抗菌床上用品模拟日常使用后对白色念珠菌抗菌性能变化的研究

黄婉新 李 雪 蔡 颖 陈冠武 周玮琪

（汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心 广东汕头 515000）

1 前言

近年来，市场上销售的抗菌床上用品呈增多趋势，国内也有相关的抗菌评价标准[1]（如GB/T 20944系列标准等），但一般只针对使用前的床上用品，没有关于床上用品日常使用后抗菌性能评价的研究和报道。另外，该系列标准中床上用品的真菌污染带来的健康风险也不容忽视，但没有发现针对真菌的抗菌性能评价标准。白色念珠菌是人体皮肤黏膜常见的致病性真菌。因此，本研究选取白色念珠菌作为实验用菌株，按GB/T20944.2-2007《纺织品 抗菌性能的评价 第二部分：吸收法》[2]的方法进行“抗菌”床上用品的使用前及模拟日常使用后的抗菌性能变化研究和评价。

2 材料和方法

2.1 材料

2.1.1 实验用菌株

实验用菌株为白色念珠菌（Candida Albicans）（编号CMGCC2.2086），购自中国普通微生物菌株保藏中心。

2.1.2 实验样品

2.1.2.1 试样

购自某大型电商平台上“抗菌”床上用品销量排名前4位不同品牌的4种产品，抗菌处理不明，分别是纯苎麻四件套（样品代号：#1）；纯棉抗菌套件（样品代号：#2）；纯棉抗菌防螨舒爽被（样品代号：#3）；纯棉抗菌防螨四件套（样品代号：#4）。

2.1.2.2 对照样

空白标准布，购自东莞同泰仪器。作为试验有效性判定的布样，细菌增长值F≥1.5时，试验判断为有效。

2.1.3 试剂和仪器

2.1.3.1 主要试剂

ECE含磷洗涤剂；蒸馏水；沙氏琼脂培养基；沙氏液体培养基；Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth（SCDLP）液体培养基；营养肉汤等购自广东环凯生物科技有限公司。

2.1.3.2 主要仪器

SW-24E型耐洗色牢度试验机，Q-SUN Xe-2日晒色牢度仪，BINDER编程循环烘箱，生物安全柜，高压灭菌锅，恒温培养箱，菌浊度计，震荡器等。

2.2 实验方法

2.2.1 方法来源

本方法除加入检样碎布的工作菌液由0.2 mL改为1.0 mL外，其余步骤按GB/T20944.2-2007《纺织品 抗菌性能的评价 第二部分：吸收法》[2]的方法进行。样品前处理中，模拟洗涤测试按GB/T20944.2-2007操作，其余前处理方法根据床上用品典型日常使用情况设计。

2.2.2 样品前处理

2.2.2.1 模拟洗涤测试

从每个样品中取3个小样（每个小样尺寸10 cm×10 cm，并剪成 2 块），按 GB/T 12490-2014[3]中的试验条件A1M进行洗涤，采用ECE含磷洗涤剂，清洗结束洗涤5次，即1个循环（具体操作条件和步骤：150 mL溶液中加入钢珠10粒，40℃下洗涤45 min，洗涤后取出试样，在40℃、100 mL的三级水中漂洗2次，每次1 min）。达到规定的洗涤次数后，用水充分清洗、晾干。将样品分别进行10次（2个循环）、20 次（4 个循环）、30 次（6 个循环）、40 次（8 个循环）、50次（10个循环）洗涤。

2.2.2.2 模拟烘干测试

参考市面上干衣机的设置温度，将烘箱温度设置 70℃，烘干时间分别为 1 h、2 h、3 h。

2.2.2.3 模拟日晒测试

在 45℃下模拟日晒，时间分别为 2 h、4 h、6 h。

2.2.2.4 模拟皮肤接触测试

剪取足够长度和宽度的样品，包裹于测试人员手臂上（直接接触肌肤），每一天换不同的测试者，1周后再将样品进行抗菌测试。

2.2.3 测定方法

2.2.3.1 检样处理

每种布料准确称0.45 g并剪裁米粒大小碎布片，装入直径20 mm×200 mm试管中，高压蒸汽灭菌121℃、15 min，放置 30℃鼓风恒温箱 3～4 d，使碎布片凉干。

2.2.3.2 作用菌液的配制及实际值的检测

将活化好的菌苔加入稀释液，准确测定值是1.80 MCF（菌液含菌约 8.4×107CFU/mL），以 1∶3 生理盐水稀释该菌液（菌液含菌约2.1×107CFU/mL）→进行100倍稀释（菌液含菌约2.0×105CFU/mL）→取1.0 mL工作菌液（菌液含菌约 2.0×105CFU/mL），+20 mL SCDLP液体培养基稀释液→充分震荡20 s→洗脱液进行10倍数稀释→选适宜稀释度各取1 mL→加沙氏琼脂→36℃培养72 h→计数实验中加菌实际值。

2.2.3.3 样品抗菌性检验操作

将处理后的0.45 g检样碎布缓慢滴加1.0 mL工作菌液，左右振荡润湿所有碎布，以平行样方式进行以下条件的操作：①菌原液和对照样进行零时作用；②在36℃环境下存放18 h后，往试管加入20 mL SCDLP液体培养基稀释液→充分震荡2次，每次10 s→进行10倍稀释→选适宜稀释度各取1 mL加入2块平板→加入恒温在50℃的沙氏琼脂20 mL→置于30℃，培养72 h→计数，取平均值。

2.2.3.4 培养及计数方法

白色念珠菌工作菌液与碎布样品作用18 h时，放置于36℃恒温培养箱。菌落总数测定[4]培养时，放置于30℃恒温培养箱，培养72 h，使用沙氏琼脂培养基进行培养。

2.2.3.5 评价指标

依据 GB/T 20944.2-2007[2]，使用“抑菌值”作为评价指标。当抑菌值≥1，样品具有抗菌效果。当抑菌值≥2，样品具有良好的抗菌效果。

3 结果

试验样品的测定结果见表1。

（1）市售畅销抗菌床上用品使用前均未表现出抗菌作用。

（2）其中2个抗菌床上用品经模拟日常使用后表现出一定的抗菌作用，而另2个则仍未检测出抗菌作用。

（3）洗涤、烘干、日晒和皮肤接触均可能使原本无抗菌作用的“抗菌”床上用品恢复抗菌作用。

表1 抗菌床上用品对白色念珠菌的抑制作用

4 讨论

抗菌性能可以明显地提高床上用品的附加值，提升了产品的品质和消费者的生活质量。本试验采购的市售抗菌床上用品使用前均未表现出抗菌作用，但部分床上用品在模拟日常使用后表现出抗菌作用。说明市场销售的所谓“抗菌”床上用品，有些根本不具备抗菌作用。商家可能存在夸大不实的宣传。另一方面，显然，单纯只做未处理前的抗菌效果测试，并不能反映抗菌床上用品真实的抗菌性能，为全面、准确地评价抗菌床上用品的抗菌性能，应同时检测使用前及模拟日常使用后的抗菌性能，并进行综合评价。如果说模拟使用前后均未表现出抗菌作用的产品不能称之为“抗菌床上用品”，那模拟使用后表现出抗菌作用的产品是否为合格的抗菌床上用品？什么样的床上用品可以称为 “抗菌床上用品”，是否需要根据模拟使用后的抗菌作用进行评价？是否需重新定义其概念？这些都需要进一步探讨。

在织物的抗菌整理中，需添加抗菌剂及多种染整助剂，共存的化学物质还可能相互影响。抗菌剂的效用和耐久性不仅与用量有关，与共用的其他整理剂和所用纤维的种类也有很大的关系。洗涤、烘干、日晒和皮肤接触均可能使原本无抗菌性能的“抗菌”床上用品恢复抗菌性能。推测原因可能是抗菌剂的活化或对抗菌剂有抑制作用的某些化学物质作用减弱或失效有关。

在本研究的试验操作中，笔者发现，如果按GB/T 20944.2-2007标准的规定进行操作，0.2 mL工作菌液无法浸润所有检样，可能会使抗菌效果不能完全发挥，从而导致检测结果不准确，经过实践，改为加入1.0 mL菌液，刚好湿润所有样品碎片，更符合实际操作要求，检测结果才能反映产品真实的抗菌效果。建议对GB/T 20944.2-2007标准进行相应的修订。

笔者也做过抗菌床上用品对细菌（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，另文发表[5]）的抗菌性能研究，结果表明，抗菌床上用品对细菌的抗菌性能明显好于对真菌的抗菌性能，可能是其抗菌整理多数是针对于细菌而非真菌，鉴于真菌污染对身体健康的危害性不小于细菌，建议厂家加大对抗真菌整理的研究开发力度。

本研究提出了床上用品模拟使用的概念和具体的实验方法，并通过增加模拟使用后的抗菌作用评价，有效促进监管，指导企业开发更加有效的长效抗菌工艺办法，让消费者能够选择到合适的床上用品，并促进抗菌床上用品产业的健康持续发展。

[1]赵晓伟.纺织品抗菌性能的测试标准[J].印染，2013，（15）：36-39.

[2]GB/T 20944.2-2007纺织品 抗菌性能的评价 第2部分：吸收法[S].

[3]GB/T 12490-2014纺织品 色牢度试验 耐家庭和商业洗涤色牢度[S].

[4]GB 4789.2-2010食品安全国家标准 食品微生物学检验菌落总数测定[S].

[5]李雪，蔡颖，陈冠武，等.抗菌床上用品对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑制作用的研究[J].中国纤检，2017，（6）：140-142.