生活中食品被微生物污染的事件时有发生。为减少食品安全问题,检验机构通常会从菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌3个方面进行细菌指标检查[4]。菌落总数是指将食品处理后,在一定的培养条件下取1 ml或1 g的检验样品检测其中含有的细菌菌落总数,可以通过该指标检查,来观察食品中微生物的繁殖情况,为食品的卫生检测提供更多依据[5]。
在本次研究中,采用平板计数进行检查,发现其具有以下优势:能够直观的观察到培养基上的菌落生长情况,方便检测人员进行计算、读数;具有线性范围较大的优势,梯度稀释提高了计算的线性范围,在此基础上采用菌悬液涂布,可以有效控制菌落的疏密排布程度,提高观察的重复性与平行性。
综上所述,在进行食品微生物检验时,选择平板菌落计数法可以得到较好的检验结果,在检验中需注意控制好培养皿温度,遵循无菌操作原则,减少外部环境对研究结果的影响。
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