奶牛乳房炎源大肠杆菌的分离鉴定

许有盼

（甘肃省武威市民勤县收成镇畜牧兽医站，733399）

奶牛乳房炎源大肠杆菌的分离鉴定

许有盼

（甘肃省武威市民勤县收成镇畜牧兽医站，733399）

奶牛乳房炎是严重影响我国奶牛业主要的发展疾病之一。本文通过对采集患乳房炎的牛奶进行细菌学分离鉴定、形态学观察、生化特性试验等方法，引起奶牛乳房炎的病原菌为大肠杆菌，通过致病性试验验证其分离大肠杆菌的致病性，结果显示，分离的大肠杆菌为致病性大肠杆菌。药敏试验结果显示，分离的奶牛乳房炎源大肠杆菌对氟苯尼考、头孢曲松、头孢他啶、恩诺沙星4种药物高度敏感；对新霉素、庆大霉素、多西环素、阿莫西林、阿米卡星、青霉素、卡那霉素7种药物耐药。

奶牛；乳房炎；大肠杆菌

相关的文献报道了我国奶牛存栏量大约在1440万头，奶牛隐性乳房炎的阳性率也在46%～80%之间，该病严重的影响着奶牛的生产性能。奶牛乳房炎是奶牛养殖过程中常见的疾病之一，具有发病率高，并且难以治愈、病因复杂等特点。病原微生物金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌等是引起奶牛乳房炎的主要病原菌。而且，病原微生物金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌这三种菌也是引起的隐性乳房炎主要的病原菌。致病性大肠杆菌广泛存在环境中，导致奶牛乳房炎的发病率相对较高，并且无明显的季节性。当致病性大肠杆菌通过多种途径侵入奶牛的乳房组织后，引发奶牛的严重的炎症反应，引起乳房炎。致病性大肠杆菌的引起的奶牛的乳房炎多见于高产奶牛及产后泌乳高峰期奶牛。本实验对采集患乳房炎的牛奶样品中分离到了大肠杆菌，该菌具有很强的致病性，因此，对分离的致病性大肠杆菌进行药敏试验，分析其耐药性，为奶牛乳房炎的防治提供研究基础。

1 病料来源

某地区奶牛养殖场，采集患乳房炎的奶牛鲜奶样品，采集样品时对乳头进行消毒，无菌采集乳样，进行细菌分离鉴定。

2 细菌的分离鉴定

对采集的乳样，按照1:100比例接种到灭菌的营养肉汤中，37℃恒温培养12～16 h后，并接种于麦康凯培养基上，37℃恒温培养12～16 h后，挑取典优势菌落接种到伊红美蓝培养基培养后，革兰氏染色试剂盒对分离的细菌进行染色镜检。结果显示，分离菌株在营养肉汤中培养后，营养肉汤呈现了混色，不透明的状态；分离菌株在麦康凯琼脂培养基上长出粉红色、湿润的扁圆的、边缘光滑整齐菌落；分离菌株在伊红美兰培养基上长出深紫带金属光泽的圆形、中间黑色菌落；革兰氏染色镜检可见，分离菌株为阴性菌，呈现两端钝圆、杆状菌。

3 细菌的生化试验挑取伊红美蓝培养基优势菌落，接种到生化试管中，37℃恒温培养24h后，对分离菌株进行生化特性鉴定，结果显示，分离菌株分解甘露醇、葡萄糖、海藻糖、麦芽糖、阿拉伯糖、鼠李糖，产酸不产气，V-P试验为阴性、吲哚试验为阳性。

4 分离菌株的致病性试验

将培养好的大肠杆菌口服方式攻毒小白鼠5只，每只小白鼠攻毒剂量为0.5mL，另外的5只小白鼠口服等量的生理盐水，观察7d，结果显示，攻毒的5只小鼠死亡率为100%，另外5只小鼠健康存活。证实了分离的大肠杆菌具有很强的致病性。

5 药敏试验

药敏试验结果显示，分离的致病性大肠杆菌对氟苯尼考、头孢曲松、头孢他啶、恩诺沙星4种药物高度敏感；对新霉素、庆大霉素、多西环素、阿莫西林、阿米卡星、青霉素、卡那霉素7种药物耐药。

6 小结

引起奶牛乳房炎的病原菌为致病性大肠杆菌，药敏试验结果显示，对氟苯尼考、头孢曲松、头孢他啶、恩诺沙星4种药物高度敏感。

[1]谢昆,蒋成砚,刘杰等.奶牛隐性乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验[J].黑龙江畜牧兽医,2016,(12下)：107-109.16.

[2]罗志尧,陈天来.奶牛隐性乳房炎大肠杆菌的鉴定与药敏试验[J].江西畜牧兽医杂志,2013,4:11-13.24.

S857.2+6

B

1003-8655（2017）06-0045-01