兽用缓释乳酸环丙沙星注射液的体外抑菌试验

黄迪海，刘 霞，张再辉，徐秀荣，张 华，杨 波，曹利丹，秦卓明，3

(1．山东省健牧生物药业有限公司，济南 250100;2．济南市动物生物药品工程技术研究中心，济南 250100;3．山东省农业科学院家禽研究所，济南 250100)

乳酸环丙沙星(Ciprofloxacin Lactate)为喹诺酮类抗菌药，具有高效、广谱的抗菌活性，对大肠杆菌、沙门氏菌、克雷伯氏杆菌、巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、金黄色葡萄球菌、支原体和衣原体等均有良好作用［1－3］，且对大多数菌株的 MIC均低于1μg/mL，对敏感菌具有明显的抗菌后效应(PAE)［4］。乳酸环丙沙星注射液在畜牧养殖中用于治疗畜禽细菌性疾病和支原体感染［5］，但存在药物有效浓度维持时间短、使用次数多等问题。为克服此难题，我们利用骨架缓释技术成功研发出缓释乳酸环丙沙星注射液，在实验室获得了较好的试验效果。现将该产品对16株畜禽常见致病菌的体外抑菌试验结果报告如下:

1 材料

1．1 试验药品 缓释乳酸环丙沙星注射液(简称缓释环丙沙星)中试产品，规格为10 mL:0．4 g，批号分别为20111101、20111102和20111103;乳酸环丙沙星注射液(简称环丙沙星)，规格为10 mL:0．2 g，批 号 分 别 为 20111101、20111102 和20111103;恩诺沙星注射液(简称恩诺沙星)，规格为10 mL:0．25 g，批号分别为 20111101、20111102和20111103。以上产品均由山东省健牧生物药业有限公司生产。

1．2 试验菌株 金黄色葡萄球菌等16株菌株(包括标准菌株及流行菌株)。其中，大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、绿脓杆菌由山东省农业科学院家禽研究所提供，猪胸膜肺炎放线杆菌、鸡鼻气管鸟杆菌由山东农业大学提供，金黄色葡萄球菌由山东省农业科学院畜牧兽医研究所提供。

1．3 试验菌液 标准菌株活化后，接种于Mueller－Hinton(MH)肉汤，与37℃下培养6～12 h，再用MH肉汤稀释至2×105CFU/mL的浓度，备用。

1．4 培养基 Mueller－Hinton(MH)肉汤培养基。

2 方法

2．1 试验药物原液 取上述1．1所述各批次三种试验药品，分别稀释至药物浓度1280μg/mL，并用孔径为0．22μm的细菌滤器过滤。

2．2 采用常量肉汤稀释法 将三种药物9批原液分别用MH培养基稀释成11个浓度(128、64、32、16、8、4、2、1、0．5、0．25、0．125 μg/mL)，各组均设不加药物的空白对照。

2．3 加入药物的培养基 放入37℃恒温培养箱中24 h，观察无污染方可供试验应用。

2．4 将含不同药量的1 mL培养基加入已培养24 h各相应菌液1 mL，加入菌液后各管与空白对照管的透明度无明显差异，各组均设不加药物的细菌接种对照管。

2．5 试管在室温条件下放置(20℃)2 h，移入37℃恒温培养箱内，培养30 h，分别在24 h和30 h观察、记录试验结果(观察药物管、空白管、接种管)。

3 结果

三种不同注射液体外24 h和30 h对16株菌株的抑菌效果详见表1。

表1 缓释乳酸环丙沙星注射液的体外抗菌活性实验结果

结果显示:缓释环丙沙星和环丙沙星的MIC均小于恩诺沙星。缓释环丙沙星、环丙沙星和恩诺沙星注射液的MIC范围在24h的MIC范围分别为0．125 ～0．5 μg/mL、0．167 ～0．5 μg/mL 和 0．25 ～4．0 μg/mL;在30h分别为 0．125 ～0．667 μg/mL、0．25 ～1．0 μg/mL 和 0．416 ～8．0 μg/mL。比较而言，缓释环丙沙星在24h对金黄色葡萄球菌等12菌株的MIC均略小于环丙沙星，二者仅在大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌C79－13、沙门氏菌和鸭巴氏杆菌4株菌株的MIC一致。而在30h时，二者仅在沙门氏菌的MIC一致，其余，缓释环丙沙星的MIC均低于环丙沙星和恩诺沙星。通过上述抗菌活性比较证实:缓释环丙沙星维持时间长，抑菌效果好。三者的抑菌是:缓释乳酸环丙沙星注射液≥乳酸环丙沙星注射液≥恩诺沙星注射液。

4 讨论

国内有利用环丙沙星注射液进行奶牛乳腺炎的治疗报道［6］，但缺乏对缓释乳酸环丙沙星注射液的研究。本文通过对缓释环丙沙星体外抗菌活性的试验证实，该药对革兰氏阳性菌和阴性菌均有较好的体外抑菌效果和较长的药物维持时间，具有广阔的临床应用前景。乳酸环丙沙星对绿脓杆菌的抑菌效果(MIC=0．25μg/mL)明显优于恩诺沙星(MIC=4．0μg/mL)，提示本品在防治畜禽及毛皮动物绿脓杆菌病可作为首选药物使用。

试验发现，药物与菌液混合培养时，乳酸环丙沙星缓释注射液抗菌活性明显优于其普通注射液，并且30h的效果比24h更加明显。原因主要是缓释制剂的药物分子缓慢释放，药效更加持久。

乳酸环丙沙星因其良好的疗效［7－8］，其粉剂和普通注射液在我国畜禽养殖生产中广为应用。但是，频繁的用药，较短的药效期，加大了人们的工作量。为此，我们研制了缓释乳酸环丙沙星注射液，目的是想通过延长药物的有效血药浓度维持时间，进而减少每日用药次数，降低劳动强度，并降低药物的毒副作用。试验证实缓释乳酸环丙沙星注射液比乳酸环丙沙星拥有用药次数少、药效维持期长等优点。该药品的研制成功将有助于畜禽常见细菌性疾病的防治，并大大降低劳动强度。

［1］ 郭建华，李天真，苗 刚，等．乳酸环丙沙星等对金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验［J］．畜禽业，2011，6:59－60．

［2］ 马建丽，王世岭，周 亮，等．氟罗沙星葡萄糖注射液与乳酸环丙沙星注射液随机对照治疗细菌性感染69例［J］．解放军药学学报，2000，16(6):335－338．

［3］ 陈绍俊．乳酸环丙沙星与其它抗菌药联用体外抗菌效果［J］．当代畜牧，2009，2:50－51．

［4］ 中国农业出版社，中国兽药典兽药使用指南(化学药品卷)2010年版［S］．

［5］ 中华人民共和国农业部，兽药质量标准2003年版［S］．

［6］ 田文儒，刘大海，张雪清．乳酸环丙沙星治疗奶牛乳房炎的效果观察［J］．黑龙江畜牧兽医，1995，10:28－30．

［7］ 金国星．复方乳酸环丙沙星治疗仔猪黄白痢试验［D］．杭州:浙江大学动物科学学院，2009．

［8］ 李孝文，董 伟，陈小军，等．复方环丙沙星乳剂的研制及体外抑菌试验［J］．中国兽医杂志，2011，(10):79－80．