复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织α-SMA、I型和III型胶原蛋白含量的作用

韩烨晨，张 娟，王俊武，员世宇，吴海萍，温 爽，赵冬冬，王 卓，苏晓菲，朱昱波，程 佳，孙耀贵，王文魁，李宏全，段智变*

(1.山西农业大学动物科技学院，太谷 030801；2.山西省畜牧兽医学校，太原 030024；3.河南科技学院动物科技学院，新乡 453003)



复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织α-SMA、I型和III型胶原蛋白含量的作用

韩烨晨1，张 娟1，王俊武1，员世宇1，吴海萍1，温 爽1，赵冬冬1，王 卓1，苏晓菲2，朱昱波3，程 佳1，孙耀贵1，王文魁1，李宏全1，段智变1*

(1.山西农业大学动物科技学院，太谷 030801；2.山西省畜牧兽医学校，太原 030024；3.河南科技学院动物科技学院，新乡 453003)

本试验旨在研究腹水综合征(AS)肉鸡肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原和III型胶原蛋白变化及复方中药的防治作用。将309羽7日龄罗斯肉鸡随机分为6组，空白组正常饲养，其余5组饲养环境为9～11 ℃、高能饲料和高钠饮水，模型组不给予任何药物，中药组(高、中、低剂量组)分别给予2、1、0.5 g·(kg·d)-1复方中药，L-Arg组饲料中添加1% L-Arg。结果表明：15、25、35和45日龄，与空白组相比，模型组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数、肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量显著增加(P<0.01或P<0.05)，脾脏指数显著降低(P<0.01或P<0.05)；与模型组相比，各剂量中药组和L-Arg组均能改善上述指标(P<0.01或P<0.05)。肉鸡腹水综合征肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量显著上升，参与AS病理发生发展；气血双补、行气利水的复方中药能有效防治AS，其机制与复方中药能显著降低AS肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量相关。

复方中药；肉鸡腹水综合征；α-SMA；I型胶原蛋白；III型胶原蛋白

腹水综合征(ascites syndrome，AS)是主要发生于28～49日龄肉鸡的一种营养代谢病，病因涉及遗传、缺氧、低温、营养和疾病等方面，临床表现为腹水、右心肥大、肝和肺充血肿大，世界AS发病率约为25%[1]。

AS肉鸡肝的变化是AS三大评判标准之一[2]，剖检可见肝充血肿大，有血浆凝块附着。临床表现和病理剖检均提示AS中存在肝机能障碍，且有学者认为AS中的腹水产生可能与肝损伤有关，其根本原因为缺氧[3]。哺乳动物及人类医学研究表明[4]，缺氧可直接损伤肝功能，引发肝纤维化，继而形成腹水。因此，肝或许在AS发生发展中有重要作用。

α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin， α-SMA)是肝星状细胞活化的特异性标志物，肝星状细胞活化是肝纤维化的中心环节[5]，因此α-SMA水平的变化与肝纤维化水平正相关。I型胶原的大量合成是肝纤维化和肝硬化发生发展的中心环节，是细胞外基质的主要成分[6]。III型胶原则在肝星状细胞活化较早期合成较多[7]。因此，α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量与肝纤维化水平密切相关。

中药是具有整体调节机体各项功能特点的纯天然产物，在畜禽各类疾病中具有独特的治疗优势和研究意义。本课题组前期结果表明[8]，复方中药能通过影响NO、ET-1有效防治AS，本试验通过测定不同日龄AS肉鸡肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量，并以当归、黄芪、丹参、茯苓等自拟复方中药进行治疗观察，为AS及其中药防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物分组

1日龄罗斯肉鸡309羽(雌雄不限)及三段式饲养饲料(购自山西省文水县大象禽业有限公司)。常规育雏至7日龄，健康鸡随机分为6组：空白组、模型组、L-Arg组和中药组(分为高、中、低剂量组)，自由饮水采食。参考文献方法[8-10]，对模型组、L-Arg组和中药组采用低温(9～11 ℃)、高能饲料(添加3%猪油、4%鱼粉)、高钠(饮水总Na+为0.12%)多因素法诱发肉鸡腹水综合征试验模型，L-Arg组在饲料中额外添加1% L-精氨酸，中药组(高、中、低剂量组)在饮水中分别添加2、1、0.5 g·(kg·d)-1剂量复方中药。

于15、25、35和45日龄随机取10羽鸡，称重，处死后迅速剖取心、肺、肝和脾，测定脏器指数和腹水心脏指数，取部分肝组织样品测定α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量。取35日龄肉鸡肝组织部分样品制作病理切片。

1.2 制备复方中药药剂

参考前期试验，选择能影响肉鸡NO和ET-1的复方中药[8]，将当归、黄芪、丹参、茯苓以2∶3∶2∶2比例依次配比组方(药材购自山西省太谷县药材公司)，清水浸泡30 min后熬制40 min，收集药液，重复3次，合并药液过滤，减压蒸馏浓缩至1 g·mL-1汤剂，-20 ℃保存备用，饲喂前温化处理。

1.3 检测指标

1.3.1 常规指标 通过观察肉鸡临床症状(腹部膨大有波动感)、剖检结果(肝充血肿大，有血浆凝块附着)和腹水量(大于20 mL)[9]判定AS发病。

腹水心脏指数(Ascites heart index, AHI)：右心室重与全心室重的比值(RV/TV)。取心脏，沿冠状沟剪去两心房，清除多余组织，称取全心室重量(TV)，沿前后纵沟剪下右心室(RV)，称重，计算AHI[5]。正常肉鸡AHI小于0.219，AS肉鸡 AHI大于0.250[11]。

脏器指数：脏器/体重。称量剖取的心、肺、肝和脾，计算脏器指数。

1.3.2 肝组织病理学观察 取35日龄肉鸡左侧肝叶中间部分肝组织，10% 中性甲醛固定，石蜡包埋，常规切片5 μm，Masson染色观察肝组织胶原。

1.3.3 肝组织α-SMA、I型胶原蛋白和III型胶原蛋白含量测定 取肝组织(0.1～0.2 g)，于冰冷生理盐水中洗净，拭干，称重，按质量(g)∶体积(mL)=1∶9加入0.9 %生理盐水，在冰水浴环境下用匀浆机制备肝组织匀浆，3 000 r·min-1离心15 min，取上清液，按试剂盒说明测定肉鸡肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量。

1.3.4 主要化学试剂及仪器设备 鸡α-SMA蛋白ELISA试剂盒(上海蓝基生物科技有限公司)，鸡I型胶原蛋白ELISA试剂盒(上海蓝基生物科技有限公司)，鸡III型胶原蛋白ELISA试剂盒(上海蓝基生物科技有限公司)，高速冷冻离心机(D-375型，德国Sigma公司)，石蜡切片机(上海跃进医疗器械)，倒置荧光显微镜(IX81-F72FL/PH，日本Olympus公司)。

1.4 数据处理与分析

2 结 果

2.1 发病率、体重、AHI及脏器指数

结果表明，模型组肉鸡发育迟缓，个头较小，被毛粗乱，食欲较差，腹部膨大着地，试验后期模型组肉鸡腹部皮肤青紫发绀，胀满下垂，站立困难，呼吸急促，腹部触诊有明显波动感，可抽出30～200 mL的稻草黄色液体。剖检可见心室肥大，心包积液；肝淤血肿大，偶见斑驳的黄色病变；肺充血水肿等症状。各中药组和L-Arg组肉鸡临床症状明显改善。表1结果表明，根据试验方法中的肉鸡临床症状、剖检结果和腹水量作为标准判定AS发病，模型组肉鸡腹水综合征累计发病率显著高于空白组(P<0.01)，高、中剂量中药组和L-Arg组发病率显著低于模型组(P<0.01)。

表1 肉鸡腹水综合征发病率

Table 1 Incidence of broilers with AS

项目Item空白组GroupNone模型组GroupControlL-Arg组GroupL-Arg高剂量中药组HighTCMgroup中剂量中药组MiddleTCMgroup低剂量中药组LowTCMgroup发病率/%Incidence(%)3.9(2/51)30.2A(16/53)9.8B(5/51)5.9B(3/51)11.8b(6/51)19.2(10/52)

括号内为该组发病个体数和试验总数。与空白组对比，a.P<0.05，A.P<0.01；与模型组对比，b.P<0.05，B.P<0.01。下同

The number in bracket is individuals with AS and the total number in the corresponding group. compared with group None, a.P<0.05, A.P<0.01; compared with group Control, b.P<0.05, B.P<0.01. The same as below

表2结果表明，各日龄模型组肉鸡体重均极显著低于空白组(P<0.01)；各日龄高剂量中药组和中剂量中药组15、25、35日龄以及15日龄低剂量中药组体重显著高于模型组(P<0.01，P<0.05)；15、25、35日龄L-Arg 组体重显著高于模型组(P<0.01或P<0.05)。

各日龄模型组AHI均极显著高于空白组(P<0.01)；各日龄高剂量中药组和各日龄中剂量中药以及15日龄低剂量中药组AHI显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)；各日龄L-Arg组AHI极显著低于模型组(P<0.01)。

各日龄模型组心脏指数均极显著高于空白组(P<0.01)；15、25、45日龄高剂量中药组和15、25、45日龄中剂量中药组心脏指数显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)；15、25、45日龄L-Arg组心脏指数极显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)。

各日龄模型组肺脏指数显著高于空白组(P<0.01或P<0.05)；各日龄高剂量中药组和25、35、45日龄中剂量中药组以及45日龄低剂量中药组肺脏指数显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)；15、45日龄L-Arg组肺脏指数显著低于模型组(P<0.05)。

各日龄模型组肝脏指数显著高于空白组(P<0.01或P<0.05)；各日龄高剂量中药组肝脏指数显著低于模型组(P<0.05)；15、45日龄L-Arg组肝脏指数显著低于模型组(P<0.05)。

25、35、45日龄模型组脾脏指数显著低于空白组(P<0.01或P<0.05)；35、45日龄高剂量中药组脾脏指数显著高于模型组(P<0.05)；35日龄L-Arg组脾脏指数显著高于模型组(P<0.05)。

项目Item日龄Day空白组GroupNone模型组GroupControlL-Arg组GroupL-Arg高剂量中药组HighTCMgroup中剂量中药组MiddleTCMgroup低剂量中药组LowTCMgroup体重/gBodyweight15482.0±18.4360.3±15.4A427.7±9.3B451.7±10.4B417±15.9B395±23.8b251014.0±39.6941.7±31.1A1047.3±36.6B1049.7±33.1B1002.7±30.3b947.7±27.8351803.0±131.01429.8±140.3A1650.7±33.2b1821.3±136.2B1618.3±102.3b1546.7±44.8452901.7±553.92280.8±120.9A2621.0±155.42886.3±11.2B2639.3±275.02416.2±91.9AHI150.1799±0.01280.2722±0.0116A0.2070±0.0214B0.2045±0.0177B0.2132±0.0144B0.2454±0.0183b250.1976±0.00740.2733±0.0137A0.2239±0.0070B0.2188±0.0185B0.2455±0.0072B0.2615±0.0075350.2205±0.01560.3376±0.0072A0.2662±0.0211B0.2571±0.0113B0.2959±0.0098B0.3208±0.0172450.2708±0.00890.3829±0.0203A0.3152±0.0116B0.3049±0.0126B0.3387±0.0096B0.3727±0.0124心脏指数/‰Heartindex156.138±0.1106.982±0.090A6.332±0.185B6.367±0.301B6.382±0.271b6.597±0.329254.492±0.3335.639±0.226A4.774±0.297B4.608±0.350B4.883±0.111b5.296±0.414353.850±0.2694.643±0.266A4.307±0.1374.402±0.0864.427±0.5194.574±0.130454.089±0.0585.150±0.316A4.681±0.281b4.416±0.154B4.697±0.159b4.940±0.211肺脏指数/‰Lungindex155.084±1.1806.825±0.604a5.428±0.248b5.127±0.615b5.696±0.6276.135±1.117254.385±0.6805.846±0.213A4.904±0.4134.346±0.392B4.565±0.648b5.112±0.756354.642±1.1015.795±0.624a4.987±0.3024.578±0.274B4.801±0.286b5.222±0.309454.974±0.3775.994±0.272A5.160±0.516b5.011±0.438B5.078±0.334B5.267±0.403b肝脏指数/%Liverindex152.739±0.1013.688±0.331A2.966±0.114b3.004±0.196b3.102±0.4773.202±0.266252.252±0.1642.710±0.282a2.302±0.1062.250±0.227b2.329±0.3442.614±0.253352.161±0.1842.554±0.179a2.170±0.1192.147±0.147b2.213±0.3582.370±0.166452.241±0.1822.503±0.066a2.272±0.192b2.242±0.201b2.296±0.2032.328±0.046脾脏指数/‰Spleenindex151.198±0.3900.712±0.1170.904±0.0471.065±0.5870.840±0.1330.732±0.150251.188±0.1530.808±0.101a1.003±0.2401.035±0.1990.963±0.1670.874±0.078351.538±0.2210.889±0.238A1.424±0.294b1.434±0.232b1.213±0.1911.085±0.245451.563±0.3350.874±0.140A1.181±0.2531.265±0.368b1.185±0.2341.002±0.140

2.2 35日龄肉鸡肝组织病理学变化

图1结果表明，35日龄空白组肝结构清晰，肝细胞排列整齐，间隙中偶见少量纤维组织沉积；模型组肝结构紊乱，肝细胞界限不清晰，间隙内有大量纤维组织沉积；高剂量中药组、中剂量中药组、低剂量中药组和L-Arg组均对肝脏间隙内纤维组织的沉积有不同程度的改善作用。

2.3 肝组织α-SMA蛋白含量

图2显示，各日龄模型组肉鸡肝组织α-SMA蛋白含量均极显著高于空白组(P<0.01)；各日龄高剂量中药组和15、35、45日龄中剂量中药组以及15、45日龄低剂量中药组肉鸡肝组织α-SMA蛋白含量显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)；15、35、45日龄L-Arg组肉鸡肝组织α-SMA蛋白含量显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)。

2.4 肝组织I型胶原蛋白含量

图3显示，15、25、35日龄模型组肉鸡肝组织I型胶原蛋白含量极显著高于空白组(P<0.01)；15、25、35日龄高剂量中药组和15、25、35日龄中剂量中药组以及15、25日龄低剂量中药组肉鸡肝组织I型胶原蛋白含量显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)；15、25、35日龄L-Arg组肉鸡肝组织I型胶原蛋白含量极显著低于模型组(P<0.01)。

A.空白组；B.模型组 ；C. L-Arg组：D.高剂量中药组； E.中剂量中药组；F.低剂量中药组A. Group None; B. Group Control; C. Group L-Arg; D. High dosage of compound recipe of the traditional Chinese medicine group; E. Middle dosage of compound recipe of the traditional Chinese medicine group; F. Low dosage of compound recipe of the traditional Chinese medicine group图1 35日龄肉鸡肝组织切片(Masson染色， 400×)Fig.1 Liver microscopic images of broilers at 35 days of age (Masson-trichrome, 400×)

图2 肉鸡肝组织α-SMA蛋白含量Fig.2 The level of α-SMA protein in liver of broilers

图3 肉鸡肝组织I型蛋白含量Fig.3 The level of collagen type I protein in liver of broilers

2.5 肝组织III型蛋白含量

图4显示，各日龄模型组肉鸡肝组织III型蛋白含量显著高于空白组(P<0.01，P<0.05)；各日龄高剂量中药组和各日龄中剂量中药组以及25、35、45日龄低剂量中药组肉鸡肝组织III型蛋白含量显著低于模型组(P<0.01或P<0.05)；各日龄L-Arg组肉鸡肝组织III型蛋白含量显著低于模型组(P<0.05或P<0.01)。

图4 肉鸡肝组织III型蛋白含量Fig.4 The level of collagen type III protein in liver of broilers

3 讨 论

肉鸡腹水综合征是一种常见的营养代谢病，肝是机体重要的代谢和解毒器官，在疾病的发生发展中有重要作用。本试验剖检结果显示，病鸡腹腔内有大量稻草黄色胶状液体，肝门静脉充血，肝充血肿大呈暗红色，边缘钝圆，被膜紧张，表面有淡黄色血浆纤维蛋白凝块附着，或呈斑驳黄色，表面不平，有胶状凝块附着。AS肉鸡心脏指数、肝脏指数和肺脏指数显著增加表明脏器发生增生、充血和肿大，脾脏指数显著减小表明脾萎缩，免疫功能减退。

目前，对AS的研究主要集中在肺动脉高压、心功能等方面，而对肝的相关研究较少[1]。肝纤维化[12]是指肝细胞损伤、炎症等病因导致的慢性肝损伤，肝纤维结缔组织病理性增生的过程，待发展到假小叶形成时则称为肝硬化。哺乳动物及人类医学研究表明，正常肝内含有少量细胞外基质，正常Disse间隙由基底膜样基质构成，主要为IV和VI型胶原蛋白，使肝窦内维持相对稳定的微循环。当肝受到炎症等刺激或损伤时，如脂肪性、非酒精性脂肪性肝炎[13]、病毒性肝炎[14]、酒精性肝纤维化[15]等疾病，肝星状细胞被缺氧、炎症因子等各种刺激激活，变成具有增生性、移动性、收缩性和纤维原性的肌成纤维细胞，合成分泌α-SMA，因此α-SMA被认为是肝星状细胞活化的标志[16]。当连续的基底膜形成，内皮窗孔消失，肝Disse间隙中富含IV和VI型胶原的低密度基底膜胶原转化为富含纤维形成胶原的高密度间质胶原，即I和III型胶原[17]。待发展到肝纤维化时，I和III型胶原蛋白含量可达细胞外基质的80%～95%[18]，此时肝小叶正常结构丧失，促使炎症介质和活性氧产生，诱导肝细胞变性坏死[19]，肝窦内皮细胞微孔减少，窦内血流减少，肝窦内压力和肝内血管阻力增加，血液动力学改变，门静脉系统血流增加，是形成门静脉系统高压的直接原因[20]，是腹水形成的主要原因之一。正常的肝纤维化病程较长，但在肉鸡生长发育过程中，由于遗传育种学对肉鸡增重性能的选择，而没有相应改善其心肺功能，使肉鸡能自发形成肺动脉高压，导致组织缺氧[21]，同时肉鸡饲养过程中使用含有大量蛋白质的饲料，提高机体代谢率，增加耗氧量，因此肝纤维化病程发展迅速。

中兽医学认为，AS症候主要由气血双虚、气滞血瘀、水湿停聚所致，因此治疗AS宜活血行气、化湿逐瘀、疏肝理气，与中医理论分析肝纤维化为正气不足、肝血瘀阻、湿热耗阴所致相似。本试验过程中，AS肉鸡心、肝和肺充血肿大，脾萎缩，且肝呈肝纤维化症状，腹腔有大量稻草黄色腹水，病理组织学显示肝细胞间隙中有大量胶原蛋白沉积，肝正常生理结构被破坏。

人类医学临床常用补虚药和活血化瘀等药防治肝纤维化，如丹参、黄芪、柴胡、白术等[22]。动物医学常用腹水消[23]、苓桂术甘汤[24]等中药防治AS发生。本试验中，AS肉鸡肝组织α-SMA、I型和III型胶原蛋白含量显著升高，表明AS肉鸡肝损伤，刺激肝组织大量合成α-SMA、I型和III型胶原蛋白，促进腹水形成，参与AS发生发展，当归、黄芪、丹参、茯苓等组成的复方中药和L-Arg能有效减少肝组织α-SMA、I型和III型胶原蛋白含量，维持肝正常生理结构，保护肝功能，有效防治AS。有研究表明，当归属于重要的活血化瘀中药，能在肝纤维化早、中期显著减轻肝纤维化程度，降低肝内胶原含量[25]；黄芪具有补中益气等功效，是主要的扶正药物之一，能明显降低受损肝总胶原、I型、III型和V型胶原的含量[26]；丹参有活血祛瘀的功效，丹参酸乙是其主要成分之一，能显著提高肝细胞非胶原蛋白生成量，降低胶原蛋白生成率和生成量[27]；茯苓健脾利水，能增加肝硬化中胶原纤维的降解，降低胶原纤维含量[28]。L-Arg能通过产生外源性一氧化氮(nitric oxide，NO)发挥生理作用，而NO能调节肝星状细胞和内皮细胞，阻止肝星状细胞收缩，松弛已收缩的细胞并减少α-SMA表达[29]，同时通过调节肝血流，降低组织细胞氧化损伤，保护肝功能[30]。这些中药的药理作用是本试验所用复方防治AS的药理基础，但中药及复方中药对机体组织细胞的药理作用是通过多种活性物质单一或协同作用于多种受体，多重作用于一条或数条信号通路产生，因此能整体调节机体各项功能，提高免疫力。

本试验表明，肝α-SMA、I型胶原和III型胶原参与了AS的发生发展，复方中药能通过影响肝α-SMA、I型和III型胶原蛋白防治AS，但是其具体机制尚待进一步研究。

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(编辑 白永平)

The Effect of the Compound Recipe of the Traditional Chinese Medicine on Collagen in Liver of Broilers with Ascites Syndrome

HAN Ye-chen1, ZHANG Juan1, WANG Jun-wu1, YUN Shi-yu1, WU Hai-ping1, WEN Shuang1,ZHAO Dong-dong1, WANG Zhuo1, SU Xiao-fei2, ZHU Yu-bo3, CHENG Jia1,SUN Yao-gui1, WANG Wen-kui1, LI Hong-quan1, DUAN Zhi-bian1*

(1.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu030801,China; 2.ShanxiHusbandryandVeterinarySchool,Taiyuan030024,China; 3.CollegeofAnimalScinece,HenanInstituteofScienceandTechnology,Xinxiang453003,China)

The objective of this study was to investigate the changes of α-smooth muscle actin (α-SMA), collagen type I and collagen type III in liver of broilers with ascites syndrome (AS) and the prevention and treatment of the compound recipe of the traditional Chinese medicine (TCM) on AS. A total of 309 7-day-old Ross broilers were randomly divided into six groups, group None was bred with normal diet, the rest were bred with high-energy diet derived from standard diet added with 3% lard and 4% fish meal and 0.12% Na+in drinking water at 9-11 ℃ to induce AS, group Control was given no medicine, compound recipe of the TCM groups (High, Middle, Low) were respectively given a dose of 2, 1, 0.5 mL·kg-1of the TCM in drinking water, and group L-Arg with 1% L-arginine in diet. The results showed that at 15, 25, 35 and 45 days of age, compared with group None, the incidence of AS, ascites heart index, heart index, lung index, liver index, the levels of α-SMA, collagen type I and collagen type III in liver of broilers in group Control were increased significantly (P<0.01 orP<0.05), and spleen index in group Control was decreased significantly (P<0.01 orP<0.05). Compared with group Control, the items above were all improved in compound recipe of the traditional Chinese medicine groups and group L-Arg (P<0.01 orP<0.05). The study showed the increases of the levels of α-SMA, collagen type I and collagen type III in liver of broilers participated in the pathogenesis of AS. The studied compound recipe of the traditional Chinese medicine with the role of tonifying qi-blood and activating qi to excrete water can prevent and treat AS of broilers effectively, and the mechanism was related to the decreases of compound recipe of the traditional Chinese medicine on the levels of α-SMA, collagen type I and collagen type III in liver of broilers with AS.

compound recipe of the traditional Chinese medicine; ascites syndrome; α-smooth muscle actin; collagen type I; collagen type III

10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.020

2016-06-30

山西省科技攻关项目(20140311022-1)；山西农业大学横向科技项目(2013HX28)

韩烨晨(1992-)，女，黑龙江省双鸭山人，硕士生，主要从事中药防治动物血管病变研究，E-mail：hanyechen1992@163.com

*通信作者：段智变，女，山西祁县人，博士，教授，博士生导师，主要从事中兽医药对动物血管病变及脾胃病证研究，E-mail：duanzhibian2008@aliyun.com

S853.33

A

0366-6964(2016)11-2310-08