杏仁罐头不同储藏时间本底苯甲酸含量的测定

李浩哲

（河南省口岸食品检验检测所 河南郑州 450003）

1 前言

随着生活水平的不断提高，人们对食品安全质量问题越来越重视。我国对食品添加剂的使用有着严格的规定，GB 2760—2014《食品添加剂使用标准》[4]作为食品添加剂添加量的重要依据之一，对食品检测行业有重要作用。但有些食品添加剂是食品天然产生并非生产厂商添加，这些自带的添加剂称为本底值，本底值给检验结果的判定带来了许多干扰[5]。

我国针对本底值的研究不多，本底值调查数据和检测方法体系很不完整，在此方面的食品安全问题时有发生，如“苯甲酸牛奶”“鱿鱼甲醛超标”“硼砂门毒豆皮”等，这些问题说明食品中本底值的研究十分必要。

杏仁是蔷薇科杏的种子，主要含蛋白质、脂肪、糖、微量苦杏仁苷，脂肪组成主要是油酸和亚油酸[6]。正确食用杏仁，能够生津止渴，润肺定喘，滑肠通便，降低患肠道癌的概率[6]。

苯甲酸（C6H5COOH）是食物中的一种天然成分，存在于自然界许多动植物中，李子、红梅等成熟的浆果中含有约0.05%的C6H5COOH。在新疆红枣中天然C6H5COOH含量的研究中，苏敏等[8]研究表明天然C6H5COOH的含量和红枣的成熟程度有关。杏仁中的苦杏仁甙在苦杏仁甙酶的作用下遇水分解为氢氰酸（HCN）、C6H5COOH 及葡萄糖，HCN 有剧毒[9]。本文用液相法研究杏仁罐头中杏仁的本底C6H5COOH的含量与储藏时间的关系。

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

仪器:Thermo UltiMate 3000高效液相色谱仪；梅特勒-托利多分析天平；

试剂:甲醇（CH3OH）（色谱纯，默克股份两合公司）；超纯水；乙酸铵（CH3COONH4）溶液（0.02 mol/L）:称取1.54g CH3COONH4，加 1000mL 纯水溶解，经 0.45μm滤膜过滤；5 mL C6H5COOH 标准品（1.00 mg/mL）（中国计量科学研究院）；其他试剂均为分析纯。

2.2 标准曲线的制作

混合标准储备液（0.2mg/mL）:准确量取C6H5COOH标准品2 mL定容到10 mL容量瓶，配制成0.2 mg/mL的标准储备液。

吸取C6H5COOH标准储备液适量，配制成浓度分别为 0、0.2、0.4、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的混合标准系列工作溶液。

2.3 色谱分析条件

色谱柱:Thermo Syncronis C18，250 mm×4.6 mm，5 μm；柱温:28℃；流速:1.0 mL/min；进样量:10 μL；流动相比例:0.02 mmol/L CH3COONH4＋CH3OH=（90∶10）；检测器:紫外检测器；波长:230 nm。

2.4 样品处理

准确称取约2 g（精确到0.001 g）试样于50 mL离心管中，加水约25 mL，涡旋混匀，50℃水浴超声20 min，冷却至室温后加亚铁氰化钾（K4Fe（CN）6）溶液 2 mL 和乙酸锌（（CH3COO）2Zn）溶液 2 mL，混匀，离心5 min，将水相转移至50 mL容量瓶中，在残渣中加水20 mL涡旋混匀后超声5 min，离心5 min，将水相转移到同一个50 mL容量瓶中，并用纯化水定容至刻度线，混匀。取适量上清液过0.22 μm滤膜，待液相色谱测定。

3 结果与讨论

3.1 流动相的比例及色谱峰保留时间

流动相比例为0.02 mmol/L CH3COONH4+CH3OH=90∶10时，谱峰分离效果良好，可满足分离要求，样品和标准品的色谱峰保留时间及光谱图，详见图1。

图1 标准品和样品的色谱峰保留时间及光谱图

3.2 线性和回收

测定3次后数据显示，标准曲线在0.4～20 μg/mL线性良好，线性相关系数（r）分别为 0.999 6、0.999 5、0.999 8，精密度、稳定性、重复性试验的相对标准偏差（RSD）均小于2%，平均加样回收率，详见表1。

表1 样品的加标回收率

3.3 精密度试验

取同一供试品溶液，连续测定5次，计算得到C6H5COOH的RSD值为1.8%。

3.4 稳定性试验

取同一供试品溶液，分别于 1、2、4、8、12 h，测定C6H5COOH的峰面积。计算得出C6H5COOH的RSD是1.66%，表明所制供试品溶液在12 h以内性质稳定。

3.5 储藏时间分析

同一批次的杏仁罐头储藏不同时间后，苯甲酸的含量测定结果详见表2。

表2 杏仁罐头中本底C6H5COOH的含量

4 结果与讨论

C6H5COOH是一种常用的食品添加剂，其含量是判定食品合格与否的重要标准[10]。GB 2760—2014作为食品添加剂添加量的重要依据之一，对食品检测行业具有重要的指导作用，该标准规定杏仁罐头添加剂中不得使用C6H5COOH。但C6H5COOH是食品自带的天然添加剂（本底）[11]，其含量对C6H5COOH的测定有很大影响。实验结果表明，同一批次杏仁罐头杏仁中本底C6H5COOH的含量与储藏时间的关系为1个月＜2个月＜3个月。

杏仁罐头杏仁中本底C6H5COOH含量随着储藏时间的增长而增加，在检测杏仁罐头中C6H5COOH的含量时要考虑C6H5COOH本底值的带入，谨慎对待测量结果。