发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡产蛋性能、鸡蛋品质、血清生化指标和肠道菌群结构的影响

时间：2024-07-28

曾李，倪冬姣，，熊爱军，张增玉，邢深，吴日红，邢孔萍，郭丽，卢秋咏

(1 播恩生物技术股份有限公司，江西赣州 341000；2农业农村部生物饲料重点实验室，江西赣州 341000；3 佛山播恩生物科技有限公司，广东佛山 528000)

我国是油料生产和消耗大国，除大豆外，每年榨取各类油脂后，能剩下1 500万t以上的各种饼粕。由于受多种因素的制约，饼粕在饲料中应用不足30%[1]，大量饼粕只能简单用作肥料或者废弃，不但浪费资源，而且严重污染环境。在当前集约化规模养殖生产与生态环境保护相矛盾的情况下，有效合理地利用饼粕成为研究热点。茶籽粕是茶籽提取茶油后剩下的残渣，据统计我国每年有近百万吨茶籽粕未被有效利用。由于加工工艺的不同，茶籽粕含有浓度高低不等的茶皂素以及单宁等抗营养因子，同时还含有较高水平的植物多糖、多酚和类黄酮等功能性营养成分[2-4]。微生物发酵可以降解茶籽粕中的抗营养因子，提高发酵料中有机酸和小肽的含量，降低茶籽粕中粗纤维的含量。发酵茶籽粕的生产工艺要求低，生产成本不高。本研究主要是选取海兰褐蛋鸡，在蛋鸡基础日粮中添加发酵茶籽粕，探讨其对海兰褐蛋鸡生产性能、鸡蛋品质、血清生化指标以及肠道菌群结构的影响情况，为发酵茶籽粕在蛋鸡生产中的科学应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 发酵菌种

枯草芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌均由农业农村部生物饲料重点实验室提供。

1.1.2 发酵茶籽粕

混合发酵菌种为乳酸菌、酵母菌和枯草芽孢杆菌，按5∶4∶1的比例混合。茶籽粕、玉米和豆粕按8∶1∶1的比例混合，随后均匀粉碎作为发酵底物。初始发酵条件为：pH=6～7，温度为30 ℃～32 ℃，发酵水分28%～30%，固态密闭发酵7 d后，储存备用。发酵茶籽粕的营养成分指标见表1。

1.1.3 试验日粮

基础日粮由播恩生物技术股份有限公司提供。日粮组成及营养水平参照NRC和海兰褐育种公司蛋鸡营养标准配制，见表2。

1.1.4 试验动物

150日龄健康的海兰褐蛋鸡1 200羽。

1.2 试验设计及饲养管理

1 200羽150日龄的健康海兰褐蛋鸡随机分成2组，每组2个重复，每个重复300羽蛋鸡。1组为对照组，饲喂基础日粮；2组为试验组，所用饲料由基础日粮添加4%发酵茶籽粕混合而成。试验蛋鸡采用4层阶梯式笼养；每天以人工光照和自然光照相结合的方式进行光明，时间为16 h；通风采用机械通风＋自然通风；自由采食，自由饮水；按正常免疫程序接种疫苗，定期消毒。试验期为30 d，每日6:30、11:30和17:30喂料，每日11:00和17:00收集蛋，并进行计数、标记和存放，同时计算每日的产蛋率和破蛋率。

1.3 检测指标和方法

1.3.1 产蛋性能指标的测定

试验期间以重复为单位，每天记录蛋鸡的采食量、破蛋数、产蛋数和产蛋重量，每周统计1次每日平均采食量、产蛋率、破蛋率和料蛋比。

1.3.2 鸡蛋品质测定

试验结束当天，以重复为单位，每个重复随机抽取10枚鸡蛋，测定鸡蛋品质。测定指标包括蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄高度、蛋黄颜色与哈氏单位。

1.3.3 血清生化指标测定

在试验结束当天，从每个重复中随机选取10羽蛋鸡，翅静脉采血，血液分别置于抗凝管中，静置待有血清析出然后3 000 r/min离心10 min，取上层清液，置于-20 ℃冰箱待测，采用全自动生化分析仪测定，试剂盒由广州京诚检测集团提供。测定总蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯和尿酸的含量。

1.3.4 肠道菌群测定

试验结束当天，从每重复中抽取5羽鸡屠宰，分别取回肠和盲肠内容物各2 g，放入已灭菌的塑料袋中，采用平板培养计数法进行细菌计数，测定乳酸菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量，以每克肠道内容物中细菌总数的对数表示。

1.4 数据分析方法

试验数据用生物统计软件SAS 9.1进行单因素方差分析，试验的结果以“平均值±标准差”来表示。

2 结果和分析

2.1 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡产蛋性能的影响

由表3可知，与对照组蛋鸡相比，试验组日粮添加发酵茶籽粕后，蛋鸡的日采食量提高了3.64%(P＜0.05)，产蛋率显著提高2.81%(P＜0.05)，破蛋率显著下降(P＜0.05)；料蛋比差异不显著(P＞0.05)。

2.2 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡鸡蛋品质的影响

由表4可知，与对照组蛋鸡所产蛋相比，试验组蛋鸡所产蛋的蛋壳厚度和蛋壳强度分别提高了10.53%(P＜0.05)和11.96%(P＜0.05)；蛋黄高度、蛋黄颜色和哈氏单位均有不同程度的提高，但差异不显著(P＞0.05)。

2.3 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡血清生化指标的影响

由表5可知，与对照组蛋鸡相比，试验组蛋鸡血清中总蛋白、白蛋白、葡糖糖和甘油三酯的水平偏低，但差异不显著(P＞0.05)；谷丙转氨酶(降低3.93%，P＜0.05)、谷草转氨酶(降低8.41%，P＜0.05)和尿酸(P＜0.05)的含量显著降低。

2.4 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡肠道菌群结构的影响

从表6可知，与对照组蛋鸡的肠道菌群结构相比，日粮中添加发酵茶籽粕后，试验组蛋鸡回肠中乳酸菌含量显著增加(P＜0.05)、大肠杆菌和沙门氏菌的数量显著减少(P＜0.05)；盲肠中乳酸菌的数量有所增加(P＞0.05)，大肠杆菌的数量显著减少(P＜0.05)，沙门氏菌的数量有所减少(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡产蛋性能的影响

发酵茶籽粕是经过脱壳、脱皂和微生物发酵等一系列技术手段处理后产生的一种优质饲料原料。有研究表明，茶籽粕中的提取物可作为一种天然绿色的饲料添加剂来代替抗生素，减少饲料中的抗生素使用量[5]。但是，未经发酵处理的茶籽粕含有较高水平的抗营养物质，会严重影响饲料的适口性和动物肠道的消化吸收能力。本研究的试验结果显示：在基础日粮中添加4%的发酵茶籽粕，海兰褐蛋鸡的平均日采食量提高3.64%(P＜0.05)，平均产蛋率提高2.81%(P＜0.05)，破蛋率显著降低(P＜0.05)。其原因可能是由于茶籽粕经微生物发酵后，所含的大量纤维素被转化为可消化的单糖和低聚糖，改善了适口性；同时产生了高含量的有机酸、小肽和酶，并含有大量的活性益生菌。这些发酵代谢产物提高了蛋鸡对饲料中能量、蛋白质、钙和磷等养分的消化、吸收和利用。此外，发酵茶籽粕还含有微量的茶皂素、单宁和茶多酚等功能活性成分。单宁能够降低蛋鸡肠道的蠕动，提高饲料消化率[6]，茶皂素能够增加蛋鸡肠道黏膜的通透性，促进营养物质的吸收，提高饲料利用效率[4]。茶多酚的杀菌和抗氧化等功能可促进动物肠道吸收和利用日粮中的钙、磷以及微量元素，增加蛋壳中钙的含量，提高蛋重及产蛋率，增强蛋壳硬度，降低破蛋率[7]。本试验的结果也同样显示：发酵茶籽粕在提高产蛋率的同时，显著降低了海兰褐蛋鸡产蛋的破蛋率。

3.2 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡鸡蛋品质的影响

蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄颜色以及哈氏单位都是评价鸡蛋品质的重要指标[8]。蛋壳厚度及强度主要表现在蛋壳致密坚固性上，其会受到饲料的营养物质含量、养殖环境以及蛋鸡健康状况等不同条件的影响。崔闯飞等[9]的研究表明，在蛋鸡饲料中添加枯草芽孢杆菌，鸡蛋的蛋壳厚度和强度得到了明显的提高。而本试验也获得了相似的结果，日粮中添加用枯草芽孢杆菌发酵的茶籽粕后，蛋鸡所产蛋的蛋壳厚度比对照组的提高了10.53%，蛋壳强度提高了11.96%。哈氏单位与鸡蛋新鲜程度呈正相关，并且哈氏单位可以体现鸡蛋的蛋白质含量，其值越高表明蛋白黏稠度越高，鸡蛋也就越新鲜[10]。另外，益生菌能促进蛋鸡对多种营养物质的吸收，而本试验所用的枯草芽孢杆菌、酵母菌以及乳酸菌在发酵茶籽粕中以活菌形式存在，促进了海兰褐蛋鸡对维生素A和胡萝卜素等的吸收，加速了有效色素的沉淀，从而提升了蛋黄的颜色质量。本试验的结果跟前人的研究结果类似，说明发酵茶籽粕经过复合益生菌发酵后含有高水平的活菌，可实现跟益生菌类似的功能，改善海兰褐蛋鸡的鸡蛋品质。

3.3 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡血清生化指标的影响

在本试验中，日粮中添加发酵茶籽粕后，蛋鸡血清中总蛋白、白蛋白和免疫相关的酶低于对照组蛋鸡的，但是差异不显著，说明降低程度是在适当可控的范围内变化。血液中总蛋白、白蛋白和酶类含量的高低表明了机体代谢情况以及免疫情况[11]，这些指标在一定的范围内变化，说明试验所用的蛋鸡处于相当健康的水平。研究表明，尿酸作为蛋禽类氨基酸的最终代谢产物，其在血清中的浓度反映了机体对蛋白质分解的程度以及效率，本试验在日粮中添加发酵茶籽粕降低了鸡血清中的尿酸含量。有研究表明，血清中尿酸的减少意味着蛋白质在机体其他部位的沉积增多[12]。在本试验中，实验组蛋鸡的产蛋率、料蛋比以及鸡蛋品质等结果也证实了发酵茶籽粕可以降低蛋鸡血清中尿酸的含量，从而间接提高了试验组蛋鸡的产蛋率及鸡蛋品质。

3.4 发酵茶籽粕对海兰褐蛋鸡肠道菌群结构的影响

蛋鸡肠道内存在大量有益菌和有害菌，它们一方面参与肠道对营养物质的消化吸收以及机体对营养物质的转运和代谢等，另一方面与肠道的相互作用达成共生关系后一起维持肠道内环境的稳态平衡。所以，蛋鸡肠道菌群结构的变化会影响蛋鸡的肠道健康，并影响机体的健康。冯华等[13]在日粮中添加乳酸菌后，蛋鸡肠道中的大肠杆菌被抑制，同时数量显著降低。马春阳等[14]在蛋鸡基础日粮中添加枯草芽孢杆菌后，发现蛋鸡盲肠乳酸菌和双歧杆菌的数量显著增加，大肠杆菌数量显著减少。本试验的结果也证实在海兰褐蛋鸡基础日粮中添加发酵茶籽粕后，蛋鸡肠道中乳酸菌的生长加快，沙门氏菌和大肠杆菌等有害微生物被抑制。另外，发酵茶籽粕所含的微量茶皂素、茶多酚和茶籽多糖等活性成分也可能会对病原菌产生一定的影响，从而改善肠道菌群的结构，促进海兰褐蛋鸡对营养物质更好地吸收，影响其生产性能和鸡蛋品质。