五味子、乌梅对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用

吴贤丽　庞载元　敖茂程　苏德永　李靖　华毅

（攀枝花市中心医院，四川攀枝花617067）

五味子、乌梅对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用

吴贤丽庞载元敖茂程苏德永李靖华毅

（攀枝花市中心医院，四川攀枝花617067）

目的：通过研究五味子、乌梅对广泛耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用，为临床治疗其感染寻找新的出路。方法：采用中药抗菌试验试管倍比稀释法测定药物的最低抑菌浓度。结果：五味子、乌梅对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌有一定的体外抑菌作用，最小抑菌浓度均值分别为63.54 mg/mL，58.85 mg/mL。结论：五味子、乌梅对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌有一定的抑菌作用，本地与外地收集的菌株，抑菌作用无显著性差异（P＞0.05）。

五味子；乌梅；广泛耐药鲍曼不动杆菌；体外抑菌试验

鲍曼不动杆菌具有强大的获得耐药性和克隆传播的能力，多重耐药、广泛耐药、全耐药鲍曼不动杆菌呈世界性流行，已成为我国院内感染最重要的病原菌之一［1］。广泛耐药鲍曼不动杆菌是指对临床常用的5类抗生素耐药，仅对1～2种潜在有抗不动杆菌活性的药物（主要指替加环素或多黏菌素）敏感的菌株［1］。多黏菌素类药物的肾毒性及神经系统不良反应发生率高，且多黏菌素E存在明显的异质性耐药，常需联合应用其他抗菌药物［2］。替加环素对耐亚胺培南鲍曼不动杆菌有较好的抗菌活性［3］，但血药浓度、脑脊液浓度低且价格过于昂贵，常需与其他抗菌药物联合应用［4］。开发新的抗生素是克服该菌耐药性的有效途径，但新药开发周期长、投资大，医药经费负担重。

中药治疗感染性疾病有悠久的历史，常用的抗菌中草药有近百种［5］，经文献检索，有关中药抑菌的研究较多，但未见五味子、乌梅对广泛耐药鲍曼不动杆菌抑菌、杀菌的研究报道，因此，研究其对广泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性具有重大的现实意义。

本实验采用中药抗菌试验试管倍比稀释法，参考了有关文献［6］，并做了相应的改进。现报告如下：

1　材料与方法

1.1材料

孵箱，1 000 μL无菌吸头，1 000 μL加样枪，带帽无菌试管若干，比浊仪，API 0.85%3 mL无菌盐水管，梅里埃的非苛养革兰阴性杆菌药敏专用肉汤，试管架若干。

1.2菌株的选择

收集近期（2010年4月-2014年3月）来自本院和外地（浙江大学医学院附属第一医院）的广泛耐药鲍曼不动杆菌60株，选择标准菌株ATCC 27853，ATCC25922，ATCC25923作对比分析。

1.3中药的选择

通过查阅文献，选择五味子、乌梅（四川新绿色药业科技发展股份有限公司生产，产品批号分别为：1410063，1401008）2种有抗菌活性的中药配方颗粒。

1.4中药药液的制备

取50 mL的无菌烧杯，用无菌蒸馏水溶解中药配方颗粒，使其药液相当于生药的质量浓度为1 000 mg/mL。

1.5细菌的培养与稀释

将选定的实验菌株，接种血平板培养基37℃孵育24 h。取API 0.85%3 mL无菌盐水管，挑取菌落配制成0.5麦氏比浊单位，使其含菌量为1.5× 108cfu/L。

1.6最小抑菌浓度（MIC）的测定

按临床标准化协会（CLSI）推荐的液体稀释法测定实验菌株的MIC。具体应用倍比稀释法对药物进行稀释，稀释液为梅里埃的非苛养革兰阴性杆菌药敏专用肉汤。

1.7操作步骤

在10支无菌试管中各加入1 mL肉汤，于第一管加1 mL中药（1 000 mg/mL），充分混匀后取出1 mL加入第2管，混匀后取出1 mL加入第3管，反复操作至第9管，混匀后第9管取出1 mL液体丢弃，第10管不加药液作阳性对照，在每支试管中加入0.5麦氏单位的菌液20 μL，第9管不加菌液做阴性对照，充分混匀后放置37℃孵箱中培养，24 h后观察细菌生长情况。在阳性对照管细菌生长正常，阴性对照管无菌生长的条件下，判断无浑浊试管的最小浓度即为MIC。以上所有无菌操作均需在生物安全柜中进行。

2　结果

见表1。五味子、乌梅对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌有不同程度的体外抑菌作用，MIC均值分别为63.54 mg/mL，58.85 mg/mL。

3　讨论

抗生素的广泛和不合理应用，使细菌的耐药性日趋严重，医院由广泛耐药鲍曼不动杆菌引起的感染呈现逐年升高的趋势，特别是重症监护室（ICU）尤为严重。由于可供选择的药物少，且疗效差、不良反应大，给临床治疗带来了困难，而中药对广泛耐药鲍曼不动杆菌有一定的体外抑菌作用。

由表1可见，五味子、乌梅对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌有不同程度的体外抑菌作用，MIC均值分别为63.54 mg/mL，58.85 mg/mL。五味子抑菌浓度比冷会勇等［7］报道的多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌浓度高。2种中药的抑菌浓度比庞载元等［8］报道的广泛耐药铜绿假单胞菌抑菌浓度低，2种中药本地与外地收集的菌株，抑菌作用无显著性差异（P＞0.05）。

常用的抗菌中药有近百种，其抑菌浓度远高于抗生素［9］，按常规剂量口服血药浓度远远达不到抑菌浓度。以本实验为例：五味子MIC均值为63.54 mg/mL，按成人4 000 mL体液算，需要一次口服254 g生药才可能在体内达到抑菌浓度，而五味子的常规剂量为3～6 g［10］，远远达不到治疗所需的血药浓度；乌梅MIC均值为58.85 mg/mL，按成人4 000 mL体液算，需要一次口服235 g生药才可能在体内达到抑菌浓度，而乌梅的常规剂量为3～30 g［10］，也远远达不到治疗的血药浓度。彭乙华等［11］研究报道中药单体注射制剂棓丙酯对多重耐药鲍曼不动杆菌有较高的抑菌活性，体外最低抑菌浓度范围64～128 μg/mL，但按成人体液4 000 mL算，需要药物256～512 mg，而棓丙酯静脉滴注1次的允许用量，不超过180 mg，在人体内也很难达到有效抑菌浓度。按传统给药模式难以发挥中药的抗菌作用。

表1　2种中药对60株广泛耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用

中药治疗呼吸道感染，吸入给药是不错的选择。由于呼吸道面积大，毛细血管丰富、致密，药物吸收快，吸收速率仅次于静脉给药［12］，药物用量少，可以克服口服血药浓度过低的瓶颈，通过雾化吸入，药物可直达病所。中药雾化吸入治疗肺炎［13-15］和上呼吸道感染［16-18］的报道较多，疗效肯定。本研究资料显示，虽然五味子、乌梅对广泛耐药鲍曼不动杆菌有不同的体外抗菌活性，但按常规剂量口服在体内远远不能达到应有的抑菌浓度。中药雾化吸入治疗广泛耐药鲍曼不动杆菌引起的肺炎是值得一试的方法。

在中药抗菌研究的过程中，前人的研究结果提示中药在抗菌作用上蕴藏着巨大潜力。中药的给药途径有很多，在应用研究上需要打破常规，不断创新与开拓，才能使中药更好地造福于人类。

［1］陈佰义，何礼贤，胡必杰，等.中国鲍曼不动杆菌感染诊治与防控专家共识［J］.中华医学杂志，2012，92（2）：76-85.

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［10］张廷模.临床中药学［M］.北京：中国中医药出版社，2004：579-580.

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［12］张廷模.临床中药学［M］.北京：中国中医药出版社，2004：99-101.

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Bacteriostatic Effect of Schisandra and Jaume on Sixty Strains of Extensively Drug-resistant Acinetobacter baumannii

Wu Xianli，Pang Zaiyuan，Ao Maocheng，Su Deyong，Li Jing，Hua Yi
（Central Hospital of Panzhihua City，Sichuan Panzhihua 617067，China）

Objective：To investigate the bacteriostatic effect of schisandra and jaume on extensively drug-resistant Acinetobacter baumannii as well as a novel route to the treatment of clinical infection.Methods：The minimum inhibiting concentrations（MICs）of drugs were determined by antibacterial test with doubling dilution in tube. Results：Both schisandra and jaume showed inhibitory effects on the 60 extensively drug-resistant Acinetobacter baumannii strains，of which the mean MICs were 63.54 and 58.85 mg/mL respectively.Conclusion：Schisandra and jaume showed a certain inhibitory effect on 60 extensively drug-resistant Acinetobacter baumannii strains，which showed no difference in local and nonlocal isolates（P＞0.05）.

Scutellaria；Jaume；Extensively Drug-Resistant Acinetobacter baumannii；In vitro Antibacterial Test

10.3969/j.issn.1672-5433.2015.12.003

2015-08-28）

攀枝花市2015年度市级财政科技专项资金项目（2015cy-s-25）

吴贤丽，女，技师。研究方向：临床微生物检验。E-mail：12252935@qq.com

庞载元，男，副主任技师。研究方向：临床微生物检验。通讯作者E-mail：yangfan621225@qq.com