呼和浩特地区牛乳及其乳制品中兽药残留现状调查

郝普国 ，包 瑞 ，张如刚 ，毛 伟 ，许燕武 ，丁 源 ，关 红 ，张金文 ，包牧原 ，刘正明 ，周 蕾 ，李培锋

（1.内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古 呼和浩特 010018；2.农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018；3.内蒙古万德系统集成有限公司，内蒙古 呼和浩特 010018；4.呼和浩特市兽药监察所，内蒙古 呼和浩特010018；5.中兴通讯股份有限公司，内蒙古 呼和浩特 010018；6.呼和浩特市家畜改良站，内蒙古 呼和浩特 010018；7.呼和浩特市菜篮子市场工作站，内蒙古 呼和浩特 010018）

呼和浩特地区牛乳及其乳制品中兽药残留现状调查

郝普国1，2，包 瑞3，张如刚4，毛 伟1，2，许燕武4，丁 源5，关 红1，2，张金文6，包牧原7，刘正明1，2，周 蕾1，2，李培锋1，2

（1.内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古 呼和浩特 010018；2.农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018；3.内蒙古万德系统集成有限公司，内蒙古 呼和浩特 010018；4.呼和浩特市兽药监察所，内蒙古 呼和浩特010018；5.中兴通讯股份有限公司，内蒙古 呼和浩特 010018；6.呼和浩特市家畜改良站，内蒙古 呼和浩特 010018；7.呼和浩特市菜篮子市场工作站，内蒙古 呼和浩特 010018）

旨在了解呼和浩特地区牛乳及其乳制品中兽药残留现状。采用现场调查、问卷调查等方法，调查了65家经销奶产品超市及60家奶产品特产经销店乳制品的销售情况，调查了139名呼和浩特市市民对牛乳及其乳制品的食用情况；调查了35个牛场驻场兽医及10名相关专家在临床上的兽药使用现状。采用回顾性调查方法，调查了2014—2015年内蒙古有关权威部门采用LC-MS-MS、ELISA等方法对呼和浩特地区370份牛乳进行兽药残留检测的结果。采用HPLC方法，检测了呼和浩特地区74份牛乳制品样本中的兽药残留。调查结果显示，呼和浩特市被调查的对象中96.41%的消费者食用牛乳及其乳制品，56.11%的消费者关注乳制品中兽药残留问题；呼和浩特地区牛乳总销量的94.46%来自于呼和浩特地区奶牛场，5.54%来自于其他地区；94.44%的牛场有专职兽医；20%的被调查牛场有超量使用兽药的情况，85.71%的被调查牛场有用药记录，94.29%的被调查牛场严格执行兽药休药期；100%的牛场对所产牛乳进行抗菌药物检测；目前呼和浩特地区兽医临床最常用的4种抗菌药物分别为青霉素、氨苄西林、阿莫西林及头孢噻呋，其他有庆大霉素、甲硝唑等。实验室检测结果显示，呼和浩特地区2014—2015年生产的牛乳中兽药残留均为阴性，市售乳制品样本中亦未检出残留。呼和浩特各辖区生产、流通的牛乳及其乳制品均符合动物性食品中兽药最高残留限量要求。

呼和浩特地区；牛乳及其乳制品；兽药残留；现状调查

乳及其乳制品如奶粉、乳酪、乳片是指以生鲜牛乳为主要原料，经加工而制成的一类产品，现已成为人们非常喜爱的一类食品。兽药残留问题是影响乳制品质量安全的重要因素［1］。乳制品兽药残留是指泌乳动物在应用兽药（包括药物添加剂）后，进入泌乳动物乳汁的药物原型及其有毒理学意义的代谢物和药物杂质［2］。一些养殖者由于经济利益的驱动，无视国家有关规定，过量使用或滥用兽药，或不遵守休药期规定，甚至使用违禁兽药。当人食用了兽药残留超标的乳制品后，残留的兽药就会在体内积蓄，产生过敏、中毒等不良后果［3］，直接危害人体健康甚至生命安全，对人体尤其是婴幼儿健康造成很大危害，长期食用则会抑制肠道中正常菌群定植生长，引发菌群失调症［4］。兽药残留除了直接危害人体健康外，还会导致微生物耐药性，给临床治疗带来极大的困难，同时也会破坏生态环境［5］。近年来，人们对乳制品安全问题及自身健康日益关注，乳制品中的兽药残留问题已成为广大消费者广泛关注的热点［6］。

因此，对“中国乳都”呼和浩特市乳制品兽药残留现状进行调查意义重大。该研究首先对呼和浩特地区各大乳制品销售商、市区市民、专家、奶牛养殖场兽医进行了现场调查和问卷调查，收集整理了内蒙古自治区兽药监察所对呼和浩特地区牛乳中兽药残留的检测结果，以了解市民最常食用的乳制品品种、产地，兽医临床使用频率最高的几种兽药以及牛乳中的兽药残留情况；其次，在对上述调查结果进行分析的基础上，随机抽样选取呼和浩特地区市场流通的、具有代表性的乳制品作为样本进行残留检测；最后，综合各种调查和检测结果，阐明呼和浩特地区牛乳及其乳制品样本中相关兽药的残留情况，从而为了解该地区牛乳及其乳制品中的兽药残留现状提供了有力依据。

1 研究内容与方法

1.1 呼和浩特地区乳制品销售及消费者对牛乳及其乳制品食用情况调查 调查方法：现场调查、问卷调查。调查内容：超市、特产店月销售牛乳及其乳制品情况，消费者对牛乳及其乳制品食用情况，消费者对乳制品兽药残留认知度等。调查时间：2016年6月15日—8月1日。调查范围：呼和浩特地区13个旗（县、区）（土默特左旗、武川县、托克托县、清水河县、和林格尔县、赛罕区、玉泉区、回民区、新城区、如意开发区、金桥开发区、金川开发区、金山开发区）。调查对象：65家具有代表性的超市，60家具有代表性的特产店，139名呼和浩特市市民。

1.2 呼和浩特地区奶牛牧场兽药使用现状调查调查方法：现场调查、问卷调查。调查内容：兽医临床工作者对兽药残留认知度，牛场使用的饲料及药物添加剂来源，临床常用兽药等。调查时间：2016年6月15日—8月1日。调查范围及对象：呼和浩特地区6个主产牛乳的旗（县、区）（土默特左旗、武川县、托克托县、清水河县、和林格尔县、赛罕区）内的35个奶牛牧场的驻场兽医及10名相关专家。

1.3 呼和浩特地区牛乳中兽药残留现状调查 调查方法：查阅资料，回顾性调查。调查内容：牛乳中兽药残留情况。调查时间：2014年1月—2015年12月。调查范围及对象：呼和浩特地区牛乳主产区（土默特左旗、武川县、托克托县、清水河县、和林格尔县、赛罕区）内31家奶站的370份奶样。

1.4 呼和浩特地区市售乳制品中常用抗生素残留检测

1.4.1 试验材料

1.4.1.1 药品与试剂：标准品，包括青霉素G（Penicillin G），批号：C10532500；氨苄西林（Ampicillin），批号：C10243080； 阿莫西林 （Amoxicillin）， 批号：C10242500；头孢噻呋（Ceftiofur），批号：C11065000；均购自德国Dr.Ehrenstorfer公司，纯度>99%。甲醇、乙腈均为色谱纯，购自美国Thermo Fisher Scientific公司。其他试剂均为分析纯，购自广州化学试剂厂。超纯水由Milli-Q超纯水系统制备。标准品储备液（1 mg/mL）：准确计算并称量上述4种药物作为对照品，置于10 mL容量瓶中，分别用超纯水定容，配制成1 mg/mL的标准品储备液，-20℃避光保存。混合标准品工作液（100 μg/mL）：将上述4种药物标准品储备液稀释后，准确量取相应体积置于10 mL容量瓶中用超纯水定容，配制成100 μg/mL的混合标准品工作液，-20℃避光保存。

1.4.1.2 仪器与设备：Waters 2695型高效液相色谱仪，购自美国Waters公司；5804R型高速离心机，购自德国Eppendorf公司；GM-2100型氮气吹干仪，购自日本EYELA公司；F3PN33491型超纯水制备系统，购自美国Millipore公司。

1.4.1.3 样品前处理：分别准确称取奶粉、奶酪、奶片各1 g于50 mL聚丙烯离心管中，加入4 mL水，涡旋3 min混匀后，超声20 min，再加入10 mL乙腈，振荡提取10 min，然后3 500 r/min离心10 min；吸取10 mL上清液于15 mL聚丙烯离心管中，加入4 mL正己烷，涡旋1 min，静置分层后吸取下层液于45℃水浴氮气吹干；残渣使用1 mL 38%乙腈水复溶，涡旋2 min后12 000 r/min高速离心8 min，用孔径为0.22 μm的尼龙滤膜过滤，供HPLC检测。

表1 2014年呼和浩特市牛乳兽药残留检测结果

1.4.2 检测方法

1.4.2.1 色谱条件：色谱柱为Ecosil C8SH120Å（250 mm×4.6 mmi.d，5 μm）； 柱温为室温，流速：0.8 mL/min；进样量：10 μL；流动相：乙腈:磷酸盐（15 mol/L磷酸氢二钾，15 mol/L磷酸二氢钾，pH值=6.3）=38:62（V/V）；检测波长：325 nm。

1.4.2.2 标准曲线与线性范围：将混合标准品工作液稀释配制成浓度为0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0 μg/mL共6个标准品溶液，每个浓度点重复测定3次。根据目标色谱峰峰面积与对应的浓度绘制标准曲线进行线性分析，得出回归方程、线性范围和相关系数（R2）。

1.4.2.3 回收率与变异系数：以空白奶制品进行加标回收和变异系数的计算。具体步骤如下：分别准确称取1.0 g空白奶酪、奶片和奶粉样品于50 mL聚丙烯离心管中，加入适量混合标准品工作液，配制成低（0.1 μg/g）、中（0.5 μg/g）、高（1.0 μg/g）3 个添加浓度水平的加标样品，每个浓度5个平行，做3个批次，按上述前处理方法进行处理，每个批次间隔1 d或数天；HPLC检测，计算3种奶制品4种药物的回收率以及批内和批间变异系数。

1.4.2.4 检测限与定量限：准确称取1.0 g 3种空白奶制品于50 mL聚丙烯离心管中，向其中添加适量的混合标准品工作液，配制成一系列低浓度的加标样品，分别按上述前处理方法和HPLC条件进行分析检测。检测限（LOD）指信噪比（S/N）为3时所对应的样品添加浓度，定量限（LOQ）是指S/N为10时所对应的样品添加浓度。

2 结果与分析

2.1 调查结果 对呼和浩特地区13个旗（县、区）内65家具有代表性的超市进行调查，结果显示，所销售的牛乳由呼和浩特地区生产的占总销量的94.46%，非呼和浩特地区生产的占总销量的5.54%；对60家乳制品特产店进行调查，结果显示：所销售的乳制品由呼和浩特地区生产的占总销售量的81.31%，非呼和浩特地区生产的占总销售量的18.69%。对呼和浩特地区13个旗（县、区）选取的139人进行问卷调查，调查问卷回收率100%。在被调查者中，男性占比51.1%，女性占比49.9%，其中21～70岁的被调查者占总人数的95%。被调查者中仅有3.59%的人不食乳及乳制品，45.32%的被调查者对乳制品的食用量较大，且被调查者中食用量最多的前4类乳制品分别为牛乳、奶酪、奶片、奶粉；56.11%的被调查者关注乳制品兽药残留，18.70%的被调查者对乳制品质量安全不放心；有10.10%的被调查者曾有耐药菌感染发病史，84.90%的被调查者未曾有细菌感染发病史，5.00%的被调查者未曾记得是否有细菌感染发病史。调查结果表明，呼和浩特地区销售的牛乳及其乳制品主要由本地生产，因此，应高度重视该地区的奶源质量安全监管工作。

由于呼和浩特地区牛场大多聚集在6个旗（县、区）（土默特左旗、赛罕区、武川县、托克托县、清水河县、和林格尔县）内，因此，选择这6个旗（县、区）内的35家牛场进行了调查。调查结果显示，牛场使用饲料及添加剂来源较为统一，94.29%的饲料来源于正规饲料企业，且使用前均进行了规范使用的宣传工作；94.44%的牛场有专职兽医；20%的被调查牛场有超量使用兽药的情况，85.71%的被调查牛场有用药记录，94.29%的被调查牛场重视兽药的休药期，并能够自觉执行；100%的牛场会对所产牛乳进行抗菌药物检测，检测方式多采用快速筛选法。调查了解到，临床常用兽药中使用频率最高的前4种兽药分别为青霉素、氨苄西林、阿莫西林、头孢噻呋。

经调查，2014—2015年内蒙古自治区兽药监察所对呼和浩特地区生产的牛乳进行兽药残留检测的结果见表1、2。

2.2 乳制品样品的实验室检测结果 根据兽医临床常用药物的调查结果，选取临床最常用的4种兽药青霉素、阿莫西林、氨苄西林及头孢噻呋作为检测对象，选取市场销量较高的3种奶粉、13种奶酪、14种奶片各2～3个批次，共74个样本，采用HPLC方法对乳制品样本进行兽药残留检测。检测结果显示，74个样品中均未检测到上述4种兽药。混合标准品阿莫西林、头孢噻呋、青霉素G、氨苄西林HPLC检测结果见图1，奶酪样本1、奶粉样本1、奶片样本1与标准品对照HPLC检测结果分别见图2～图4。

表2 2015年呼和浩特市牛乳兽药残留检测结果

图1 混合标准品阿莫西林、头孢噻呋、青霉素G、氨苄西林HPLC检测结果

图2 奶酪样本1与标准品对照HPLC检测结果

图3 奶粉样本1与标准品对照HPLC检测结果

图4 奶片样本1与标准品对照HPLC检测结果

表3 4种药物标准曲线的线性范围、线性方程和相关系数

检测方法标准曲线与线性范围：以各种药物的浓度为纵坐标（y），以对应药物的色谱峰的面积（x）为横坐标进行线性回归分析，获得各种药物的标准曲线，结果见表3。

检测方法的回收率与变异系数：空白奶酪、奶片和奶粉样本中分别添加低、中、高3个浓度的青霉素G、阿莫西林、氨苄西林和头孢噻呋后，回收率与变异系数计算结果见表4。由表4可知，4种药物在3种基质中3个添加浓度下，回收率在67.7%～87.7%，批内变异系数在1.2～7.1，批间变异系数在3.5～10.4。

检测限与定量限：4种药物的检测限 （LOD）和定量限（LOQ）分别以噪比（S/N）为3和10时所对应的样品添加浓度，结果见表5。

结果显示，以上实验室检测结果与内蒙古自治区兽药监察所近2年来对呼和浩特地区牛乳兽药残留的检测结果相一致，表明呼和浩特市各辖区生产、流通的牛乳及其乳制品均符合动物性食品中兽药最高残留限量要求。

3 讨论

兽药作为一种特殊商品，在动物疫病的预防、诊断以及治疗等方面为养殖业发展发挥了重要作用［7］。目前，乳及乳制品的消费群体已从婴幼儿、老人、病人迅速扩大至各个年龄段和人群［8］。乳及乳制品中的兽药残留不仅影响肠道正常菌群，引起变态反应，而且对人体产生毒性作用、“三致”作用等，甚至会造成细菌耐药性，影响生态环境，进一步危害人体健康［9］。因此，对乳及乳制品中的兽药残留进行监控成为保障广大消费者健康的重要课题。该研究对呼和浩特地区牛乳及其乳制品中兽药残留现状调查发现：绝大多数市民对乳制品的认知度比较高，对牛乳及其乳制品中兽药残留情况比较重视；牛乳生产企业高度重视兽药规范使用，工作人员在兽药使用、记录，休药期、奶源兽药残留检测等各个环节严格把控；乳制品中兽药残留控制较好，为呼和浩特地区消费者提供了较安全的牛乳及其乳制品，为该地区乳制品推向全国及全世界提供了有力的保障。

表4 4种药物的添加回收率和变异系数计算结果

表5 4种药物的检测限和定量限

4 结论

通过调查和检测，呼和浩特地区牛乳及其乳制品中所选取样本中均未检出兽药残留，均符合动物性食品中兽药最高残留限量要求。

［1］孙颖宜，成姗，林琳，等.国内外乳及乳制品中兽药残留限量标准比较分析［J］.食品安全质量检测学报，2016，7（1）：378-382.

［2］高洁，苗虹.兽药残留检测技术研究进展［J］.食品安全质量检测学报，2013，4（1）：11-18.

［3］侯海燕，刘靓，刘纯成，等.淮安市市售乳制品中β-内酰胺酶残留状况调查［J］.江苏预防医学，2015，26（6）：92-93.

［4］王庆生.奶牛养殖兽药残留的监控措施［J］.中国畜牧兽医文摘，2015，31（12）：35.

［5］王猛.中国乳制品安全规制研究［D］.沈阳：辽宁大学，2012.

［6］刘凤山.养殖业兽药残留现状与对策［J］.养殖与饲料，2016（9）：93.

［7］刘志民.规模养殖场兽药安全使用关键技术［J］.当代畜牧，2015（15）：54.

［8］刘海琴.乳及乳制品中兽药残留问题的探讨［J］.农业开发与装备，2015（11）：83.

［9］杨友林，陈明生.兽药残留对人类的危害［J］.中国畜牧兽医文摘，2016，32（1）：238.

Investigation on Veterinary Drug Residue in Milk and Dairy Products in Hohhot Area

HAO Pu-guo1，2，BAO Rui3，ZHANG Ru-gang4，MAO Wei1，2，XU Yan-wu4，DING Yuan5，GUAN Hong1，2，ZHANG Jin-wen6，BAO Mu-yuan7，LIU Zheng-ming1，2，ZHOU Lei1，2，LI Pei-feng1，2
（1.College of Veterinary Medicine，Inner Mongolia Agricultural University，Hohhot 010018，China；2.Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease，Hohhot 010018，China；3.Inner Mongolia Wande System Integration Co.，Ltd.，Hohhot 010018，China；4.Hohhot Municipal Veterinary Drug Inspection Institute，Hohhot 010018，China；5.ZTE Corporation，Hohhot 010018，China；6.Hohhot Municipal Livestock Improvement Station，Hohhot 010018，China；7.Hohhot Municipal Vegetable Basket Market Workstation，Hohhot 010018，China）

The aim of the present study was to understand the status of veterinary drug residues in milk and dairy products in Hohhot.Field investigation and questionnaire survey were conducted to investigate the sales of milk and dairy products from 65 supermarkets and 60 milk products specialty stores;the consumption of milk and dairy products of 139 residents in Hohhot was investigated;the status of veterinary drug use in clinic was investigated by the information collected from 35 veterinarians and 10 experts.A retrospective survey was conducted to investigate the detection results of veterinary drug residue of 370 milk samples from Hohhot by authoritative testing institution using LC-MS-MS,ELISA and other methods from 2014 to 2015.The veterinary drug residues of 74 dairy product samples in Hohhot were detected by HPLC.The results showed that 96.41%of the respondent in Hohhot consumed milk and dairy products,56.11%of consumers concerned the problem of veterinary drug residue in dairy products;94.46%of the milk sold in market of Hohhot was provided by the local dairy farm,and the other 5.54%was provided from other areas;94.44%of the investigated dairy farms had full-time veterinarians;the veterinarians in 20%of the surveyed dairy farms had overused veterinary drug;85.71%of the surveyed dairy farms had medication records;94.29%of the surveyed dairy farms strictly enforced the veterinary drug withdrawal period;all of the surveyed dairy farms tested the antibiotics in raw milk;currently the most commonly used antimicrobial drugs are penicillin,ampicillin,amoxicillin and cephalosporins followed by gentamicin and metronidazole.Laboratory tests results showed that the residues in milk produced in Hohhot from 2014 to 2015 were all negative and no residue was detected in the samples of commercial dairy products.The production and distribution of milk and dairy products in municipaldistricts ofHohhotare in line with the requirements of the maximum residue limits of veterinary drugs in animal foods.

Hohhot area；milk and dairy products；veterinary drug residues；status investigation

R155.57；S859.84

A文章顺序编号：1672-5190（2016）12-0035-05

2016－11－18

项目来源：呼和浩特市科技局科技计划项目“呼市地区乳制品中兽药残留现状调查及乳制品质量安全追溯系统的建立”（2014-农-10，2014150103000142）。

郝普国（1989—），男，硕士研究生，主要研究方向为兽医药理学与毒理学。

李培锋（1955—），男，教授，硕士，博士生导师，主要研究方向为兽医药理学与毒理学。

（责任编辑：赵俊利）