一例雏鸭坦布苏病的诊断与治疗

余连喜，黄建军，黄 真，梁雄燕

（1.江陵县畜牧兽医局，湖北 荆州 434100；2.长江大学动物科学学院，湖北 荆州 434025）

鸭坦布苏病毒病 （Duck Tembusuvirus，DTMUV）是一种由黄病毒科黄病毒属恩塔亚病毒群中的黄病毒引起的可以导致鸭共济失调、瘫痪、卵巢出血坏死及产蛋量骤降的传染性疾病[1-2]。2010年该病首次在我国的江苏、浙江和福建等地区的鸭群中暴发[3-5]，随后迅速蔓延到全国各地鸭群[6-9]，成为严重威胁我国养鸭业的重要疾病。

2019年秋，湖北荆州某蛋鸭养殖场的5000只3周龄雏鸭突然出现采食量下降、排绿色稀便，进而站立不稳、共济失调和迅速死亡。经过剖检和实验室诊断，确诊为鸭坦布苏病毒感染。用小柴胡散和扶正解毒散等药物治疗后鸭群病情迅速得到控制，并逐步恢复健康。

1 材料与方法

1.1 病例及主要试验材料

病鸭为湖北荆州某蛋鸭场的3周龄雏鸭。RNA提取试剂盒、反转录试剂盒和PCR Mix等相关试剂均购自于北京艾德莱生物科技有限公司。

1.2 临床诊断与剖检

询问病史，观察送检病鸭的临床症状，并按常规方法进行病理学剖检。

1.3 病原学检测

取具有明显病变的病鸭脑组织，用市售的RNA提取试剂盒提取RNA；以cDNA第一链合成试剂盒的随机引物为引物，合成cDNA第一链作为模板；参照文献[5，10-12]及genebank中的相关序列设计合成鸭坦布苏病毒特异性PCR检测引物，进行鸭坦布苏病毒核酸检测。RNA提取、cDNA第一链合成具体操作按照试剂盒说明书进行；PCR引物由武汉擎科创新生物科技公司合成，基因序列见表1。PCR体系采用25 μL体系，即：2× PCR Mix 12.5 μL，cDNA 模板 2 μL，10 pmol/μL的上下游引物DTMUV-iF、DTMUV-iR 各0.5 μL，去离子 H2O 9.5 μL。 热循环条件为：94 ℃2 min；94 ℃ 10 s,55 ℃ 10 s,72 ℃ 10 s，30个循环；72℃ 5 min；16℃ 10 min。PCR产物用1%琼脂糖电泳进行检测。

表1 鸭坦布苏病毒特异性RT-PCR检测引物

1.4 治疗

及时将确诊鸭群中有明显症状的鸭只从鸭群中挑出并分栏隔离，鸭舍每天用聚维酮碘进行消毒。其余鸭只均使用小柴胡散粉剂和葡萄糖饮水，扶正解毒散拌料进行治疗。小柴胡散粉剂和扶正解毒散均为江西某药厂生产，具体用量按以下比例进行：小柴胡散粉剂100 g和葡萄糖粉3 kg加水100 L，供鸭群饮用。扶正解毒散按0.1%混饲，5 d为一个疗程，视具体情况可适当延长用药时间或疗程。治疗过程中，对发病鸭只及时进行分栏隔离，对死亡鸭只及时无害化处理。

2 结果

2.1 病史与临床症状

畜主自诉鸭场共5000只3周龄的雏鸭，3 d前采食量突然下降，发病后第2天鸭群中部分鸭只跛行，站立不稳，并出现零星死亡。第3天鸭只出现大批量死亡，3 d共死亡213只。为了弄清病因，将病鸭送检，送检的5只病鸭外观羽毛蓬松凌乱，精神萎靡，其中3只斜颈跛行，站立不稳，排绿色粪便。

2.2 病理变化

剖检发现病鸭主要表现为脑膜充血、出血，脾脏肿大，肝脏有不规则出血点，卵巢及肾脏有散在出血点，如图1。

2.3 特异性RT-PCR检测结果

取具有临床症状和剖检病变明显的病鸭脑组织提取RNA，用随机引物进行反转录，合成cDNA第一链作为模板，然后用2对鸭坦布苏病毒特异性引物分别进行PCR检测，结果两对引物分别从被检样本中扩增出约250 bp和400 bp大小的条带，与鸭坦布苏病毒特异性RT-PCR预期扩增片段大小相符，如图2。

2.4 治疗结果

对患病鸭群使用小柴胡散饮水和扶正解毒散拌料进行治疗，用药3 d后鸭群精神状态明显好转，日死亡数大幅度减少，用药5 d后停止死亡，用药10 d后鸭群恢复正常。全程共死亡288只，死亡率5.76%。

3 讨论

鸭坦布苏病毒病是一种由黄病毒科黄病毒属恩塔亚病毒群的坦布苏病毒引起的鸭病毒性传染病[1-2]。鸭坦布苏病毒病可以通过蚊虫传播，不同日龄或不同阶段的鸭都可感染发病，临床表现和症状不尽相同，而且这些症状容易与其他疾病相混淆[1,3,13]，所以在临床上常需与临床表现、病理剖检结合病原学进行确诊。本研究中养殖场送检的鸭以站立不稳、跛行和共济失调为主要症状，病理剖检主要表现为脑膜充血出血，高度疑似鸭黄病感染，进一步用两对鸭黄病特异性引物进行RT-PCR检测，结果两对特异性引物均扩增出了与鸭坦布苏病毒对应的特异性条带。因此，确诊为鸭坦布苏病毒感染。

对鸭坦布苏病毒病目前仍无特效治疗药物，我国虽然已研制出可用于预防鸭坦布苏病毒病的疫苗，但是在生产实践中一些预防意识不强的中小规模养殖户常忽视疫苗接种而给该病的发生提供了可乘之机，因此近年该病在我国各地鸭群中时有发生。中草药是我国的瑰宝，其源于天然，具有副作用小、疗效确切、价格相对低廉的特点和优势，在我国人和动物疫病防治中一直发挥着重要作用，尤其在防治动物病毒性疾病方面效果显著。据报道，在临床试验中一些中草药制剂可以对鸭坦布苏病毒病起到一定的防治作用[13-17]。为了尽快控制疫情，我们尝试用中草药制剂小柴胡散饮水和扶正解毒散拌料混饲，对患病鸭群进行治疗，结果鸭群的病情得以迅速控制，治愈率达到90%以上，收到了较好的疗效。这一结果表明，中草药在鸭的坦布苏病毒病防治中具有较大的探索空间。