原子吸收分光光度法测定帕瑞昔布钠中元素杂质锂的含量

贾建静 马育彪

（成都苑东生物制药股份有限公司 四川成都 611731）

1 前言

近年来，元素杂质在药品中的检测方法越来越受药品监督管理机构的重视。因为元素杂质不能为患者提供任何治疗作用，所以其在药品中的含量需要被控制在可接受的限度范围内。ICH Q3D规定，锂属于第三类元素杂质，在注射剂中要考虑锂元素的含量。帕瑞昔布钠是注射剂注射用帕瑞昔布钠的原料，帕瑞昔布钠的起始物料中可能会添加锂元素，进而残留在帕瑞昔布钠中，故需对其中的锂进行研究控制。本实验旨在建立帕瑞昔布钠中元素杂质锂含量的测定方法。

锂的检测方法通常有ICP-AES[1-2]、ICP-MS[3]、ICP-OES[4]、离子色谱法[5]、滴定法[6]。文献[3]报导火焰原子吸收分光光度法与ICP-MS分别对2.00 mg/L的标准锂溶液进行测定，结果在2种检测方法下，结果无显著差异。

原子吸收分光光度法操作简单、准确度高[7]、成本较低，广泛应用于饮用水、环保和医药行业的元素杂质检测[1]。

2 仪器与试药

仪器：原子吸收分光光度计，锂空心阴极灯，电子天平。

硝酸（优级纯），锂单元素标准液：1 000μg/mL（国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号15C0 47-1）；帕瑞昔布钠（青木制药，批号0-171002）。

3 方法与结果

3.1 测定条件

仪器：原子吸收分光光度计。

光源：锂空心阴极灯。

火焰类型：空气/乙炔。

波长：670.8nm。

工作电流：2mA。

空白溶剂：2%硝酸溶液。

3.2 对照品溶液的制备

精密量取锂单元素标准液（1 000μg/mL），用溶剂分别定量稀释制成每1 mL含锂0～2.0μg/mL的溶液，作为对照品溶液。

3.3 供试品溶液的制备

取本品约32 mg，加溶剂溶解并稀释制成每1 mL中约含0.32 mg的溶液，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

3.4 标准曲线绘制

精密量取锂单元素标准液（1 000μg/mL）2 mL，用2%硝酸稀释至50 mL，作为对照储备液；取储备液稀释制成0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.2μg/mL、1.6μg/mL、2.0μg/mL的系列标准锂溶液，按照拟定的条件进行测定，将测得的吸光度减去空白溶液的吸光度后，以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标，绘制锂的标准曲线，如表1所示。

表1 Li的标准曲线

3.5 方法的检测限与定量限

按照实验方法对空白溶液重复测定11次，由仪器读出吸光度的标准偏差，然后计算出仪器的检测限与定量限。

元素检测限公式：DL=3×SD×K。

定量限公式：DL=10×SD×K。

其中，SD为11次空白标准偏差，K为“3.4”中标准曲线斜率。

由表2可知，检测限为5.0 ng/mL，定量限为16.6 ng/mL。按ICH Q3D指导原则，Li为第三类元素杂质，其PDE为250μg/d[8]，帕瑞昔布钠制剂最大日剂量为80 mg，计算锂的限度约为0.3%，当拟定供试品浓度为0.32 mg/mL，锂限度浓度约为1.0μg/mL。根据检测限和定量限，该方法可满足定量检测要求。

表2 空白测定结果

3.6 滤膜吸附试验

本品可溶于水，但在硝酸溶剂中有帕瑞昔布析出，实验采用过滤方法除去析出的固体后进样测定，因此进行了滤膜吸附考察。

取供试品约32 mg置100 mL量瓶，加入“2.4”项下的对照储备液制成含锂量100%的加标样品。分别采用纤维素过滤头（0.45μm，滤头1）及聚醚砜过滤头（0.45μm，滤头2）过滤样品，分别弃去2 mL及5 mL初滤液，取续滤液进行测定，由仪器读出吸光度，根据“3.4”项下标准曲线计算锂的含量。试验结果见表3。

表3 滤膜吸附试验测定结果

实验结果吸附率均<2%，表明采用不同材质过滤头测定对样品结果无影响。

3.7 重复性试验

按“2.6”项下的方法平行制备6份含锂量100%的加标样品（其中，供试品中锂的含量为0），由仪器读出吸光度，根据“3.4”项下标准曲线计算锂的含量。试验结果见表4。

表4 重复性试验测定结果

由表4可知，6份样品的平均锂含量为102.2%，RSD为0.91%，表明重复性好。

3.8 中间精密度试验

2个试验者，按“3.6”项下的方法分别平行制备6份含锂量100%的加标样品，由仪器读出吸光度，根据“3.4”项下标准曲线计算锂的含量。

由表5可知，2个试验者的12份样品的平均锂含量为101.1%，12份样品的RSD为1.57%，表明方法中间精密度良好。

表5 中间精密度试验测定结果

3.9 准确度试验

精密量取锂单元素标准液（1 000μg/mL）2 mL与50 mL量瓶，作为对照储备液。精密称取供试品（0-171002）约32 mg置100 mL量瓶，加对照储备液分别制成含锂量80%、100%、120%的加标样品，各浓度平行制备3份；按“3.1”项下的方法进行测定，由仪器读出吸光度，按“3.4”项下标准曲线计算测得量，并计算回收率，实验结果见表6。

表6 准确度试验测定结果

由表5可知，9份样品的回收率在100.83%～103.40%之间，平均回收率为101.9%，RSD为0.77%，表明该方法准确度高。

3.10 溶液稳定性试验

取供试品溶液约32 mg置100 mL量瓶，加入对照储备液制成含锂量100%的加标样品，置室温下分别于0、20、80、110、120 min后，由仪器读出吸光度，按“3.4”项下标准曲线计算锂的浓度。

由表7可知，供试品溶液在室温下考察120min保持稳定。

表7 溶液稳定性试验测定结果

3.11 进样精密度

精密量取锂单元素标准液1 mL分别制成0.4、0.8、1.2、1.6、2.0μg/mL的系列标准锂溶液，按照拟定的条件进行测定，并以吸收值为横坐标，浓度为纵坐标进行线性回归，得出回归方程。一份含锂量100%的加标样品平行测定6次，由仪器读出吸光度，根据此回归方程计算锂的含量。试验结果见表8。

表8 进样精密度试验测定结果

由表8可知，样品平行测定6次，平均锂含量为100.3%，RSD为0.54%，表明进样精密度良好。

4 结论

本试验采用火焰原子吸收分光光度法测定帕瑞昔布钠中元素杂质锂元素的含量，9份样品的平均回收率为101.9%，RSD为0.77%；检测限和定量限分别为5.0 ng/mL，16.6 ng/mL。滤膜对供试品的吸附率均<2%，重复性、中间精密度、进样精密度的RSD（%）均<5%，实验表明，该方法简单，准确度、精密度、灵敏度均较好，可实现元素锂元素的批量快速测定。

除此之外，可通过同时测定试剂空白、标准曲线和样品，尽量减少时间间隔，消除仪器误差。